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肾透明细胞癌（ccRCC）转移治疗困难，研究其机制对改善患者预后意义重大。研究人员探究卵巢肿瘤相关蛋白酶（OTU）家族中 YOD1 的作用，发现 YOD1 可通过稳定 ZNF24 抑制 ccRCC 进展，为 ccRCC 治疗提供新靶点。
肾细胞癌（RCC）是全球范围内的重大健康挑战，其中肾透明细胞癌（ccRCC）最为常见，约占所有病例的 75%。近二十年来，RCC 的发病率持续上升。尽管早期检测和手术干预有所进展，但仍有大量患者在确诊时已发生转移，或在局部肿瘤治疗后出现转移。转移性 RCC 侵袭性强，五年生存率低于 10%。目前的靶向治疗药物，如舒尼替尼，虽能延缓疾病进展，但副作用严重，对患者预后改善有限。因此，深入研究 RCC 转移的分子机制，寻找新的治疗靶点迫在眉睫。
南昌大学第一附属医院等机构的研究人员开展了相关研究，旨在探究卵巢肿瘤相关蛋白酶（OTU）家族中去泛素化酶（DUBs）在 ccRCC 转移中的作用机制。研究发现，去泛素化酶 YOD1 通过稳定锌指蛋白 24（ZNF24），抑制血管内皮生长因子 A（VEGFA）的转录，从而抑制 ccRCC 的生长和转移。YOD1 和 ZNF24 在肿瘤组织中表达下调，且与患者的不良临床结局相关。这一研究揭示了 YOD1/ZNF24/VEGFA 轴在 ccRCC 进展中的关键作用，为 ccRCC 的治疗提供了新的潜在靶点，对改善患者预后具有重要意义。该论文发表在《Cell Death and Disease》。
研究人员采用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，利用小干扰 RNA（siRNA）和短发夹 RNA（shRNA）敲低基因表达，通过慢病毒介导的转染过表达基因；运用蛋白质免疫印迹（Western blot）检测蛋白表达水平，实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测 mRNA 表达水平；进行 Transwell 迁移和侵袭实验评估细胞迁移和侵袭能力，EdU 实验检测细胞增殖能力。在动物实验方面，构建了皮下异种移植瘤模型和肺转移模型，观察肿瘤生长和转移情况。此外，还运用了免疫共沉淀（Co-IP）、谷胱甘肽 S - 转移酶（GST）pull-down 实验、质谱分析、染色质免疫沉淀（ChIP）等技术探究蛋白间相互作用和调控机制。临床样本方面，使用了来自南昌大学第一附属医院的原发性 ccRCC 组织及相应的相邻非癌组织，以及购买的包含 80 对相邻正常和肿瘤组织的人 ccRCC 组织微阵列。
研究结果
- YOD1 表达下调与 ccRCC 进展相关：通过 siRNA 敲低 14 种人 OTU 去泛素化酶，发现 YOD1 缺失显著促进细胞迁移。与正常肾组织相比，ccRCC 组织中 YOD1 水平显著降低，且其低表达与晚期病理 T 分期、组织学分级和临床分期相关。低 YOD1 表达的 ccRCC 患者总生存期（OS）和无病生存期（DFS）明显缩短。体内实验也证实，YOD1 敲低可促进皮下肿瘤生长和肺转移。
- YOD1 抑制 ccRCC 细胞增殖和转移：沉默 YOD1 促进 ccRCC 细胞增殖、迁移和侵袭，过表达 YOD1 则抑制这些过程，且 YOD1 敲低还能促进患者来源的肿瘤类器官生长。
- YOD1 与 ZNF24 直接相互作用：通过质谱分析、Co-IP 实验、GST pull-down 实验和免疫荧光染色等方法，证实 YOD1 与 ZNF24 直接相互作用，且 YOD1 的 UBX-like 结构域与 ZNF24 的 SCAN box 结构域结合。
- YOD1 在 K308 位点对 ZNF24 去泛素化：YOD1 可去除 ZNF24 在 K308 位点的 K27、K29 和 K48 连接的多聚泛素链，且这种去泛素化依赖于 YOD1 的酶活性位点。YOD1 敲低会增加 ZNF24 的多聚泛素化水平。
- YOD1 维持 ZNF24 稳定性：YOD1 通过蛋白酶体调节模式维持 ZNF24 的稳定性，YOD1 敲低导致 ZNF24 蛋白表达下降，过表达则使其表达上升，且不影响 ZNF24 的 mRNA 表达水平。
- YOD1 通过 ZNF24/VEGFA 轴抑制 ccRCC 进展：ZNF24 是 VEGFA 的转录抑制因子，YOD1 敲低通过降低 ZNF24 稳定性，增强 VEGFA 表达，促进 ccRCC 进展和转移；ZNF24 过表达可部分逆转 YOD1 敲低的影响。
- YOD1 与 ZNF24 在临床 ccRCC 标本中的相关性及与生存的关系：在 ccRCC 组织中，YOD1 与 ZNF24 表达呈正相关，且二者低表达均与患者不良生存结局相关。
研究表明，YOD1 在 ccRCC 中发挥肿瘤抑制作用，通过调节 ZNF24/VEGFA 轴抑制肿瘤生长和转移。这一发现为 ccRCC 的治疗提供了新的潜在靶点，有助于开发更有效的治疗策略。不过，研究也存在一定局限性，如肺转移模型的构建方法可能无法完全模拟体内肿瘤转移过程。未来可进一步优化模型，深入探究 YOD1 在 ccRCC 中的作用机制，为改善患者预后提供更多理论依据和实践指导。
