靶向 SLAMF7 的溶瘤腺病毒：多发性骨髓瘤治疗的新希望

为解决多发性骨髓瘤（multiple myeloma）这一无法治愈的血液恶性肿瘤的治疗难题，研究人员开展了针对新型 SLAMF7 启动子驱动的溶瘤腺病毒（Ad [CE1A]）的研究。结果显示 Ad [CE1A] 在体内外均展现抗骨髓瘤疗效，联合治疗可增强效果。这为骨髓瘤治疗提供了新方向。

　　在血液肿瘤的世界里，多发性骨髓瘤（multiple myeloma）如同一个难以攻克的 “堡垒”。它是一种源于浆细胞的血液恶性肿瘤，在全球范围内，每年约有 17.6 万人被诊断患有此病，且随着人口老龄化，发病率还在不断攀升。尽管近年来治疗手段有所进步，患者的五年生存率提高到了 52.3%，但它仍然无法被彻底治愈。传统化疗存在诸多弊端，其毒性给患者带来了沉重负担，因此，寻找新的、安全有效的治疗方法迫在眉睫。

在这样的背景下，英国谢菲尔德大学（University of Sheffield）的研究人员勇敢地向这个难题发起挑战。他们将目光聚焦于溶瘤病毒（Oncolytic viruses，OVs），这是一种新兴的抗癌疗法，就像一群训练有素的 “杀手”，能够利用复制的病毒诱导癌细胞直接死亡，还能激活机体的先天和适应性抗肿瘤免疫反应。而腺病毒血清型 5（Ad5）作为研究较为广泛的溶瘤病毒之一，有着良好的安全性和一定的抗癌效果。研究人员进一步优化，开发出了一种新型的 SLAMF7 启动子驱动的溶瘤 Ad5（Ad [CE1A]），并对其进行了深入研究。

最终，研究取得了令人瞩目的成果。Ad [CE1A] 在治疗多发性骨髓瘤方面展现出了巨大的潜力，为众多患者带来了新的希望。该研究成果发表在了《Leukemia》杂志上。

研究人员为开展此项研究，运用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，对多种骨髓瘤细胞系、患者来源的原代细胞以及健康供体（HDs）的细胞进行培养。通过流式细胞术（Flow cytometry）检测细胞表面标志物的表达；采用 RT-qPCR 技术分析基因表达水平；利用细胞活力和死亡检测实验评估 Ad [CE1A] 对细胞的杀伤作用。在动物实验方面，构建了 U266 异种移植模型和 5TGM1 同基因小鼠模型，通过生物发光成像和组织学分析监测肿瘤负担。

