新型引物构建口蹄疫病毒 O 型结构蛋白表达载体：助力诊断与疫苗研发新突破

为解决口蹄疫病毒（FMDV）O 型流行毒株结构蛋白的重组表达问题，研究人员设计简并引物，成功扩增 VP0、VP1、VP3 基因，构建表达载体并在大肠杆菌中高效表达。该研究成果为诊断和疫苗开发提供有力工具，意义重大。

　　利用新设计的简并引物，设计并验证了用于循环拓扑型口蹄疫病毒（FMDV）O 型结构蛋白重组表达的灵活构建体。针对不同拓扑型设计的简并引物成功扩增出 VP0、VP1 和 VP3 基因。通过重叠延伸 PCR 分别整合 T7 启动子、g10 前导序列、T7 终止子，以及核糖体结合位点（RBS）、起始和终止密码子等关键转录和翻译调控元件，使这些蛋白在大肠杆菌（E. coli）中高效表达。克隆构建体表达出预期分子量的目标蛋白：VP0（34 kDa）、VP1（24 kDa）和 VP3（22 kDa）。SDS-PAGE 和蛋白质免疫印迹（Western blotting）证实了蛋白的高产量和高纯度。该平台在诊断和疫苗开发应用中展现出良好的适应性。此研究流程为生产与流行毒株相关的 FMDV 结构蛋白提供了强大工具，有助于改进包括诊断和疫苗接种在内的防控措施。