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为探究肿瘤抑制基因（TSGs）对胃癌（GAC）化疗耐药的影响，研究人员开展了相关研究。结果发现，TP53 和 PTEN 功能失调会改变 GAC 的药物反应，抑制 CD44 可增敏。这为 GAC 化疗方案选择提供参考。
胃癌（Gastric adenocarcinoma，GAC）是一种极具侵袭性的恶性肿瘤，预后较差。尽管全球癌症发病率呈下降趋势，但 GAC 依然是全球常见癌症之一，每年有近百万新发病例和超 60 万死亡病例。手术切除是早期 GAC 的潜在治愈方法，新辅助化疗可提高患者 5 年生存率，但多数患者确诊时已处于晚期，无法手术，只能采用全身治疗，然而这些治疗方案常伴有显著毒性，且 GAC 细胞的多药耐药（Multidrug resistance，MDR）表型严重阻碍了治疗效果的提升，使得改善患者预后困难重重。因此，深入探究 GAC 的耐药机制，寻找新的治疗靶点和策略迫在眉睫。
国外研究人员针对这一难题开展了研究，旨在评估沉默与 GAC 相关的关键肿瘤抑制基因（Tumor suppressor genes，TSGs）对耐药组（resistome）的影响，以识别使 GAC 对药物治疗敏感的新靶点 。研究成果发表在《Biomedicine 》上。该研究为理解 GAC 的耐药机制提供了新视角，有助于为患者制定更有效的化疗方案，对改善 GAC 患者的治疗预后具有重要意义。
研究人员主要运用了以下关键技术方法：一是从癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas，TCGA）获取胃腺癌患者的转录组和临床数据进行生物信息学分析；二是收集西班牙患者的 GAC 肿瘤及癌旁组织样本进行实验验证；三是利用 CRISPR/Cas9 技术构建基因敲除的 AGS 细胞系；四是采用 MTT - 甲臜试验和数字全息显微镜检测细胞活力和增殖率；五是通过定量 PCR（Quantitative polymerase chain reaction，qPCR）和免疫印迹试验检测基因和蛋白表达水平。
研究结果
- TSG 的选择及表达分析：通过文献调研，筛选出 TP53、ARID1A 和 PTEN 三个高频改变的 TSG 进行后续研究。利用 TCGA 数据及西班牙患者样本分析发现，TP53 在肿瘤组织中上调，PTEN 和 ARID1A 下调，且 AGS 细胞的 TSG 表达谱与 GAC 样本相似，适合用于后续实验。
- 沉默 TSG 细胞系的构建：运用 CRISPR/Cas9 技术在 AGS 细胞中敲除 TSG 基因，经 Western blot 验证筛选出蛋白表达缺失的细胞克隆。同时，评估敲除 TSG 对细胞相关过程的影响，如 p53 缺失导致促凋亡基因表达下降，PTEN 缺失引起细胞周期失调，ARID1A 缺失激活上皮 - 间质转化。
- TSG 缺失对 GAC 细胞化疗耐药性的影响：实验表明，沉默 TP53 使 AGS 细胞对多种化疗药物耐药性增强；沉默 PTEN 也导致细胞对部分药物耐药性上升；沉默 ARID1A 的影响较为复杂，使细胞对部分药物耐药性增强，对另一些药物敏感性增加。进一步分析耐药相关基因表达发现，p53KO和 PTENKO细胞中 CD44 和 UGT1A 表达上调，与耐药性增加相关；ARID1AKO细胞中这两个基因表达下调，与敏感性增加相关。
- 沉默 CD44 和 UGT1A 对 AGS 细胞化疗敏感性的影响：在 p53KO和 PTENKO的 AGS 细胞中分别沉默 CD44 和 UGT1A，结果显示沉默 CD44 可部分逆转细胞对多柔比星和多西他赛的耐药性，对奥沙利铂敏感性影响较小，而沉默 UGT1A 无明显作用。
- 毛蕊花糖苷（verbascoside）对 AGS 细胞的化疗增敏作用：使用已知的 CD44 抑制剂毛蕊花糖苷处理 AGS 细胞，发现其可显著增加 p53KO和 PTENKO细胞对多柔比星的敏感性，对多西他赛和奥沙利铂也有一定增敏效果。
研究结论与讨论
研究表明，TP53、PTEN 和 ARID1A 在 GAC 化疗耐药中发挥重要作用。TP53 和 PTEN 功能失调会导致 GAC 细胞对多种化疗药物耐药性增强，而 ARID1A 沉默对细胞药物敏感性的影响具有复杂性。CD44 和 UGT1A 表达变化与细胞耐药性改变相关，沉默 CD44 或使用毛蕊花糖苷抑制 CD44 可部分恢复 p53KO和 PTENKO细胞的化疗敏感性。该研究揭示了 TSG 状态与耐药组之间的联系，为临床根据患者 TSG 状态选择合适化疗方案提供了理论依据，同时也表明抑制 CD44 有望成为 GAC 化疗增敏的潜在策略。不过，该研究使用的 AGS 细胞可能无法完全反映 GAC 在体内的复杂情况，后续还需利用更多 GAC 细胞系及体内实验模型进一步验证这些重要发现，以推动 GAC 治疗领域的发展，为患者带来更多希望。
