编辑推荐：
为探究 HLA-F 对滋养层细胞增殖的影响及子痫前期发病机制，研究人员开展了 “HLA-F 通过 PKM2 依赖的糖酵解调节滋养层细胞增殖在子痫前期发病机制中的作用” 的研究。结果发现 HLA-F 表达降低会抑制滋养层细胞增殖，该研究为子痫前期治疗提供新方向。
在生命的奇妙旅程中，怀孕本是一个充满希望与奇迹的过程，但子痫前期却如同一朵阴霾，笼罩着母婴健康。子痫前期是一种孕期特有的多病因疾病，以孕妇高血压和器官损伤为主要特征。目前，其发病机制尚未完全明确，严重威胁着母婴的生命安全。
在众多与子痫前期相关的研究中，HLA-F（人类白细胞抗原 F）这一分子逐渐进入了科学家的视野。HLA-F 是一种非经典的 HLA I 类分子，在母胎界面广泛表达，对维持母胎免疫耐受起着重要作用。已有研究发现，子痫前期患者的滋养层细胞中 HLA-F 水平降低，且 HLA-F 可能与滋养层细胞的增殖有关，但具体机制却一直是个谜。
为了揭开这个谜团，四川省医学科学院?四川省人民医院、西南医科大学附属医院、四川大学华西第二医院等机构的研究人员开展了一项深入研究。他们的研究成果发表在《Molecular Medicine》上，为我们理解子痫前期的发病机制带来了新的曙光。
研究人员采用了多种关键技术方法。他们收集了 12 例子痫前期患者和 12 例正常妊娠的胎盘样本（样本队列来源），运用 q-PCR、Western blot、免疫组化（IHC）检测 HLA-F 和丙酮酸激酶肌肉同工酶 2（PKM2）的表达；通过质粒转染、慢病毒感染、siRNA 和 shRNA 转染等技术调控相关基因；利用免疫荧光分析 HLA-F 和 PKM2 的表达与分布；借助 ChIP-seq 分析 HLA-F 结合的 DNA 序列，4D-LFQP-LA 分析差异乳酸化蛋白，还使用 Mini-PDX 模型进行体内实验。
研究结果如下：
- HLA-F 在子痫前期患者滋养层细胞中表达降低：研究人员通过对胎盘样本进行 HLA-F 免疫组化染色、q-PCR 和 Western blot 分析，发现子痫前期患者胎盘的绒毛外滋养层（EVT）和绒毛细胞滋养层（VCT）中 HLA-F 表达显著低于正常妊娠晚期的对照组，这一结果证实了之前的报道。
- HLA-F 促进滋养层细胞增殖：在不同滋养层细胞系中，HLA-F 在 Bewo 和 Jar 细胞中的表达高于 HTR-8/SVneo 细胞。进一步实验表明，过表达 HLA-F 可增强 Jar 细胞的增殖能力，而抑制 HLA-F 表达则会抑制细胞增殖，MTT 和集落形成实验均验证了这一点。
- HLA-F 促进 PKM2 介导的滋养层细胞糖酵解：蛋白质谱分析发现，HLA-F 过表达的 Jar 细胞中 PKM2 及 PI3K/AKT 通路相关蛋白表达增加。免疫荧光染色和 ELISA 检测结果显示，HLA-F 过表达使 PKM2 在细胞质中的分布增加，酶活性增强，乳酸和丙酮酸含量升高，表明 HLA-F 在 PKM2 介导的糖酵解中发挥重要作用。
- HLA-F 诱导 PKM2 表达：Western blot 结果显示，HLA-F 过表达时，PKM2 和己糖激酶 2（HK2）的蛋白表达显著增加；ChIP-seq 分析发现 HLA-F 可结合 PKM 基因启动子，促进其转录，qPCR 进一步验证了这一结果。
- HLA-F 通过调节 PKM2 促进细胞增殖：用 siRNA 沉默 HLA-F 过表达 Jar 细胞中的 PKM2 后，细胞活力和集落形成数量显著下降，乳酸和丙酮酸生成减少，PKM2 酶活性降低。Mini-PDX 模型实验表明，PKM2 激动剂 TEPP-46 可促进 HLA-F 敲低的 Jar 细胞增殖。
- HLA-F 通过抑制 PKM2 K305 乳酸化促进 PKM2 酶活性：研究人员发现子痫前期患者胎盘组织中 PKM2 活性、丙酮酸含量和蛋白表达均显著降低。4D-LFQP-LA 分析显示，HLA-F 过表达可下调 PKM2 赖氨酸 305 位点（PKM2 K305）的乳酸化水平。构建 PKM2 K305R 突变体转染实验表明，K305 位点对 PKM2 功能至关重要，HLA-F 可通过抑制该位点乳酸化促进 PKM2 酶活性。
研究结论和讨论部分指出，HLA-F 表达降低会导致 PKM2 转录和蛋白表达下调，同时 PKM2 K305 乳酸化相对上调，使酶活性下降，糖酵解功能障碍，最终抑制滋养层细胞增殖，参与子痫前期的发病过程。此外，研究首次发现 PKM2 K305 乳酸化对其酶活性有抑制作用。在缺乏针对 HLA-F 基因表型和表达水平的有效干预策略时，PKM2 激动剂可能促进胎盘形成，为子痫前期的治疗提供潜在价值。但该研究也存在一些局限性，如未探究糖酵解途径下游调节滋养层细胞增殖的具体靶点，也未在子痫前期动物模型中进行 PKM2 激动剂的干预研究。未来需要进一步深入研究，以验证这些发现并探索新的治疗方法。总之，这项研究为子痫前期的发病机制提供了新的见解，为开发新的治疗策略奠定了基础，对改善母婴健康具有重要意义。
