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为解决 46, XY DSDs 无子宫患者精准诊断难题，研究人员开展了相关基因研究。对 21 例患者进行全外显子测序（WES），发现 22 个与性别发育相关基因的变异，明确多种疾病病因。逆向表型有助于精准诊断，为相关疾病诊疗提供依据。
在人类的繁衍进程中，性别发育是一个神奇而复杂的过程，然而，性别发育异常（Disorders of sex development, DSD）这一罕见状况却打破了这份常规。DSD 是一类先天性发育异常疾病，其特征为染色体、性腺或内外生殖器的表型特征不典型，在人群中的患病率约为 0.5% 。其中，46, XY DSDs 患者的情况尤为特殊，他们的性腺分化和发育受多种因素调控，一旦出现异常，就会导致睾丸发育、雄激素合成或作用等方面的问题，进而影响男性化进程。
目前，46, XY DSDs 无子宫患者的精准诊断面临诸多挑战。其临床表型相似且复杂，仅依靠传统的临床评估、染色体检查和激素测量等手段，很难准确区分潜在病因并确定致病基因。随着精准医学的发展，基因组数据为解开这类复杂疾病的谜团带来了新的希望，逆向表型（根据基因数据细化表型）成为提高罕见病诊断水平的有力工具。
为了深入探究 46, XY DSDs 无子宫患者的分子病因，中国医学科学院北京协和医院妇产科、生殖内分泌与不孕不育中心的研究人员展开了一项重要研究。他们收集了 2022 - 2023 年期间就诊的 21 例 46, XY DSD 无子宫患者的临床资料，并对这些患者进行了全外显子测序（Whole exome sequencing, WES），同时对候选基因进行靶向桑格测序（Sanger sequencing）以明确遗传模式。
该研究的主要技术方法包括：首先是样本收集，从北京协和医院选取符合条件的患者；其次是全外显子测序，提取患者基因组 DNA，经片段化、杂交捕获、文库构建等步骤，利用 Illumina HiSeq2000 平台进行测序；最后是对测序结果进行分析，通过多种软件和工具注释、筛选变异，依据美国医学遗传学与基因组学学会（ACMG）等指南评估变异致病性。
研究结果如下：
- 临床特征：21 例患者均为女性表型，46, XY 染色体核型。13 - 27 岁患者多以原发性闭经为主诉，6 例青春期前患者则表现为高血压、腹股沟肿块或外生殖器异常。外生殖器检查发现部分患者正常，部分有阴蒂增大或阴唇融合等异常。盆腔超声和病理检查确认所有患者均无子宫。除青春期前患者外，其余患者身高在 155 - 197cm 之间，且所有患者阴毛稀疏或缺失，雄激素不敏感综合征（Androgen insensitivity syndrome, AIS）患者乳房发育相对较好，5 例 17α - 羟化酶缺乏症（17α-hydroxylase deficiency, 17OHD）患者伴有高血压和低血钾。
- 激素特征：青春期前儿童激素水平与年龄相符。除 AIS 和 46, XY 部分性腺发育异常（46, XY partial gonadal dysgenesis, 46, XY PGD）患者外，其余患者雄激素水平显著降低。17OHD 患者表现为持续高孕激素血症，雌激素（E2）和睾酮（T）降低，促卵泡生成素（FSH）和促黄体生成素（LH）升高；AIS 患者 E2水平正常，部分 FSH、LH 水平升高，T 水平大多正常或高于正常男性；46, XY PGD 患者表现为高促性腺激素性性腺功能减退，FSH 升高，T 水平也升高。
- 突变分析：WES 检测到 22 个与性别发育相关的基因变异，包括 14 个已报道的变异和 8 个新变异。涉及类固醇激素合成和雄激素受体作用的基因（LH/HCG 受体（LHCGR）、CYP17A1、SRD5A2、AR）以及性腺发育相关基因（NR5A1）。依据 ACMG 指南，17 个变异被判定为致病性（P）或可能致病性（LP），5 个为意义未明变异（VUS）。Trio-WES 检测到 3 个新发变异。
研究结论和讨论部分指出，本研究通过逆向表型实现了 46, XY DSD 无子宫患者的分子诊断，发现多个新变异，拓宽了相关疾病的突变谱。46, XY DSDs 发病机制复杂，涉及雄激素合成和 AR 作用异常以及性腺发育异常。逆向表型结合临床表型有助于精准诊断，对预防恶性肿瘤发生、减少患病儿童出生具有重要意义。不过，研究也存在一定局限性，如样本量有限，未涉及表观遗传学分析，变异的有害性仅通过计算机预测，还需进一步的体内外功能研究验证。总体而言，该研究为 46, XY DSDs 的诊疗提供了重要依据，推动了相关领域的发展，论文发表在《Orphanet Journal of Rare Diseases》上，为全球研究罕见病的科研人员提供了宝贵的参考 。
