RAA-CRISPR/Cas12a 靶向 recN基因：畜牧与鲜肉中猪链球菌现场速检新突破

猪链球菌（Streptococcus suis）严重威胁养猪业与公共健康，现有检测方法存在缺陷。研究人员开展针对猪链球菌快速精准检测方法的研究，筛选 recN基因作为靶点，建立 RAA-CRISPR/Cas12a 系统。该系统 30 分钟内完成检测，灵敏度达 2.44×101 copies/μL 和 2.1×101 CFU，特异性 100%，为现场检测提供高效方案。

　　猪链球菌（Streptococcus suis）是养猪业中的主要细菌病原体，会使感染的猪患上脑膜炎、关节炎等疾病。由于它具有人畜共患的可能性，尤其对有皮肤损伤的人而言，还存在重大的公共卫生风险。目前的检测方法，像传统的基于培养的技术和聚合酶链式反应（PCR）检测，既耗时又费力，且准确性不足。

为解决这些局限，本研究旨在开发一种针对猪链球菌的快速精准检测方法。研究人员利用全基因组测序（WGS）和多序列比对，确定 rec_N基因是一个高度特异性的分子靶点。随后，建立了一种全新的等温检测方法，将重组酶聚合扩增技术（RAA）与规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白 12a（CRISPR/Cas12a）相结合。

与传统的以 gdh 基因为靶点的 PCR 相比，这种基于 RAA-CRISPR/Cas12a 的系统展现出了更高的灵敏度，无需专用设备，30 分钟内就能完成检测。该方法在 30 分钟内，检测灵敏度可达 2.44×10¹ copies/μL 和 2.1×10¹ CFU，特异性为 100% 。它在检测速度和可靠性上优于传统 PCR，还摆脱了对专用设备的依赖。这种方法专为现场应用设计，成本效益高（每次检测 1 美元），操作简便，可用于猪场和新鲜猪肉中猪链球菌的现场检测，有助于加强畜牧业的疫情防控和预防性保健工作。