空间转录组学揭示 Castleman 病的发病机制：为攻克罕见病带来新曙光

Castleman 病（CD）病因不明，为探究其发病机制，郑州大学第一附属医院研究人员运用空间转录组学对 3 例不同组织学类型的 CD 患者淋巴结及 1 例正常淋巴结进行研究。结果显示，CD 病变细胞可能是 B 细胞，间充质细胞作用重要且细胞通讯存在异质性，为后续研究和新药研发提供方向。

　　在医学领域，Castleman 病（CD）是一种极为神秘的罕见淋巴增生性疾病。它就像隐藏在人体淋巴系统中的 “神秘刺客”，悄无声息地引发无痛性淋巴结肿大，让医生和患者都头疼不已。目前，虽然我们对 CD 的临床表现和组织学变化有了一定了解，但它的发病机制依旧如同被迷雾笼罩。

此前研究发现，白细胞介素 - 6（IL-6）的异常变化或许与特发性多中心 Castleman 病（iMCD）的发病有关，针对 IL-6 的靶向治疗也已应用于临床。然而，令人遗憾的是，这种治疗方法仅对部分患者有效，还有许多患者无法从中受益。这表明，CD 的发病机制远比我们想象的复杂，仅依靠抑制 IL-6 远远不够。因此，深入探究 CD 的发病机制，寻找新的治疗靶点和方案迫在眉睫。

为了揭开 CD 发病机制的神秘面纱，郑州大学第一附属医院的研究人员挺身而出。他们开展了一项极具创新性的研究，利用空间转录组学技术，对 3 例不同组织学类型（透明血管型、浆细胞型和混合型）的 CD 患者淋巴结以及 1 例正常淋巴结进行研究。通过这项研究，研究人员收获颇丰。他们发现，CD 的病变细胞可能是 B 细胞；间充质细胞，尤其是肌成纤维细胞，在疾病进展中扮演着重要角色；而且不同组织学类型的 CD，其细胞簇之间的细胞通讯存在很大的异质性。这些发现为后续探索 CD 的发病机制指明了方向，也为开发新的临床药物提供了宝贵线索。该研究成果发表在《Journal of Translational Medicine》上。

研究人员为开展此项研究，主要运用了以下关键技术方法：首先，精心收集了符合严格标准的患者样本，包括 3 例不同组织学类型的 CD 患者的福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）淋巴结样本和 1 例正常 FFPE 淋巴结样本。接着，运用空间转录组学技术，涵盖样本玻片制备、组织优化、文库构建等一系列流程。最后，对数据进行处理和分析，借助 Seurat、edgeR 等多种 R 包进行基因表达分析、差异表达基因分析等。

下面详细介绍研究结果：

• 患者基本临床特征：研究纳入 4 个 FFPE 样本，病变组织均为人类疱疹病毒 8（HHV-8）阴性，患者临床分型为多中心 Castleman 病（MCD）。不同组织学类型的患者在血清 β₂- 微球蛋白（β₂-MG）、IL-6、IL-8 等指标上存在差异，浆细胞型 CD（PC-CD）患者临床症状最为严重。
• 细胞类型注释和样本间差异：通过基因集变异分析（GSVA），将每个 FFPE 样本分为 14 个细胞簇，包括 B 细胞、浆细胞等。对比不同组织学类型的样本发现，透明血管型 CD（HV-CD）中 B 细胞比例最高，而其他样本中非内皮干细胞（NESCs）比例最高；PC-CD 和混合型 CD 淋巴结中浆细胞比例显著高于正常淋巴结；所有病变组织中肌成纤维细胞比例显著增加，巨噬细胞、单核细胞和血管内皮细胞（BECs）比例下降。
• 病变细胞的鉴定和轨迹：以 NK 细胞为参照，经拷贝数变异（CNV）分析发现 B 细胞得分最高，推测 B 细胞可能是病变细胞。对样本进行伪时间序列分析，以 B 细胞为起始细胞，发现病变组织在发育后期浆细胞、循环细胞、淋巴管内皮细胞（LECs）和肌成纤维细胞数量显著增加。正常淋巴结组织发育节点高表达免疫相关基因，而病变组织还高表达细胞迁移和黏附相关基因，这表明基质细胞在 CD 发展中至关重要。
• 病变组织内的遗传、功能异质性：对病变组织与正常组织、病变组织中 B 细胞簇与其他簇进行差异表达基因分析和富集分析。发现所有病变组织 B 细胞簇中 B₂M 和 IGKC 表达上调；病变组织在细胞质、细胞核、RNA 结合等功能增强，在蛋白质加工、自噬等代谢途径增加，且感染其他疾病的可能性上升；病变组织 B 细胞簇中 FcγR 介导的吞噬作用、B 细胞受体信号通路等增加。
• 疾病发展相关的分子机制：通过细胞通讯分析发现，正常淋巴结组织中 B 细胞簇与其他簇联系紧密，尤其是 NESCs 簇；PC-CD 淋巴结组织中，髓样树突状细胞（mDCs）与 LECs、LECs 与浆细胞联系紧密，IL-10 通路过度激活，BECs 可能促进浆细胞增殖；混合型 CD 淋巴结组织中，浆细胞与肌成纤维细胞通讯频繁，多种信号通路参与调节；HV-CD 组织中，各簇联系紧密，B 细胞簇不活跃，CSF 信号通路在其他簇显著上调。此外，研究还发现 CXCL 通路在正常和病变组织中存在差异。

研究结论和讨论部分意义重大。研究表明，B 细胞可能是 CD 的病变细胞，间充质细胞在疾病进展中发挥重要作用，不同组织学类型的 CD 细胞通讯存在异质性。这为后续研究 CD 的发病机制提供了新的思路，也为开发新的临床药物指明了方向。同时，研究发现血清 β₂-MG 动态检测对疾病诊断和预后评估可能具有指导意义，免疫反应过度是 CD 的关键病因，NF-κB 信号通路可能成为新的靶向治疗靶点。然而，研究也存在局限性，样本量较小且缺乏单中心 Castleman 病（UCD）数据。但总体而言，该研究首次揭示了 CD 淋巴结组织中各细胞簇的空间位置，以及不同组织学亚型的基因、细胞类型和通路变化，为临床治疗提供了新的潜在靶点，推动了 CD 研究领域的发展。