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在透析治疗中，水的微生物质量至关重要。为对比传统异养平板计数法（HPC）和流式细胞术（FCM）监测透析水微生物质量的效果，研究人员开展相关研究。结果显示 FCM 灵敏度更高，或能更早采取纠正措施，这对优化透析水监测方法意义重大。
在现代医疗体系中，血液透析是肾衰竭患者维持生命的重要治疗手段。患者每周多次进行 4 小时透析，会接触大量透析液。透析水的质量直接关系到患者的健康，若受到微生物污染，细菌及其代谢产物如内毒素等，可能通过透析膜进入患者血液，引发炎症反应、发热等症状，长期还可能影响患者的生存质量和预后。传统的异养平板计数法（HPC）是目前监测透析水微生物质量的常用方法，但它存在明显缺陷，需长达 7 天的孵育时间，无法及时发现污染问题并采取措施。因此，寻找一种更快速、灵敏的监测方法迫在眉睫。
为解决这一问题，来自德国费森尤斯医疗护理德国有限公司（Fresenius Medical Care Deutschland GmbH）等多个机构的研究人员开展了一项研究，对比 HPC 和流式细胞术（FCM）在监测透析水微生物质量方面的差异。该研究成果发表在《Scientific Reports》上。
研究人员采用了多种技术方法。在样本采集方面，他们在葡萄牙一家拥有 35 个透析站的门诊血液透析诊所进行单中心研究，从透析水治疗系统的 4 个代表性采样点（SP1 - 预处理步骤结束后；SP2 - 初级治疗后；SP3 - 次级治疗后；SP4 - 分配系统回路返回处）每周采集样本，持续 36 周 。在检测方法上，HPC 检测依据 ISO 23500 - 3 标准，采用倾注平板技术，使用低营养琼脂（Reasoner’s Agar No. 2 - R2A），样本在 17 - 23°C 孵育 168 小时，结果以菌落形成单位（CFU/mL）表示；FCM 则使用 AQU@Sense MB 细胞仪在离线模式下检测，通过微流控样本制备实现自动化采样和 DNA 染色（使用 PI 和 SYBR Green I），能区分完整 / 活细胞（以 ICC/mL 表示）、高核酸（HNA）细胞和低核酸（LNA）细胞；内毒素检测采用动力学显色鲎试验（Kinetic chromogenic LAL test） 。数据处理上，运用描述性分析、Mann - Whitney 检验、散点图和广义线性估计（GLM）模型进行统计分析。
研究结果如下：
- 预试验结果：对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、粪肠球菌（Enterococcus faecalis）等多种参考微生物进行检测，发现 HPC 和 FCM 评估微生物负荷的结果存在差异。例如，枯草芽孢杆菌的 FCM 检测结果（310 ICC/mL）远高于 HPC（76 CFU/mL）。
- 不同采样点微生物检测结果：在所有采样点，FCM 和 HPC 的微生物检测结果均有显著差异。以 SP2 为例，FCM 检测的平均细胞浓度为 10.00 ICC/mL，HPC 仅为 1.97 CFU/mL，FCM 的检测灵敏度更高。整体来看，在透析水采样点（SP2、SP3 和 SP4），FCM 检测到的细胞数量比 HPC 高 4.36 倍 。
- 内毒素检测结果：各采样点的内毒素浓度平均值均低于国际标准设定的典型行动水平（<0.125 EU/mL） 。
- HNA 细胞比例分析：不同采样点均存在 HNA 和 LNA 细胞，且比例存在差异。如 SP4 的 HNA 细胞比例（平均 92.4%）相对其他上游采样点更高，可能暗示该环境营养物质更丰富。
研究结论和讨论部分表明，FCM 在透析水微生物监测方面具有显著优势。它比传统 HPC 方法更快，仅需约 30 分钟就能得出结果，可及时发现污染并采取纠正措施，极大地降低了患者的感染风险。同时，FCM 灵敏度更高，能检测到更多微生物，这对建立新的透析水微生物质量标准意义重大。然而，FCM 目前尚未成为行业标准参考方法，其推广面临一些挑战。如设备初始投资成本高，对于单个透析中心，从 HPC 转换为 FCM 进行常规监测在经济上缺乏吸引力。但通过区域设备共享（如诊所集群）、扩大样本检测范围（包括透析液监测）等方式，有望降低成本，提高 FCM 的实用性。此外，还需进一步研究确定 FCM 监测透析水时的最大允许水平和典型行动水平。总体而言，FCM 为透析水微生物监测提供了新的思路和方法，具有广阔的应用前景，后续研究应致力于解决其应用中的问题，推动其在临床实践中的广泛应用。
