靶向 KRASG12C与 HSP90：攻克癌症耐药难题的新曙光

为解决 KRASG12C抑制剂的耐药问题，研究人员开展了针对双靶点抑制策略的研究。他们发现 RNK07421 能同时靶向 KRASG12C和 HSP90-client 癌蛋白，有效克服耐药，这为 KRASG12C驱动的癌症治疗提供了新方向。

　　在癌症治疗领域，KRAS（Kirsten 大鼠肉瘤病毒同源物）基因的突变一直是个棘手的难题。KRAS 是人类癌症中最常发生突变的致癌基因，其中 KRAS^G12C突变在非小细胞肺癌（NSCLC）、结直肠癌和胰腺癌中都占有一定比例。曾经，KRAS 被认为是 “不可成药” 的靶点，但随着科技的进步，FDA 批准了索托拉西布（sotorasib）和阿达格拉西布（adagrasib）这两种针对 KRAS^G12C突变的共价抑制剂，为相关癌症患者带来了新希望。

然而，好景不长，尽管这两种抑制剂在初期展现出了显著疗效，但患者很快就出现了获得性耐药，肿瘤再次生长。这背后的原因十分复杂，肿瘤细胞会通过多种机制来抵抗药物，比如 KRAS 基因扩增、产生新的突变，或者激活其他未知的信号通路。而且肿瘤内部细胞的异质性，以及非遗传因素，像 NSCLC 的组织学转变等，也都在耐药过程中发挥了作用。

为了应对这一困境，来自多个研究机构的研究人员开展了一项极具意义的研究，相关成果发表在《Cancer Letters》上。他们致力于寻找一种新的策略，以克服 KRAS^G12C抑制剂的耐药问题，为癌症患者提供更有效的治疗方案。

研究人员运用了多种关键技术方法。在细胞模型构建方面，培养了多种 NSCLC 细胞系和胰腺癌细胞系，并诱导其产生对 sotorasib 或 adagrasib 的耐药性，同时使用了患者来源的类器官（PDOs）进行研究。实验技术上，采用 RNA 测序来分析耐药细胞的转录组变化；运用蛋白质组分析技术，如 Proteome Profiler Human Phospho - RTK Array kit，检测受体酪氨酸激酶（RTK）的激活情况；还通过细胞活力测定、免疫印迹分析等方法，评估药物对细胞生长和信号通路的影响 。

下面来看看具体的研究结果：

• 获得性耐药细胞的特征：研究人员成功诱导 NSCLC 细胞系 NCI - H358 和胰腺癌细胞系 MIA PaCa - 2 对 sotorasib 或 adagrasib 产生耐药性。耐药细胞的 ERK 磷酸化水平在药物处理后下降不明显，且在较短时间内就出现 ERK 重新激活的现象，这表明耐药细胞能够快速恢复增殖信号。对耐药细胞的 KRAS 基因测序发现，除了少数出现 G114R 突变外，大部分没有之前报道的二次突变，这提示可能存在非遗传机制导致耐药。
• 耐药的驱动因素：研究发现，耐药细胞中 RAS 转录本水平发生变化，adagrasib 处理后，不同细胞系中 KRAS、HRAS 和 NRAS 的 mRNA 水平有升有降。进一步研究发现，RTK 激活是耐药的重要驱动因素，不同细胞系激活的 RTK 有所差异，而且耐药细胞几乎激活了所有评估的 RTK。尝试联合用药，如 adagrasib 与 afatinib（一种 EGFR 家族抑制剂）或 AEE788（一种多 RTK 抑制剂）联合，但效果并不理想，这说明要消除耐药细胞，可能需要同时抑制多个 RTK 靶点。
• 固有耐药模型的研究：在一些细胞系和 PDOs 中观察到对 sotorasib 和 adagrasib 的固有耐药现象。虽然 adagrasib 能降低这些模型中的 RAS 活性，但无法长时间抑制 ERK 磷酸化。分析发现，固有耐药模型中 RTK 激活具有谱系依赖性，针对主要激活的 RTK 与 KRAS^G12C进行联合抑制，能增加细胞死亡并持续降低 pERK 水平 。
• 发现潜在治疗靶点：通过对 adagrasib 敏感和耐药细胞的 RNA 测序分析，研究人员发现耐药细胞的转录组发生了显著变化，其中上皮 - 间质转化（EMT）特征明显增强。利用 iLINCS 平台分析，发现 HSP90 抑制剂是潜在的治疗耐药细胞的重要候选药物，而且耐药细胞中 HSP90 的客户蛋白表达增加。
• 联合抑制的效果：实验表明，HSP90 抑制剂 luminespib 与 KRAS^G12C抑制剂联合使用，能在一定程度上克服耐药，减少细胞活力。研究人员还设计了两种新型异双功能分子 RNK07421 和 RNK07311，它们能同时靶向 KRAS^G12C和抑制 HSP90。这两种分子在多种细胞系和 PDOs 中都表现出良好的效果，能有效降低 pERK 水平，减少细胞活力，克服固有和获得性耐药 。
• 体内实验验证：在体内实验中，研究人员用 RNK07421 和其他药物对固有耐药的 H2030 和 RLUN029 PDO 异种移植瘤进行处理。结果显示，RNK07421 治疗的肿瘤体积明显减小，虽然联合 adagrasib 和 capmatinib 治疗的肿瘤体积更小，但 RNK07421 治疗的肿瘤细胞死亡明显增加，且能有效降低 pERK 水平。

综合研究结论和讨论部分，这项研究意义重大。它深入剖析了 KRAS^G12C抑制剂耐药的复杂机制，发现了 HSP90 在耐药过程中的关键作用，并成功设计出异双功能分子 RNK07421。这种分子能同时靶向 KRAS^G12C和 HSP90，在克服耐药方面展现出巨大潜力，为 KRAS^G12C驱动的癌症治疗开辟了新的方向。与传统联合治疗相比，异双功能分子具有减少毒性和简化给药方案的优势，有望改善患者的治疗体验和预后。