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在生殖医学中,富含血小板血浆(PRP)应用广泛但临床结果不一,或因获取和应用协议的差异。研究人员对比了 CaCl2和 I 型胶原激活 PRP 的效果,发现 CaCl2激活的 PRP 释放更多生长因子,促细胞增殖更强,强调了标准化激活协议的重要性。
在生殖医学的领域中,富含血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)就像是一颗备受瞩目的新星,吸引着众多科研人员和医生的目光。PRP 含有丰富的生长因子,这些生长因子如同身体里的 “小指挥官”,能够刺激血管生成、促进细胞增殖,在辅助生殖技术(Assisted reproductive techniques,ART)中展现出巨大的潜力。它可以助力子宫内膜增厚,为胚胎营造一个温暖舒适的 “家”,让胚胎更容易着床;还能参与卵巢的 “重新激活”,提升卵子和胚胎的质量,帮助那些早期的人类窦前卵泡茁壮成长。
然而,这颗新星却被一些 “乌云” 笼罩着。目前,PRP 在临床应用中的结果参差不齐,有的患者使用后效果显著,而有的却不尽人意。经过研究发现,其中一个关键的 “捣蛋鬼” 就是 PRP 的激活方式。在获取和应用 PRP 的过程中,不同的激活方式就像不同的 “指令”,会让 PRP 产生不同的 “行为”,进而影响最终的治疗效果。为了驱散这些 “乌云”,来自西班牙 Eduardo Anitua Foundation for Biomedical Research、Regenerative Medicine Laboratory 等机构的研究人员 Eduardo Anitua、María de la Fuente 等人开展了一项研究,旨在探究不同激活方式对 PRP 在生殖医学中作用的影响。
他们的研究成果发表在《Journal of Ovarian Research》上,为这个领域带来了重要的启示。研究人员发现,使用 CaCl2激活的 PRP,在生长因子释放和细胞增殖方面表现更为出色。这一结论为优化 PRP 在生殖医学中的应用提供了关键依据,有助于提高临床治疗效果,为众多不孕患者带来新的希望。
在研究过程中,研究人员主要运用了以下关键技术方法:首先,根据 PRGF-Endoret 技术制备 PRP,采集 5 名健康捐赠者(3 名女性和 2 名男性)的血液,经过一系列离心操作获取非激活的液态 PRGF,并对全血和液态 PRGF 进行血液学分析。然后,将血浆分别用 CaCl2和 I 型胶原激活,观察凝血和回缩情况,处理后获取上清液。接着,通过 ELISA 技术定量检测上清液中的表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)和血小板衍生生长因子(Platelet derived growth factor,PDGF-AB)含量。最后,利用人卵巢成纤维细胞(Human ovarian fibroblasts,HOF)进行细胞增殖实验,通过检测 DNA 含量的变化来评估细胞增殖情况。
下面来详细看看研究结果。在 PRP 的特征方面,研究人员发现制备的 PRP 中血小板浓度相比外周血有显著提升,是外周血的 1.9 ± 0.2 倍,血小板回收率达到 85 ± 3.8%,且 PRP 中白细胞和红细胞含量极低。在凝血形成方面,CaCl2激活能使 PRP 形成坚固稳定的凝块,在 37℃孵育一小时后会发生回缩;而 I 型胶原激活则无法形成典型的凝块,只是形成一种凝胶状物质,且没有明显的回缩现象。
生长因子含量的检测结果更是令人关注。CaCl2激活的 PRP 样本中,EGF 含量高达 871 ± 426 pg/mL,而 I 型胶原激活的样本中仅为 141 ± 66 pg/mL;对于 PDGF-AB,CaCl2激活样本中的含量为 26,535 ± 6477 pg/mL,远高于 I 型胶原激活样本的 13,060 ± 2301 pg/mL,两者差异均具有统计学意义(p<0.005)。
细胞增殖实验结果显示,当培养基中添加 CaCl2激活的血浆时,HOF 细胞的增殖水平显著提高,DNA 含量达到 34.90 ± 17.82 ng/mL,而 I 型胶原激活组为 30.75 ± 18.21 ng/mL,且两组的增殖反应均显著高于对照组。
综合研究结论和讨论部分,该研究明确表明 CaCl2激活 PRP 相较于 I 型胶原激活,能产生更多的血小板生长因子,引发更强的生物学反应。这一发现与以往的一些研究结果相互印证,进一步强调了 PRP 激活方式的重要性。虽然该研究存在一些局限性,如处于初步阶段、仅使用单一细胞表型、缺乏临床疗效数据等,但它依然为后续研究指明了方向。未来需要进一步探究 PRP 发挥临床疗效的分子机制,明确 PRP 激活对临床结局的具体影响,从而推动 PRP 在生殖医学领域的更广泛、更有效的应用,为解决不孕问题提供更有力的支持。