下面来详细看看研究结果：

1. 人骨髓瘤细胞对腺病毒感染敏感：以往认为 Ad5 依赖的柯萨奇腺病毒受体（CAR）在血液细胞中表达较低，限制了溶瘤 Ad 疗法在血液癌症中的应用。但研究发现，多数人骨髓瘤细胞系虽 CAR 表达水平低于 HEK293A 细胞，但仍有一定表达，且还表达avβs和αvβ3整合素，这使得骨髓瘤细胞能高效感染腺病毒。
2. Ad [CE1A] 在人骨髓瘤细胞系中具有溶瘤活性：Ad [CE1A] 利用 CS1（SLAMF7）控制关键复制基因 E1A 的转录。研究发现，多数骨髓瘤细胞系的 CS1 和 SLAMF7 表达高于 HEK293A 细胞，Ad [CE1A] 在这些细胞中能有效复制，其 E1A 表达与 SLAMF7 表达呈正相关，且能产生感染性病毒后代。同时，Ad [CE1A] 可剂量依赖性地诱导骨髓瘤细胞死亡，而对照的 Ad [PSA] 则无此效果，表明细胞死亡是由 SLAMF7 驱动的复制导致，而非初始病毒感染。
3. 原发性患者来源的骨髓瘤细胞对 Ad [CE1A] 感染和溶瘤敏感：患者来源的 PCL 细胞 Ad5 受体表达与骨髓瘤细胞系相当，CD138⁺骨髓瘤患者来源的浆细胞感染率较高，且 CS1/SLAMF7 表达显著高于其他对照细胞。Ad [CE1A] 能显著诱导骨髓瘤和 PCL 的 CD138⁺细胞死亡，对健康供体的 CD138⁺细胞则无明显影响，且对免疫细胞亚群也无显著不良影响，表明其具有潜在的治疗价值。
4. Ad [CE1A] 诱导不依赖 caspase 的细胞死亡，坏死性凋亡（necroptosis）可能起作用：Ad [CE1A] 诱导细胞死亡的机制尚不明确。研究发现，其虽能增加 Annexin V⁺TO - PRO - 3^-表达，但凋亡基因无明显上调，caspase 抑制剂也无法阻止细胞死亡。而抑制坏死性凋亡关键蛋白 MLKL 可显著保护骨髓瘤细胞，不过无法完全阻止细胞死亡，说明还有其他机制参与。
5. Ad [CE1A] 诱导免疫原性细胞死亡标志物、MHC I 类和 II 类分子表达，并引发旁观者细胞因子杀伤：OV 溶瘤可引发免疫反应，Ad [CE1A] 处理后，免疫原性细胞死亡（ICD）相关标志物 CD47 减少，CALR 和细胞外 ATP 增加。同时，MHC I 类（HLA - ABC）和 II 类（HLA - DR）分子表达上调，这有助于抗原呈递和 T 细胞激活。此外，Ad [CE1A] 处理的骨髓单核细胞（BMMCs）条件培养基能降低骨髓瘤细胞活力，表明存在旁观者细胞因子杀伤作用。
6. Ad [CE1A] 在异种移植和免疫健全的小鼠骨髓瘤模型中显示体内疗效：在 U266 异种移植模型和 5TGM1 同基因小鼠模型中，Ad [CE1A] 治疗均显著降低了肿瘤负担，且对骨髓瘤诱导的骨病无不良影响，展现出良好的体内治疗效果。
7. Ad [CE1A] 与抗骨髓瘤化疗联合增强骨髓瘤细胞系的杀伤效果：单独使用 OVs 作为单一疗法的治愈潜力有限，因此研究人员将 Ad [CE1A] 与批准的抗骨髓瘤疗法（如硼替佐米、美法仑、帕比司他和泊马度胺）联合。结果显示，联合治疗增强了对 5TGM1 细胞的抗增殖作用，不同药物组合呈现出协同或相加效应，但不同骨髓瘤细胞系对联合治疗的反应存在差异。
8. 美法仑增强 Ad [CE1A] 复制：探究联合治疗协同作用的机制发现，美法仑显著增加 CS1 表达、病毒 E1A 表达和病毒滴度，促进 Ad [CE1A] 在骨髓瘤细胞中的复制。其他药物虽也有一定影响，但机制更为复杂。
9. Ad [CE1A] 对硼替佐米不敏感细胞有效，并能防止硼替佐米治疗后细胞再生：骨髓瘤常对硼替佐米等疗法产生耐药性。研究发现，Ad [CE1A] 能有效阻止硼替佐米治疗后骨髓瘤细胞系的再生，且对硼替佐米不敏感细胞同样具有杀伤作用，为复发 / 难治性疾病的治疗带来希望。

研究结论和讨论部分指出，Ad [CE1A] 在治疗骨髓瘤方面具有巨大潜力，可与标准化疗联合增强抗骨髓瘤反应。尽管存在一些问题，如患者细胞对 Ad [CE1A] 反应的异质性可能与骨髓瘤的异质性或中和抗体有关，Ad [CE1A] 诱导细胞死亡的机制复杂，涉及多种途径，但这些并不影响其作为一种有前景的治疗方法。未来，有望通过进一步研究，优化 Ad [CE1A] 的治疗方案，为多发性骨髓瘤患者带来更好的治疗效果，推动血液肿瘤治疗领域的发展。