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马传染性贫血(EIA)因无有效治疗手段和疫苗,严重影响养马业。研究人员开展基于新型合成肽 P05/gp45 的 Bio-AIELAB 免疫分析诊断性能研究。结果显示该方法灵敏度达 99.44%、特异性 95.16% ,或可用于 EIA 监测,意义重大。
在广袤的养马世界里,马不仅是人类忠诚的伙伴,更是在军事、文化、体育、娱乐以及经济等众多领域发挥着不可替代的重要作用。然而,有一种可怕的疾病却如同隐藏在暗处的幽灵,时刻威胁着马的健康,这就是马传染性贫血(Equine Infectious Anemia,EIA)。由于目前尚无有效的治疗方法和预防性疫苗,一旦马匹感染,不仅患病马匹需要被淘汰,还会面临国际间展览、比赛以及精液商业化等活动的限制,给养马业带来了巨大的经济损失。为了更好地防控这种疾病,研发新的诊断工具迫在眉睫。
在此背景下,来自古巴、墨西哥、哥伦比亚等多地的研究人员展开了深入研究。他们的研究成果发表在《Veterinary Research Communications》上,为马传染性贫血的诊断带来了新的希望。
研究人员为了探究基于新型合成肽 P05/gp45 的 Bio-AIELAB 免疫分析在马传染性贫血诊断中的性能,开展了一系列实验。研究用到的主要关键技术方法包括:首先利用 DNAstar 生物信息学工具预测 env 基因氨基酸序列的抗原性,筛选出候选肽序列;接着通过固相化学合成法制备合成肽 P05,并进行纯化;之后收集来自古巴农业健康实验室的 664 份马血清样本(326 份阳性,338 份阴性) ,这些样本均来自自然感染的马匹;分别采用 Bio-AIELAB ELISA、ELISA EIA(美国 VMRD 公司产品)以及作为金标准的 AGID(古巴 LABIOFAM 公司产品)对血清样本进行检测;最后运用统计学方法计算各项诊断性能指标。
研究结果如下:
- Bio-AIELAB 与 ELISA EIA 的性能比较:Bio-AIELAB 在检测阳性马血清中的抗体时,与参考测试(AGID)的一致性极佳,能正确检测出 178/179 的阳性样本;而 ELISA EIA 则未能正确识别 8 份 AGID 判定为阳性的样本。统计分析表明,Bio-AIELAB 在确定感染动物和判定健康动物为非反应性方面,具有显著更高的概率,分别为 99.4% 和 99.4%;ELISA EIA 在判定真正感染动物为反应性方面能力更强,达到 97.8%。不过,两种 ELISA 与 AGID 的 kappa 指数分别为 0.94 和 0.92 ,均显示出极好的一致性。
- Bio-AIELAB 与其他 ELISA 的比较:与其他已报道的用于马传染性贫血诊断的 ELISA 相比,Bio-AIELAB 在敏感性和特异性方面表现出色。其敏感性高达 99.44% ,特异性为 95.16% ,这些数值与国际同类研究相比,相当甚至更高。例如,在敏感性指标上,P05 肽优于其他一些已报道的合成和重组 gp45 及 gp90 抗原;在特异性方面,也超过了重组 p26 蛋白和某些合成肽组合的相关报道。
研究结论和讨论部分指出,Bio-AIELAB 表现出的良好性能,证明了使用合成肽和跨膜糖蛋白 gp45 作为抗原检测 EIA 特异性抗体的有效性。该方法较高的敏感性有助于及时发现抗体反应,对避免 EIA 的持续传播至关重要。而且,从工业层面来看,短肽作为血清学诊断抗原具有化学稳定性高、合成和操作相对简便等优势,可避免一些传统抗原制备过程中的复杂问题。综上所述,Bio-AIELAB 间接 ELISA 有望成为马传染性贫血监测和控制项目中的有力工具,与 AGID 测试联合使用,将为防控马传染性贫血提供更有效的手段,对养马业的健康发展意义非凡。