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胰腺癌（PDAC）的免疫治疗效果不佳，肿瘤微环境（TME）是重要原因。为探究 TME 中 CD20+ B 细胞的临床意义，福建医科大学附属第一医院等机构的研究人员分析 45 例 PDAC 患者的切片。结果显示，侵袭前沿（IF）的 B 细胞分布特征与患者预后相关。该研究为胰腺癌预后评估提供新视角129。
在癌症的 “舞台” 上，胰腺癌堪称一位 “狠角色”。预计到 2030 年，它将成为全球癌症相关死亡的第二大 “元凶”。其中，胰腺导管腺癌（Pancreatic ductal adenocarcinoma，PDAC）最为常见，却也是最难对付的肿瘤之一，美国患者的 5 年生存率仅约 10% 。免疫治疗，这本是众多实体肿瘤患者的 “救命稻草”，在 PDAC 面前却效果有限。为何会这样？肿瘤微环境（Tumor microenvironment，TME）“脱不了干系”。TME 不仅像个 “帮凶”，助力肿瘤发展，还会削弱免疫治疗药物的效果，成为治疗路上的 “绊脚石”。
在 TME 这个复杂的 “生态系统” 里，免疫细胞的作用至关重要，可 B 细胞的角色却一直模糊不清。过往研究对 B 细胞与 PDAC 患者生存关系的探讨十分有限，且结论相互矛盾。有的研究说 B 细胞增多和聚集能改善预后，有的却指出 B 细胞会促进肿瘤生长，让患者的情况更糟。这背后的原因是什么呢？研究人员猜测，或许是 B 细胞在 TME 中的空间分布差异在 “捣鬼”。为了揭开这层面纱，福建医科大学附属第一医院等机构的研究人员展开了深入研究。
他们的研究成果发表在《Discover Oncology》上。研究人员从 45 例 PDAC 患者术后的切片入手，这些患者术前均未接受辅助治疗。研究人员运用了多种技术方法：首先，通过免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）染色标记 CD20+ B 细胞；接着，利用图像分割技术提取细胞坐标；然后，借助空间分析和聚类分析等手段，将肿瘤分为侵袭前沿（Invasive front，IF）、癌中心（Cancer center，CT）和癌岛（Cancer island，CI）三个区域，计算占用率、分形维数（Fractal dimension，FD）、聚类密度和覆盖率等指标，分析 B 细胞的空间分布模式；最后，将这些指标与患者生存结局进行关联分析。
研究结果如下：
- 患者基本特征：45 例患者中，男性 27 例，女性 18 例，平均年龄 59.6 岁。肿瘤大小、组织学分级、TNM 分期等情况各异。根据总生存期（Overall survival，OS），患者被分为长期生存（Long-term survivors，LTS）和短期生存（Short-term survivors，STS）两组，分别有 17 例和 28 例3。
- 分割结果：通过对比手动识别和自动检测，验证了算法的准确性，分类结果显示真阳性（True positive，TP） =7002 ，假阳性（False positive，FP） = 1625，假阴性（False negative，FN）=559 ，召回率（Recall rate）为 92.6±0.3%，精度（Precision）为 81.2±0.4%，分类器预测与手动计数的斯皮尔曼等级相关系数达 0.984，表明两者相关性很强4。
- 数据处理和统计特征：B 细胞在不同区域呈现出聚集和分散两种分布模式。IF 区域的占用率曲线下面积（Area under curve，AUC）、聚类密度最高，与 CT、CI 区域差异显著；CT 和 CI 区域的占用率 AUC 无显著差异；IF 和 CI 区域的聚类密度高于 CT 区域；IF 区域的覆盖率变化最大，与 CT 区域差异显著5。
- CD20+ B 细胞的占用率与 PDAC 患者的 OS 无显著相关性：在三个肿瘤区域进行占用分析，发现 LTS 组的占用率普遍较低，但差异均无统计学意义，生存分析也显示占用 AUC 与患者生存无关联6。
- IF 区域中空间分散度较低的 B 细胞与 PDAC 患者更好的生存结局相关：计算 FD 差异（ΔFD）来反映 B 细胞的空间聚集状态，发现 LTS 组 IF 区域的 ΔFD 显著低于 STS 组，且较低的 ΔFD 与更好的总生存期相关，而在 CT 和 CI 区域未发现此趋势7。
- IF 区域中较高的 B 细胞簇密度和较低的覆盖率与 PDAC 患者的生存期延长相关：应用 HDBSCAN 算法识别 B 细胞簇，发现 LTS 组 IF 区域的覆盖率显著低于 STS 组，卡普兰 - 迈耶（Kaplan–Meier）生存分析显示，IF 区域较高的簇密度和较低的覆盖率与更好的预后相关，而 CT 和 CI 区域的簇密度和覆盖率对患者结局影响不显著8。
研究结论和讨论部分指出，该研究利用计算机算法辅助的方法量化了 PDAC 患者 TME 中 CD20+ B 细胞的空间模式，发现 IF 区域 B 细胞的空间分布与患者生存显著相关，非分散的 B 细胞和 B 细胞簇对患者预后有积极影响。尽管 CT 和 CI 区域的结果临床意义尚不明确，但也呈现出一定趋势。不过，研究存在局限性，样本量相对较小，且仅关注 B 细胞，忽略了其他免疫标记及其相互作用。未来研究可在更大的独立队列或多中心研究中进行验证，还可纳入荧光染色样本拓宽研究范围。总体而言，这项研究为胰腺癌的预后评估提供了新的思路和方法，也展示了计算机辅助技术在病理分析中的巨大潜力，有望帮助病理学家更有效地评估患者预后，指导康复治疗 。
