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多发性硬化（MS）患者经奥瑞珠单抗（ocrelizumab）治疗后，B 细胞再增殖相关机制不明。研究人员通过高维质谱流式细胞术和蛋白质组学，分析患者免疫细胞和血浆蛋白。发现约 50% 患者 6 个月时出现幼稚 B 细胞再增殖，还确定了相关蛋白标记，为治疗监测提供依据。
多发性硬化（MS）是一种慢性炎症性中枢神经系统脱髓鞘疾病，长期以来被认为主要由 T 细胞介导。然而，B 细胞耗竭的抗 CD20（aCD20）单克隆抗体疗法在 MS 患者中展现出显著疗效，这一现象挑战了传统认知，暗示 B 细胞在 MS 病理生理过程中起着关键作用。奥瑞珠单抗（ocrelizumab）作为一种人源化 aCD20 单克隆抗体，已获批用于治疗复发缓解型 MS（RRMS）和原发进展型 MS（PPMS） 。它通过与 CD20 结合，可有效耗竭 B 细胞，但 B 细胞在数月后会重新增殖。目前，关于 B 细胞再增殖过程中其他免疫细胞群体的变化以及相关分子标记，人们知之甚少。为深入探究这些未知领域，来自德国多个研究机构（如柏林夏里特医学院（Charite′ – Universita¨ tsmedizin Berlin）、马克斯?德尔布吕克分子医学中心（Max Delbru¨ ck Center for Molecular Medicine in the Helmholtz Association）等）的研究人员开展了一项全面研究。
该研究成果发表在《iScience》杂志上，为理解 aCD20 疗法在 MS 治疗中的作用机制提供了重要依据，有助于开发更精准的治疗策略和生物标志物，对改善 MS 患者的治疗效果具有重要意义。
研究人员运用了高维质谱流式细胞术（也称为飞行时间质谱细胞术，CyTOF）和基于核酸连接免疫夹心分析（NUcleic acid Linked Immuno-Sandwich Assay，NULISA）的靶向蛋白质组学分析这两种关键技术。他们纳入了两个非重叠的纵向 MS 患者队列，队列 1 包含治疗前（基线）、治疗后 2 周和 6 个月的样本，队列 2 则收集了治疗开始后 1.5 年、2.0 年和 2.5 年的样本 。
研究结果如下：
- 患者基本情况及免疫细胞组成变化：对两个 MS 患者队列进行分析，患者接受奥瑞珠单抗治疗并进行常规血液检测。治疗后，CD20+ B 细胞减少，但总淋巴细胞计数稳定。不同时间点各免疫细胞比例有变化，如 B 细胞在 2 周和 6 个月时比例下降，部分患者 6 个月出现 B 细胞再增殖；T 细胞、髓细胞、粒细胞和 NK 细胞等也有相应改变 。
- B 细胞亚群变化：对 CD19+ B 细胞进行亚群聚类分析，发现奥瑞珠单抗治疗使多个 CD27?CD20+ B 细胞亚群和 CD27+ 记忆 B 细胞亚群比例降低。部分 CD20? B 细胞亚群比例在治疗后升高并维持 。
- 与 B 细胞耗竭和再增殖相关的细胞和分子特征：部分患者在治疗后不同时间点出现 CD20+ B 细胞再增殖，6 个月时主要为幼稚 B 细胞（B12），且呈现过渡表型。NULISA 分析发现 5 种蛋白（TNFRSF13B、TNFRSF13C、TNFRSF9、TNFSF9 和 CXCL13）水平在 6 个月时下降，其中 TNFRSF13C 与 B 细胞再增殖显著相关 。
- B 细胞再增殖与血浆神经丝轻链蛋白水平的关系：血浆神经丝轻链蛋白（NfL）是神经轴突损伤的标志物，奥瑞珠单抗治疗后其水平下降，但 B 细胞再增殖与 6 个月时的血浆 NfL 水平无显著关联 。
- B 细胞再增殖与其他免疫细胞的关系：与无 B 细胞再增殖的患者相比，有 B 细胞再增殖的患者体内记忆 T 细胞比例降低，促炎髓细胞减少，多种免疫细胞的激活和迁移标记物表达下降 。
研究结论表明，奥瑞珠单抗治疗可使多个 B 细胞亚群减少，6 个月时约 50% 患者出现 B 细胞再增殖，主要为具有过渡表型的幼稚 B 细胞，且记忆 B 细胞再增殖较少。治疗还会引起 T 细胞、髓细胞等其他免疫细胞的变化。血浆中多种蛋白水平下降，TNFRSF13C 与 B 细胞再增殖密切相关。B 细胞再增殖与长期血清免疫球蛋白水平升高有关，但与 6 个月时的血浆 NfL 水平无关。此外，B 细胞再增殖与记忆 T 细胞减少和促炎髓细胞降低相关。该研究全面解析了奥瑞珠单抗治疗 MS 患者过程中免疫细胞和血浆蛋白的变化，为进一步理解 aCD20 疗法的作用机制提供了关键信息，有助于寻找潜在的治疗监测生物标志物，推动 MS 治疗策略的优化和精准化发展。不过，研究也存在一定局限性，如队列 2 缺乏基线样本、CyTOF 技术存在偏倚等，未来还需更大规模、更长期的研究加以完善。
