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胆囊癌（GBC）治疗面临困境，化疗耐药问题突出。研究人员开展了灵芝酸 A（GAA）联合顺铂（DDP）对 GBC 细胞作用的研究。结果显示 GAA 能增强 DDP 抗癌效果，为 GBC 治疗提供新方向，有望改善患者预后。
在癌症治疗的战场上，胆囊癌（GBC）是一个棘手的 “敌人”。它是一种侵袭性很强的恶性肿瘤，在南美洲、东亚和印度等地区发病率较高。尽管全球发病率整体不算高，但每年每 10 万人中仍约有 1 - 2 人患病，而且女性的发病率高于男性。更为糟糕的是，胆囊癌早期症状不明显，多数患者确诊时已处于晚期，治疗效果差，5 年生存率不到 20% 。
目前，胆囊癌的标准治疗方法包括手术切除、放疗和化疗。然而，由于早期难以发现，手术往往只适用于早期患者。对于晚期患者，化疗成为主要选择，其中顺铂（DDP）是常用药物。但令人头疼的是，大约 50 - 60% 的胆囊癌患者对顺铂产生耐药性，这极大地限制了顺铂的治疗效果，导致患者治疗预后不佳。
为了攻克顺铂耐药这一难题，来自湖北医药学院附属太和医院肝胆胰外科的研究人员，将目光投向了灵芝酸 A（GAA）。灵芝酸 A 是从传统中药灵芝中提取的三萜类化合物，它具有多种药理活性，在抗癌方面展现出一定潜力，对正常细胞毒性较低。不过，它在胆囊癌治疗中发挥作用的具体机制还不清楚。于是，研究人员开展了一项研究，试图揭开灵芝酸 A 在胆囊癌治疗中的神秘面纱。这项研究成果发表在了《World Journal of Surgical Oncology》上。
研究人员开展此项研究时，运用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，通过培养人胆囊上皮细胞（HGBEC）和人胆囊癌细胞系 GBC - SD，并将其分组处理，运用 CCK - 8 assay 检测细胞活力，Cell colony formation assay 评估细胞集落形成能力，TUNEL 检测细胞凋亡，Cell spheroidization experiment 和 Immunofluorescence detection 研究细胞干性，Comet assay 测定 DNA 损伤水平，Western blot 检测相关蛋白表达水平。同时，利用 STR（Short Tandem Repeat） profiling 进行细胞系鉴定，确保实验细胞的准确性。
下面来看具体的研究结果：
- GAA 对 GBC 细胞活力和集落形成能力的影响：研究发现，GAA 对 HGBEC 细胞活力影响较小，在 80μM 时才有明显降低。但在 GBC - SD 细胞中，GAA 呈浓度依赖性抑制细胞活力。当 GAA 与 DDP 联合使用时，DDP 的 IC50值显著降低，表明二者有协同作用。集落形成实验也显示，联合处理组的集落形成能力下降最为明显。这说明 GAA 不仅能抑制 GBC 细胞活力和集落形成，还能增强 DDP 的抗癌活性。
- GAA 对 GBC 细胞凋亡的影响：TUNEL 检测和 Western blot 分析结果表明，GAA 和 DDP 单独处理都能使 GBC - SD 细胞凋亡率显著增加，联合处理时凋亡率更高。同时，促凋亡蛋白 Bax/Bcl - 2 和 cleaved - caspase 3 的表达也显著上升。这意味着 GAA 能促进 GBC 细胞凋亡，并且与 DDP 联合使用时效果更显著。
- GAA 对 GBC 细胞干性的影响：通过 sphere formation assays、immunofluorescence detection 和 Western blot 分析发现，GAA 和 DDP 单独处理都能降低 GBC - SD 细胞的干性，联合处理时抑制作用更强。关键干性标记物 CD44、SOX2、Oct4 和 NANOG 的表达均显著下调。这表明 GAA 可抑制 GBC 细胞干性，联合 DDP 使用能增强抗癌效果。
- GAA 对 GBC 细胞 DNA 损伤的影响：Comet assay 和 Western blot 分析结果显示，GAA 和 DDP 单独处理都能增加 GBC 细胞的 DNA 损伤，联合处理时 DNA 损伤更严重，相关 DNA 损伤标记物 γH2AX、p - ATM、p - ATR 和 p - p53 的表达也显著升高。这说明 GAA 能促进 GBC 细胞 DNA 损伤，联合 DDP 使用效果更明显。
- GAA 对 AMPK/mTOR 信号通路的调节：Western blot 分析表明，GAA 和 DDP 单独处理都能激活 AMPK 通路，抑制 mTOR 通路，联合处理时这种调节作用更显著。这意味着 GAA 可通过调节该信号通路，影响细胞能量代谢，抑制 GBC 细胞生长和增殖。
综合上述研究结果，研究人员得出结论：灵芝酸 A（GAA）能显著抑制胆囊癌细胞的增殖、干性，促进细胞凋亡，并通过 DNA 损伤反应增强顺铂（DDP）的抗癌效果。二者联合使用可显著提高治疗效果，这为胆囊癌的治疗提供了新的潜在策略，GAA 有望成为胆囊癌辅助治疗的有效药物。
不过，研究人员也指出，虽然此次研究取得了重要成果，但仍存在一些问题需要进一步探索。比如，研究仅在 GBC - SD 细胞系中进行，结果可能无法推广到所有胆囊癌亚型。未来需要扩大研究范围，纳入更多的胆囊癌细胞系和患者来源的异种移植模型（PDXs）。此外，GAA 与化疗联合使用的安全性和潜在毒性还需要进一步评估，其在体内的药代动力学特性也有待研究。同时，研究中未对 GAA 调节 AMPK/mTOR 信号通路的下游代谢效应进行深入探究，后续研究可关注这方面内容。总之，这项研究为胆囊癌治疗开辟了新方向，但仍需更多研究来验证和完善，以推动其临床应用，为胆囊癌患者带来新的希望。
