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本文聚焦 BRII-732 治疗 HIV 感染的研究。两项 1 期研究评估其在健康成人中的安全性、耐受性和药代动力学（PK）。结果显示，BRII-732 安全性良好，药代动力学特性佳，有望成为每周一次给药的抗 HIV 新选择。
研究背景
有效的抗逆转录病毒联合疗法（cART）可改变人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的自然病程，让患者拥有接近正常的预期寿命，将 HIV 感染转变为可管理的慢性疾病。每日一次的单片治疗方案（STR）相较于需多次服药、给药频率高的方案，提升了患者的依从性和满意度。然而，HIV 患者期望进一步提高生活质量（QoL），寻求更低频率的治疗选择，以摆脱每日服药的困扰，自由参与活动而无需随身携带药物。
长效疗法（LAT），如每月或每两个月给药一次，通过药物从注射植入的储存库缓慢释放来维持有效药物浓度。例如，每月肌肉注射卡博特韦 / 利匹韦林（400mg/600mg）在两项 3 期研究（ATLAS 和 FLAIR，长达 96 周的维持治疗）中，展现出与当前抗逆转录病毒口服方案相当的疗效和安全性。患者调查显示，多数患者更倾向于每周一次的口服单片方案，而非其他给药方式。
BRII-732 是 4'- 乙炔基 - 2 - 氟 - 2'- 脱氧腺苷（EFdA）的甲氧基羰基碳酸酯前药，旨在为 cART 疗法提供最佳药物暴露，实现每周一次给药，提升患者便利性、生活质量和治疗依从性。在 BRII-732 的临床开发过程中，因依斯拉曲韦（islatravir）或 EFdA 出现剂量依赖性的总淋巴细胞和 CD4+ T 细胞计数下降，美国食品药品监督管理局（FDA）对相关研究实施了临床暂停，BRII-732 也受影响。不过，基于观察和模型数据，确认依斯拉曲韦特定剂量下的 CD4+ T 细胞和淋巴细胞动态与标准 ART 相似后，相关临床研究得以恢复。本文报道两项评估 BRII-732 在健康成人中安全性、耐受性和药代动力学（PK）的 1 期研究结果。
材料和方法
研究设计
研究 1 和研究 2 均为 1 期、随机、双盲、安慰剂对照、单中心的单剂量递增（SAD）和多剂量递增（MAD）研究。研究 1 是 BRII-732 首次人体试验，采用口服溶液剂型。研究 2 旨在确定每周一次的治疗剂量，使用片剂剂型，同时避免对总淋巴细胞和 CD4+ T 细胞计数产生影响。
研究 1 包含 5 个 SAD 队列和 2 个 MAD 队列。符合条件的参与者在第 1 天 BRII-732 给药前 28 天内进行筛选。SAD 队列参与者住院至第 14 天，并在第 28 天进行门诊随访；MAD 队列参与者住院至第 28 天，第 35 天电话随访，第 42 天门诊随访。BRII-732 由临床药房制备成溶液，供空腹口服。每个队列结束后，安全审查委员会（SRC）依据章程审查安全性和耐受性数据，以决定是否进行剂量递增并指导研究进展。SAD 阶段依次评估 10、25、50、100 和 200mg 的 BRII-732 剂量，先给予两名哨兵参与者（一名 BRII-732，一名安慰剂）药物，给药后 4 - 6 小时监测评估安全性，根据结果决定当天是否对队列其余人员给药。首个 SAD 队列招募 4 名参与者（3 名活性药物组；1 名安慰剂组），后续 4 个 SAD 队列各招募 8 名（6 名活性药物组；2 名安慰剂组）。MAD 阶段依次评估每周一次、共三次给予 10mg 和 25mg BRII-732 的情况，首个 MAD 队列招募 4 名参与者（3 名活性药物组；1 名安慰剂组），后续队列招募 8 名（6 名活性药物组；2 名安慰剂组）。
研究 2 包含 3 个 SAD 队列。参与者筛选流程同研究 1，住院至第 14 天，在第 20 天和 28 天进行门诊随访。BRII-732 由临床药房制备成 1mg 和 2.5mg 的溶液（队列 1 和 3）以及 2.5mg 的片剂（队列 2），供空腹口服。SRC 在队列 1 结束后审查数据，决定是否向队列 2 和 3 进行剂量递增。
符合条件的参与者为 18 - 55 岁、无生育潜力的男性或女性，体重指数（BMI）在 18.5 - 32kg/m2 ，经主要研究者判定身体健康，各项筛查结果无临床意义。若参与者 HIV-1 或 HIV-2、甲型肝炎抗体、乙型肝炎表面抗原和 / 或核心抗体、丙型肝炎病毒、COVID 快速 PCR 检测呈阳性，有过量饮酒史（女性每天超过两杯、男性每天超过四杯），在第 1 天前 14 天（或 5 个半衰期）内接受过疫苗或处方药治疗，第 1 天前 7 天内使用过非处方药，CD4 计数低于正常范围（<500 细胞 /mm3 ），总淋巴细胞计数低于正常范围，估算肾小球滤过率（eGFR）低于 80mL/min/1.73 m2 ，或 Fridericia 校正 QT 间期大于 440ms，则被排除在外。两项研究均遵循良好临床实践（GCP）指南、国际人用药品注册技术协调会（ICH）指南以及《赫尔辛基宣言》中的适用监管要求。在研究相关活动开始前，每位参与者均签署书面知情同意书，研究方案和知情同意书经独立审查委员会审核批准。
