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为解决 AFP 阴性肝细胞癌（N-HCC）早期诊断和预后评估难题，研究人员开展血清 GPC3 和 PIVKA-II 在 N-HCC 人群中应用价值的研究。结果显示二者在 N-HCC 患者中显著升高，构建的列线图模型能有效诊断和预测预后，为 N-HCC 诊疗提供重要辅助工具。
肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）是全球癌症相关死亡的第三大原因，其发病率和死亡率呈上升趋势。早期 HCC 症状隐匿，多数患者确诊时已处于晚期，5 年总生存率仅约 14.1%。甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein，AFP）是常用的 HCC 血清学标志物，但 20 - 40% 的 HCC 患者 AFP 水平正常，这类 AFP 阴性肝细胞癌（N-HCC）患者临床特征特殊，早期诊断困难。因此，寻找有效的生物标志物用于 N-HCC 的早期诊断和预后评估迫在眉睫。
福建医科大学附属肿瘤医院和福建医科大学附属第一医院的研究人员开展了相关研究，旨在评估血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖 - 3（Glypican-3，GPC3）和维生素 K 缺乏或拮抗剂 - II 诱导蛋白（Protein Induced by Vitamin K Absence or Antagonist II，PIVKA-II）在 N-HCC 人群中的应用价值，并构建列线图诊断和预后预测模型。该研究成果发表在《BMC Cancer》。
研究人员采用病例对照研究方法，收集了 639 例未经治疗的患者，其中 411 例为 HCC 患者，228 例为良性肝病（Benign Liver Disease，BLD）患者。根据 AFP 水平 < 20 ng/mL，将 104 例 HCC 患者分为 N-HCC 研究组，104 例年龄和性别匹配的 BLD 患者分为 N-BLD 对照组。研究用到的主要关键技术方法包括：通过酶联免疫吸附试验和化学发光免疫分析技术分别检测血清 GPC3 和 PIVKA-II 水平；构建受试者工作特征（Receiver Operating Characteristic，ROC）曲线确定诊断截断值；利用限制立方样条（Restricted Cubic Spline，RCS）、 Kaplan-Meier 生存曲线、单因素和多因素逻辑回归、最小绝对收缩和选择算子（Least Absolute Shrinkage and Selection Operator，LASSO）回归以及多因素 Cox 回归等进行数据分析和模型构建 。
研究结果如下：
- 基本人口统计学和临床数据：N-HCC 组与 AFP 阳性 HCC（A-HCC）组相比，老年、男性、早期疾病、小肿瘤和非转移患者比例更高。N-BLD 组与 N-HCC 组在乙肝病毒状态和 Child-Pugh 分级方面匹配良好，但 N-BLD 组基线肝功能指标（除总胆红素（Total Bilirubin，TBIL）外）显著低于 N-HCC 组。
- GPC3 和 PIVKA-II 在 N-HCC 中的诊断价值：N-HCC 患者血清 GPC3 和 PIVKA-II 水平显著高于 N-BLD 组。在 N-HCC 不同分期和肿瘤大小分组中，二者水平也存在差异。ROC 曲线分析显示，PIVKA-II 诊断 N-HCC 的性能优于 GPC3，其 AUC 为 0.925，而 GPC3 的 AUC 为 0.751。
- 基于 GPC3 和 PIVKA-II 的风险因素选择及列线图诊断预测模型构建：将患者随机分为开发集和验证集，经单因素和多因素逻辑回归分析，确定 GPC3、PIVKA-II 和 γ- 谷氨酰转移酶（Gamma-glutamyltransferase，GGT）为独立风险变量，构建列线图模型。该模型在训练集和验证集的 AUC 分别为 0.937 和 0.955，对 N-HCC 诊断的敏感性为 95.20%，特异性为 81.70%，准确性为 76.90%，对 I 期肿瘤和小于 3 cm 肿瘤的敏感性也较高。
- GPC3 和 PIVKA-II 表达水平与患者生存的关系：RCS 分析显示，GPC3 和 PIVKA-II 水平与患者总生存（Overall Survival，OS）呈非线性关系。以中位数为截断值分层后，高风险组患者生存时间和生存率均低于低风险组。
- N-HCC 患者 OS 的列线图预后预测模型开发：经 LASSO 回归和多因素 Cox 回归分析，确定 GPC3 高风险、肝硬化、门静脉血栓形成（Portal Venous Thrombosis，PVT）、白蛋白（Albumin，ALB）<40 g/L 和手术治疗为独立预后因素，构建列线图模型。该模型预测 12、24 和 36 个月生存率的 AUC 分别为 0.909、0.864 和 0.871 ，校准曲线显示预测与实际概率匹配良好，能有效区分 N-HCC 患者的高低风险预后。
研究结论表明，血清 GPC3 和 PIVKA-II 在 N-HCC 的及时检测和预后评估中具有重要临床意义，基于二者构建的列线图预测模型为 N-HCC 的诊断和预后提供了重要辅助工具。不过，该研究存在一定局限性，如列线图未进行外部验证、样本量有待扩大、未分析治疗前后 GPC3 和 PIVKA-II 水平变化及其与预后的关系等。未来研究可针对这些不足进一步探索，以完善 N-HCC 的诊疗策略，提高患者生存率和生活质量。
