超稳定单体红色荧光蛋白 mScarlet3-H解锁前沿显微技术

为解决稳定单体红色荧光蛋白（RFPs）有限的问题，研究人员开展了开发稳定 RFP 的研究。他们开发出 mScarlet3-H 并解析其结构，它在多种条件下稳定，能助力多种显微成像，对多模式显微技术意义重大。

　　

荧光蛋白（fluorescent proteins，FPs）的稳定性对于活细胞成像、超分辨率显微镜技术以及相关光镜和电镜技术（correlative light and electron microscopy，CLEM）等成像技术至关重要。尽管已有稳定的绿色和黄色荧光蛋白，但稳定的单体红色荧光蛋白（monomeric red FPs，RFPs）仍然有限。在此，研究人员开发出一种极其稳定的单体红色荧光蛋白，名为 mScarlet3-H，并以 1.5 Å 的分辨率测定了其结构。mScarlet3-H 对高温、离液条件和氧化环境表现出显著的抗性，这使得相关光镜和电镜技术（CLEM）成像更为高效，还能实现快速（不到 1 天）的全器官组织透明化。此外，其高光稳定性使得在进行线粒体动力学的长期三维结构光照明显微镜（three - dimensional structured illumination microscopy，3D - SIM）成像时，光漂白现象减至最少。它还有助于进行双色活细胞受激发射损耗（stimulated emission depletion，STED）成像，且成像信噪比高、特异性强。通过与高性能红色荧光蛋白的系统对比，mScarlet3-H 被确立为一种高度稳定的红色荧光蛋白，适用于细胞培养和模式生物中的多模式显微镜技术，在斑马鱼、小鼠和本氏烟草（Nicotiana benthamiana）的多重成像中，可与绿色荧光蛋白互补使用。