花生壳载体固定真菌漆酶:开启低成本水处理新征程

【字体: 时间:2025年04月22日 来源:Biocatalysis and Agricultural Biotechnology 3.4

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  为解决游离酶在工业应用中稳定性差、难回收等问题,研究人员开展以花生壳(PS)及其衍生生物炭(PSB)为载体固定真菌漆酶(Lac)的研究。结果显示 PS 更适宜,优化条件后 Lac 活性提升,PS/Lac 生物催化剂在水处理方面前景广阔。

  在工业生产和环境保护的大舞台上,酶作为生物催化剂,凭借其高效的催化性能和环保特性,占据着重要地位。然而,游离酶却像是一群 “脆弱的舞者”,对环境条件极为敏感,在工业应用的复杂环境中,它们的稳定性差,容易失去活性,而且使用后难以回收,这不仅增加了生产成本,也限制了它们的大规模应用。就好比在水处理领域,漆酶(Laccases,Lacs)虽然能够高效地催化氧化过程,将有害的外源化合物转化为无害物质,但游离的漆酶无法循环利用,这一缺陷使得它们在实际应用中大打折扣。
与此同时,合成的酶固定化载体材料价格昂贵,这就像一道高高的门槛,阻碍了酶在工业领域更广泛的应用。在这样的背景下,寻找一种低成本、高效的酶固定化载体材料,成为了科研人员亟待攻克的难题。

来自国外的研究人员勇挑重担,开展了一项极具意义的研究。他们将目光投向了花生壳(Peanut shell,PS)及其衍生生物炭(PSB),试图探索其作为真菌漆酶(Lac)固定化载体的可能性。研究人员经过一系列实验,惊喜地发现,以 2,6 - 二甲氧基苯酚为底物时,固定在 PS 和 PSB 上的 Lac 酶活性并无显著差异,于是选择 PS 进行深入研究。

研究人员进一步采用筛选设计,考察接触时间、Lac 浓度、PS 浓度和搅拌等固定化参数对酶活性的影响。方差分析表明,搅拌和 Lac 浓度对促进酶活性(U g-1)有显著影响。通过对这两个关键因素的优化,成功将 PS 上的 Lac 活性提高到 0.170 ± 0.042 U g?1,活性产率相对提高了 2.3 倍。虽然固定化效率较高,但随着酶负载量的增加,酶活性有所下降。通过吸附平衡评估和 Lac 分数占有率估计发现,PS 表面的占有率仍较低。这一系列结果表明,PS/Lac 生物催化剂成本低、制备简单且活性可接受,在水处理修复方面具有广阔的应用前景。该研究成果发表在《Biocatalysis and Agricultural Biotechnology》上,为相关领域的发展提供了新的思路和方向。

在研究过程中,研究人员主要运用了以下关键技术方法:首先,从培养的短孢平革菌(Phlebia brevispora BAFC 633)液体培养基中获取 Lac,通过过滤得到酶提取物;其次,对 PS 进行清洗、烘干、研磨处理,并制备其衍生生物炭 PSB;然后,开展初步固定化实验测定固定化酶活性;最后,运用响应面法(Response Surface Methodology,RSM)优化固定化条件。

研究结果


  1. 初步固定化实验:花生壳和其热解产生的生物炭在初始固定化实验后均显示出 Lac 活性,固定化 Lac 酶活性值在 0.042 - 0.103 U g?1之间。除特定时间点外,PS 和 PSB 上固定化 Lac 酶活性均值无显著差异。
  2. 影响因素分析:通过筛选设计和方差分析,确定搅拌和 Lac 浓度是对促进酶活性有显著影响的因素。
  3. 优化结果:对搅拌和 Lac 浓度进行优化后,PS 上的 Lac 活性提升至 0.170 ± 0.042 U g?1,活性产率显著提高。
  4. 固定化效率与表面占有率:固定化效率较高,但酶活性随酶负载量增加而下降。通过吸附平衡和 Lac 分数占有率评估发现,PS 表面占有率较低。

研究结论与讨论


该研究成功探索了花生壳作为真菌漆酶固定化载体的可行性。研究表明,花生壳成本低、制备简单,在优化固定化条件后,能有效提高漆酶活性,虽然存在酶负载量增加时活性下降的问题,但表面仍有较大的利用空间。这一研究成果为酶固定化技术提供了新的低成本载体选择,有望推动其在水处理等环保领域的广泛应用,助力实现循环经济和环境保护的目标。

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