安全性评估
两项研究的安全性评估均包括在研究药物给药前、给药期间和给药后，重复进行实验室检测、生命体征监测、心电图（ECG）检查、体格检查以及不良事件（AE）监测和报告。研究 2 还额外进行淋巴细胞检测，包括在筛选时以及研究过程中多次进行细胞分化和 CD4+ 、CD8+ 亚群检测。
药代动力学评估
在预定时间点采集血液样本，用于分析血浆中的 BRII-732 和 EFdA，以及外周血单个核细胞（PBMC）中的细胞内代谢物 EFdA-TP。
研究 1 SAD 队列
在给药前以及给药后 0.5、1、4、7、12、24、48、72、96、120、144、168、192、216、264、312 和 648 小时采集样本。
研究 1 MAD 队列
在给药前以及第 1 次给药（第 1 天）和最后 1 次给药（第 15 天）后 0.5、1、4、7、12、24、48、72、96、120、144 和 168 小时采集样本。在第 15 天最后一次给药后，还额外在 192、216、264、312 和 648 小时采集样本。
研究 2 SAD 队列
在给药前以及给药后 0.5、1、2、4、6、8、12（仅检测 BRII-732 和 EFdA）、24、48、72（仅检测 EFdA-TP）、96（仅检测 BRII-732 和 EFdA）、120（仅检测 EFdA-TP）和 168 小时采集样本。另外，在给药后 216、312、456 和 648 小时采集样本，用于分析 PBMC 中的 EFdA-TP。
血浆样本采集后，置于含 K2EDTA 的 4mL 试管中，加入 200μL 抑制剂鸡尾酒溶液（与血液体积比例约为 19:1），立即颠倒混匀 10 - 12 次，置于冰上，在 2 - 8°C 下以 1,500 × g 离心约 10 分钟。将上清血浆转移至两个冷冻管（每个约 400mL），储存于 - 70°C，随后送至生物分析实验室，使用经过验证的高效液相色谱 - 串联质谱（LC-MS/MS）方法测定 BRII-732 和 EFdA 浓度。BRII-732 的检测范围为 1.00 - 1,000ng/mL，EFdA 为 1.00 - 3,000ng/mL，二者的检测精密度分别为 5.4% - 9.7% 和 6.2% - 12.3%，准确度分别为 97.7% - 103.2% 和 96.4% - 101.7%。
PBMC 样本采集于含肝素钠的 8mL 细胞制备管（CPT）中，颠倒混匀 8 - 10 次，室温放置，在常温下以 1,500 - 1,800 × g 离心至少 15 分钟。吸去血浆后，PBMC 用 PBS 缓冲液洗涤两次，再用 RPMI-1640 培养基洗涤并重悬。进行细胞计数后，根据每个样本的细胞数量加入裂解缓冲液。最终的 PBMC 裂解物储存于 - 70°C，送至生物分析实验室，使用经过验证的 LC-MS/MS 方法测定 EFdA-TP 浓度。检测范围为 0.100 - 40.0ng/mL，精密度为 1.4% - 10.5%，准确度为 98% - 103%。血浆和 PBMC 样本的分析均由 Alliance Pharma（现 Resolian）进行，所有样品再分析（ISR）均符合验收标准。
药代动力学数据分析
低于定量下限（BLOQ）的浓度不进行估算。在首次可定量浓度之前的 BLOQ 值记为零，之后的 BLOQ 浓度视为缺失值，计算平均浓度时包含这些缺失值。
通过非房室模型方法，在 Phoenix WinNonlin（Certara，版本 8.3）软件中测定药代动力学参数，包括从时间零到最后可定量浓度的浓度 - 时间曲线下面积（AUC0 - last）、从时间零到无穷大的浓度 - 时间曲线下面积（AUC0 - inf）、168 小时给药间隔内的浓度 - 时间曲线下面积（AUC0 - 168h）、最大观察浓度（Cmax）、达到最大浓度的时间（Tmax）、给药间隔结束时的浓度（C168h）、表观末端半衰期（t1/2）、表观总清除率（CL/F）、末端相表观分布容积（Vz/F）以及基于 AUC 的蓄积比（ARAUC），并使用描述性统计对每个队列的参数进行汇总。
在研究 1 中，为评估剂量比例性，对药代动力学暴露参数进行自然对数转换，使用包含剂量水平作为固定效应的混合效应模型，在不同剂量水平之间进行统计学比较。在研究 2 中，为评估 BRII-732 口服片剂相对于溶液的相对生物利用度，对自然对数转换后的药代动力学暴露参数使用方差分析模型，模型中包含治疗（剂型）作为因素。在这两种统计分析中，均构建几何最小二乘均值（GLSMs）、GLSMs 的比率以及相应的 90% 置信区间（CIs）。
