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诺达病毒在水产养殖中危害严重,其中隐秘死亡诺达病毒(CMNV)传播方式不明。研究人员以海洋青鳉为模型展开研究,发现 CMNV 可在海洋青鳉中水平和垂直传播。这为防控 CMNV 感染提供关键依据,助力水产养殖业健康发展。
在水产养殖业的 “舞台” 上,诺达病毒近年来成了十足的 “反派”。它是海水养殖虾类和有鳍鱼类的主要病原体,在全球范围内让水产养殖业损失惨重。隐秘死亡诺达病毒(Covert mortality nodavirus,CMNV)作为其中一员,更是 “来势汹汹” 。它被世界动物卫生组织列为水产养殖中的重要新兴病毒,在亚洲虾类养殖中广泛传播,造成巨大经济损失。
CMNV 可不 “挑食”,它的宿主范围很广,能感染多种硬骨鱼类,不仅威胁养殖的经济鱼类,还对野生鱼类种群造成影响。目前,虽然已证实 CMNV 可在脊尾白虾中通过精子和卵子进行垂直传播,在虾塘的无脊椎动物间存在水平传播,但在鱼类中的传播方式却还是个 “未解之谜”。缺乏这方面的信息,使得防控鱼类 CMNV 感染困难重重。正因如此,选择合适的模型生物来研究其在鱼类中的传播方式迫在眉睫。
黄海渔业研究所的研究人员挺身而出,选用海洋青鳉(Oryzias melastigma)这一理想的海洋模型鱼来开展研究。海洋青鳉体型小巧,对环境耐受性强,适合大规模实验室培养,而且它性别特征明显、产卵多、世代周期短,鱼卵大且透明、抗损伤,这些特点让它成为研究 CMNV 传播方式的 “得力助手”。
研究人员通过腹腔注射人工感染海洋青鳉,利用多种技术方法,最终得出重要结论:CMNV 在海洋青鳉中既能水平传播,也能垂直传播。这一发现意义重大,为防控鱼类 CMNV 感染提供了关键依据,有助于制定更有效的防控策略,保障水产养殖业的健康发展。该研究成果发表在《Aquaculture》杂志上。
研究中用到的主要关键技术方法有:一是逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR),用于检测感染个体中 CMNV 的病毒载量;二是组织病理学分析,观察感染鱼的组织病变情况;三是原位杂交(ISH),确定 CMNV 在组织中的具体位置。实验样本为购买自广东省实验动物监测所的健康、无特定病原体(包括 CMNV 阴性)的海洋青鳉。
下面来看具体的研究结果:
- 海洋青鳉对 CMNV 的易感性:腹腔注射感染 CMNV 的海洋青鳉,虽然 20 天内没有死亡,但出现游泳能力下降甚至不动等临床症状。通过 RT-qPCR 检测发现,感染个体中 CMNV 病毒载量呈动态变化,每克鱼组织中的拷贝数在 1.93×103 到 4.33×10?之间波动。组织病理学分析进一步揭示了感染对鱼体的影响。
- CMNV 的水平传播:同居感染实验中,10.5% 的海洋青鳉检测出 CMNV 阳性,病毒载量在 3.28×102 到 3.21×103 拷贝 / 克组织之间。组织病理学分析显示,感染个体的脑、眼、卵巢和肠道出现严重病变,原位杂交检测在坏死部位发现 CMNV RNA 探针的阳性杂交信号,有力证明了 CMNV 可通过水进行水平传播。
- CMNV 的垂直传播:RT-nPCR 和 ISH 分析表明,人工感染的亲代海洋青鳉的卵巢组织、睾丸组织、受精卵以及子代鱼均检测出 CMNV 阳性,这意味着 CMNV 可通过亲代进行垂直传播。
研究结论表明,海洋青鳉是研究 CMNV 感染的理想模型生物,它为了解病毒复制、病理变化和传播方式提供了重要信息。CMNV 在海洋青鳉中的水平和垂直传播特性,凸显了其在水产养殖环境中快速传播的巨大风险,尤其是在易感染的鱼类种群中。这一研究成果警示人们,必须采取严格的生物安全措施,加强水质管理和监测,防止 CMNV 的传播,保护水产养殖业免受其侵害。