揭秘焦虑调制因素对斑马鱼旷场测试行为的影响：探索潜在神经行为机制

为明确焦虑调制因素对斑马鱼旷场测试（OFT）中趋触性及相关行为的影响，研究人员用吗啡（MOR）、同种警报物质（CAS）、乙醇（ETOH）、氟西汀（FLU）处理斑马鱼后进行 OFT 测试。结果显示不同处理对行为影响各异，该研究有助于深入理解焦虑相关神经行为机制。

　　在神经科学研究的广袤领域中，探寻焦虑相关行为的奥秘一直是众多科研人员的目标。旷场测试（Open Field Test，OFT）作为评估焦虑相关行为、探索活动和运动能力的经典范式，在跨物种研究中具有重要意义。它就像是一个特殊的 “舞台”，能让研究者观察和量化动物在特定环境中的行为表现。然而，这个 “舞台” 上还有许多谜团等待解开。比如，虽然 OFT 能评估焦虑相关行为，但焦虑诱导和抗焦虑处理与一些行为终点（如趋触性，即动物对场地边缘的偏好）之间的精确关系尚不明确。而且在 OFT 测试过程中，动物对环境适应时趋触性反应的动态变化也未完全明晰。此外，甩尾行为在斑马鱼多种行为范式中都有出现，但它与趋触性及其他焦虑相关表型的关联也未见报道。这些未解之谜严重影响了研究人员对 OFT 测试数据的解读，也让这个 “舞台” 上的表演难以被准确理解。

为了揭开这些谜团，来自国外的研究人员展开了深入研究。他们希望通过一系列实验，明确不同焦虑调制因素对成年斑马鱼在 OFT 测试中习惯化过程的影响，重点关注趋触性随时间的变化；同时量化甩尾行为，探究其对焦虑诱导和抗焦虑调制因素的反应；最后比较不同行为终点，评估它们之间的相关性。

研究人员选择了成年斑马鱼（Danio rerio）作为实验对象。这些斑马鱼来自当地商业供应商，年龄在 4 - 6 个月，雌雄比例约为 1:1。在实验中，研究人员采用了多种处理方式。焦虑诱导处理方面，他们使用了吗啡（1.5 mg/L）戒断方案（MOR）和 3.5 mL/L 的急性同种警报物质（Conspecific Alarm Substance，CAS）处理 5 分钟；抗焦虑处理则选取了 0.5%（v/v）的急性乙醇（Ethanol，ETOH）处理 1 小时和 100 μg/L 的急性氟西汀（Fluoxetine，FLU）处理 15 分钟。之后，将斑马鱼单独转移到 OFT 测试中进行 10 分钟的测试，并对其行为活动进行分析。

在研究结果部分，关于 MOR 处理的斑马鱼。研究发现，随着测试时间的推移，两组斑马鱼在周边区域停留的时间都有所增加（时间效应：F_(19,361) = 8.597，p < 0.0001，ηp² = 0.311），但 MOR 组在周边区域停留的时间比对照组（CTRL）更长（组效应：F_(1,19) = 14.16，p = 0.0013，ηp² = 0.427）。同样，两组斑马鱼在周边区域游动的距离也随时间增加（时间效应：F_(19,361) = 9.314，p < 0.0001，ηp² = 0.329），MOR 组在这一参数上也高于 CTRL 组。这表明 MOR 处理会使斑马鱼表现出更多的活跃行为，更高的趋触性以及增加的甩尾行为。

而 CAS 处理的斑马鱼，与 MOR 组有所不同。CAS 处理的斑马鱼在测试中表现出总不动时间增加，这意味着 CAS 可能导致斑马鱼出现更明显的抑制行为。

再看 ETOH 处理的斑马鱼。ETOH 处理后，斑马鱼在周边区域停留的时间和游动距离都减少，甩尾行为和运动能力也有所下降。这说明 ETOH 的抗焦虑处理对斑马鱼的行为产生了抑制作用，使其在测试中的活跃度降低。

FLU 处理的斑马鱼同样出现了在周边区域停留时间减少的情况，趋触性和甩尾行为也有所降低。这表明 FLU 也具有抗焦虑的效果，改变了斑马鱼在 OFT 测试中的行为模式。

此外，研究人员还通过皮尔逊分析（Pearson analyses），进一步明确了各终点数据之间的相关性，强化了观察到的不同反应。

综合研究结果，研究人员得出结论：不同的焦虑诱导和抗焦虑方案对斑马鱼在 OFT 测试中的趋触性有显著差异影响。同时，甩尾行为可能是改进 OFT 测试中行为分析的有效工具，有助于进一步深入研究不同的焦虑样状态。

这项研究成果发表在《Behavioural Processes》上，其意义重大。它首次详细描述了在 OFT 测试中斑马鱼对新奇环境适应过程中趋触性的变化，以及不同焦虑调制因素对这种动态变化的影响。这不仅有助于研究人员更准确地理解焦虑相关行为在 OFT 测试中的表现机制，也为后续神经行为学研究提供了新的思路和方法。通过明确甩尾行为与焦虑相关表型的关系，为未来开发更精准的焦虑相关疾病研究模型和治疗方法奠定了基础。

在研究方法上，研究人员首先确定实验动物斑马鱼的来源及相关参数，计算最小样本量。然后分别进行不同的处理，包括 MOR 戒断、CAS 处理、ETOH 处理和 FLU 处理。最后将处理后的斑马鱼进行 10 分钟的 OFT 测试，并对行为活动进行分析，同时运用皮尔逊分析来研究各行为终点数据之间的相关性。