研究结果
参与者特征
研究 1 中，所有随机分组并给药的 48 名参与者均完成研究，无人员退出。SAD 队列参与者的平均年龄为 38 岁，MAD 队列参与者平均年龄为 39 岁。研究 1 中多数参与者为女性（SAD 队列：61%；MAD 队列：50%）和白人（SAD 队列：56%；MAD 队列：58%）。研究 2 中，24 名参与者随机分组并给药，22 名完成研究，2 名自愿退出。SAD 队列参与者的平均年龄为 34 岁，多数为男性（71%）和白人（67%）。两项研究中，治疗组之间以及接受 BRII-732 和接受安慰剂的参与者之间，在人口统计学参数方面均未观察到显著差异。
安全性
研究 1 中，SAD 队列 36 名参与者中有 12 名（33.3%）报告了 1 次或多次治疗期间出现的不良事件（TEAE），其中 3 次被研究者认为与 BRII-732 相关。接受最低剂量（10mg）和最高剂量（200mg）BRII-732 溶液给药后，均未报告 TEAE。多数报告的 TEAE 为轻度（1 级，83.3%），仅有 1 名安慰剂组参与者报告了中度（2 级）TEAE，1 名接受 100mg BRII-732 单剂量的参与者报告了严重（3 级）低密度脂蛋白升高和中度（2 级）丙氨酸氨基转移酶升高的 TEAE。SAD 队列中，不止一名参与者报告的 TEAE 仅有便秘和头痛。MAD 队列中，7 名（58.3%）参与者出现 1 次或多次 TEAE，均为轻度。6 名参与者的 TEAE 被研究者认为与研究药物相关，MAD 队列中最常见的 TEAE 是恶心（n = 4）。研究 1 中的所有 TEAE 在研究结束时均已缓解，无死亡、严重不良事件（SAE）或因 TEAE 导致的研究退出。
研究 2 中，24 名参与者中有 5 名（20.8%）报告了 5 次 TEAE，其中 2 次被研究者认为与 BRII-732 相关。多数 TEAE 为轻度（1 级），5 次 TEAE 中有 1 次为中度（2 级）滴虫病，由 1 名参与者报告。接受 1mg BRII-732 溶液或 2.5mg BRII-732 片剂给药后，均未报告 TEAE。研究 2 中的所有 TEAE 在研究结束时均已缓解，无死亡、SAE 或因 TEAE 导致的研究退出。
临床实验室检查、生命体征、ECG 测量
研究 1 中，多数实验室异常为 DAIDs 1 级。1 名（33.3%）接受 10mg BRII-732 口服溶液单剂量的参与者和 1 名（16.7%）接受 100mg BRII-732 口服溶液单剂量的参与者报告了 3 级 LDL 升高，而接受单剂量安慰剂的参与者中仅有 1 名（11.1%）出现该情况。未报告分级的淋巴细胞减少，也无参与者出现临床关注的淋巴细胞减少或与淋巴细胞相关的 AE。
研究 2 中，临床实验室评估未发现有临床意义的结果或趋势，包括在研究期间，参与者的血清生化、血液学以及淋巴细胞 CD4+/CD8+ 亚群的均值或个体结果，均未出现与治疗或剂量相关的趋势。未报告≥3 级的实验室结果。两项研究在生命体征结果和 ECG 测量方面均未发现安全问题。
药代动力学
- 血浆中的 BRII-732：单次口服最高 200mg 的 BRII-732 后，作为前药的 BRII-732 迅速转化为 EFdA。在给药后长达 648 小时的样本采集期间，血浆中 BRII-732 的浓度始终低于定量下限（1.00ng/mL），因此未展示 BRII-732 的药代动力学结果。同样，每周口服三次 10mg 和 25mg 的 BRII-732 后，在样本采集期间，BRII-732 血浆浓度大多低于定量下限，仅少数样本浓度较低（<15ng/mL）。
- 血浆中的 EFdA：单次口服 BRII-732 后，EFdA 的血浆浓度曲线表明 BRII-732 吸收迅速，并随后水解释放出 EFdA。EFdA 血浆浓度在给药后中位 Tmax 0.50 - 1.00 小时达到最大值。达到 Cmax 后，EFdA 血浆浓度先快速下降，随后进入较慢的消除阶段。1mg 剂量下，由于末端相可定量浓度有限，无法计算消除 t1/2 。单次剂量最高 10mg 时，平均 t1/2 为 1.50 - 2.94 小时；剂量在 25 - 200mg 范围内时，t1/2 为 55 - 112 小时。较高剂量下的长 t1/2 主要是由于其在较长时间内维持低浓度。
研究 1 中，单次给药后，EFdA 血浆暴露量（Cmax 和 AUCs）呈现剂量依赖性增加。以 10mg 剂量的暴露值为参考，基于 GLSM 的统计比较显示，在 10 - 200mg 剂量范围内，暴露量近似剂量比例增加。研究 2 中，在 2.5mg
