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为解决胃肠胰神经内分泌肿瘤（GEP-NETs）因异质性导致的治疗难题，研究人员开展了关于工程化溶瘤单纯疱疹病毒（oHSV）M002 对 GEP-NETs 治疗效果的研究。结果显示 M002 能有效抑制肿瘤生长、延长动物生存期，为 GEP-NETs 治疗提供新方向。
在儿童肿瘤的世界里，癌症是导致死亡的第二大 “杀手”，其中颅外实体瘤约占儿童癌症类型的 30%。神经内分泌肿瘤（NETs）作为一种源于神经嵴的实体瘤，可在身体多个部位 “安营扎寨”。胃肠胰神经内分泌肿瘤（GEP-NETs）是 NETs 的一种亚型，虽说在儿童群体中较为罕见，每百万儿童中仅有 0.1 例发病，但近年来其发病率却在不断攀升，然而患者的总体生存率却并未得到相应提升。
GEP-NETs 的治疗充满挑战。由于这类肿瘤生长较为缓慢，不少儿童患者在确诊时就已出现转移，而且胃肠道中至少存在 13 种不同的神经内分泌细胞类型，使得 GEP-NETs 异质性很强，治疗难度极大。目前的非手术治疗手段，如生长抑素类似物、靶向分子疗法、细胞毒性化疗以及肽受体放射性核素疗法等，效果都不尽如人意，儿童 GEP-NETs 患者的生存率不足 41%，因此，寻找更有效的治疗策略迫在眉睫。
在这样的背景下，美国阿拉巴马大学伯明翰分校（University of Alabama at Birmingham）的研究人员展开了一项意义重大的研究。他们将目光聚焦于溶瘤病毒，这种病毒具有独特的抗癌机制，一方面可以通过感染和复制直接裂解肿瘤细胞，另一方面还能形成免疫反应性碎片场，吸引和激活细胞毒性免疫细胞。研究人员选取了一种经过基因工程改造的溶瘤单纯疱疹病毒（oHSV）M002，深入探究其对 GEP-NETs 的治疗潜力，相关研究成果发表在《Scientific Reports》上。
研究人员为开展此项研究，运用了多种关键技术方法。首先，建立了长期传代的 GEP-NET 细胞系 QGP-1 和独特的人儿科患者来源异种移植（PDX）GEP-NET 细胞系 COA109；其次，采用了多种细胞实验技术，如利用流式细胞术检测细胞表面受体表达，通过病毒复制实验评估 M002 在细胞内的复制情况，借助细胞毒性实验确定病毒对细胞活力的影响；此外，还进行了动物实验，构建小鼠肿瘤模型，观察 M002 对肿瘤生长和动物生存的影响，并利用免疫组化检测肿瘤组织中的病毒。
研究结果如下：
- QGP-1 和 COA109 细胞表达 HSV 进入受体：研究人员利用流式细胞术检测发现，QGP-1 和 COA109 细胞均表达单纯疱疹病毒（HSV）感染所需的细胞表面受体，包括 CD111、CD112、syndecan 和疱疹病毒进入介质（HVEM），这为 M002 感染这些细胞奠定了基础。
- M002 感染并在 QGP-1 和 COA109 细胞中有效复制：通过单步和多步病毒恢复实验，研究人员发现 M002 感染 QGP-1 和 COA109 细胞后，能产生大量病毒子代，且随着时间推移，病毒子代数量显著增加。同时，利用 ELISA 检测发现，感染后细胞培养上清液中鼠白细胞介素 - 12（mIL-12）浓度也显著上升，进一步证实了 M002 能在这些细胞中有效感染和复制。
- M002 降低 QGP-1 和 COA109 细胞活力：采用比色法测定细胞活力，结果显示 M002 感染 QGP-1 和 COA109 细胞 72 小时后，细胞活力显著下降。计算得出 QGP-1 细胞的半数致死剂量（LD50）为 0.92 PFU/cell，COA109 细胞的 LD50为 0.13 PFU/cell。
- M002 治疗减少肿瘤生长并改善动物生存：在 QGP-1 细胞和 COA109 细胞构建的小鼠肿瘤模型中，研究人员发现，与注射磷酸盐缓冲液（PBS）的对照组相比，瘤内注射 M002 的小鼠肿瘤生长明显受到抑制，生存时间显著延长。免疫组化检测还在肿瘤标本中检测到了 M002 病毒。
研究结论和讨论部分指出，该研究首次利用 M002 这种基因工程改造的 oHSV，在人儿科 GEP-NET PDX 模型中进行研究，证实其能有效感染、复制并裂解 GEP-NET 细胞，显著抑制肿瘤生长，延长动物生存期，展现出良好的治疗潜力。然而，GEP-NETs 是免疫原性较低的 “冷肿瘤”，对免疫检查点抑制剂反应不佳。而溶瘤病毒疗法可通过裂解肿瘤细胞形成碎片场，吸引免疫细胞进入肿瘤微环境（TME），联合免疫检查点抑制剂或许能提高治疗效果。此外，M002 还能表达 mIL-12，可进一步刺激免疫细胞向 TME 聚集。未来研究可探索 M002 与其他药物联合治疗的方案，以进一步提高溶瘤病毒的治疗效果，为 GEP-NETs 患者带来新的希望。
