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膝骨关节炎（KOA）疼痛治疗手段有限，为探究富血小板血浆（PRP）对 KOA 疼痛的作用及机制，研究人员用 KOA 大鼠模型和 RAW 264.7 细胞开展研究。结果显示 PRP 可缓解疼痛，机制是抑制 NF-κB 通路，促进 M1 巨噬细胞向 M2 转化。该研究为 PRP 治疗 KOA 提供理论依据。
膝骨关节炎（Knee osteoarthritis，KOA）是一种常见的慢性退行性疾病，在老年人中尤为普遍，是全球范围内导致疼痛和残疾的主要原因之一。患者常常遭受关节疼痛、僵硬以及功能丧失的困扰，严重影响生活质量。目前，KOA 的治疗主要以缓解疼痛为目标，然而现有的治疗手段却存在诸多问题。口服药物虽为常用选择，但长期服用会产生较大副作用且效果不佳；关节置换手术适用于晚期患者，却伴随着感染、功能不满意等并发症风险。因此，寻找安全有效的 KOA 疼痛治疗方法迫在眉睫。
在这样的背景下，青岛大学附属医院等机构的研究人员开展了一项关于富血小板血浆（Platelet-rich plasma，PRP）对 KOA 疼痛作用的研究。他们发现 PRP 或许能成为缓解 KOA 疼痛的新希望，相关研究成果发表在《Scientific Reports》上。
为了深入探究 PRP 在 KOA 疼痛治疗中的奥秘，研究人员采用了多种关键技术方法。首先，通过对实验动物的处理建立 KOA 大鼠模型，将 44 只雄性 Sprague–Dawley（SD）大鼠随机分为假手术组（Sham）、KOA 模型组（MIA）和 PRP 治疗组。然后运用行为学测试评估疼痛程度，包括双足平衡测试（测量负重不对称）、热板实验（检测热痛觉过敏）和 Von Frey 毛发测试（评估机械性异常疼痛）。同时，借助免疫组化技术检测滑膜中诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS，M1 巨噬细胞标记物）和 CD163（M2 巨噬细胞标记物）的阳性表达率；利用 Western blotting 技术测定相关蛋白表达水平；采用酶联免疫吸附测定（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测细胞因子的释放情况。
研究结果如下：
- PRP 缓解 KOA 相关疼痛：实验开始前，各组大鼠的疼痛行为无显著差异。但在造模后，MIA 组大鼠患侧的负重百分比、机械性痛阈（paw withdrawal threshold，PWT）和热痛潜伏期（paw withdrawal latency，PWL）明显低于 Sham 组。而在给予 PRP 治疗后的 21 天内，PRP 组大鼠患侧的这些指标均显著优于 MIA 组，表明 PRP 能有效缓解 KOA 大鼠的疼痛症状。
- PRP 对滑膜巨噬细胞 M1/M2 比例的影响：免疫组化染色结果显示，与 Sham 组相比，MIA 组在治疗后第 5 天和第 21 天，iNOS 阳性细胞比例显著增加，而 CD163 阳性细胞比例无明显差异。PRP 组则与 MIA 组相反，iNOS 阳性细胞比例显著降低，CD163 阳性细胞比例显著升高，这意味着 PRP 能够调节滑膜巨噬细胞的极化，使 M1/M2 巨噬细胞比例降低。
- PRP 对 M1/M2 滑膜巨噬细胞分泌细胞因子的影响：ELISA 检测结果表明，MIA 组滑膜中肿瘤坏死因子 -α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白细胞介素 - 1β（interleukin-1β，IL-1β）的表达水平显著高于 Sham 组，而白细胞介素 - 10（interleukin-10，IL-10）的表达水平显著低于 Sham 组。PRP 组则呈现出相反的趋势，TNF-α 和 IL-1β 表达水平显著降低，IL-10 表达水平显著升高，说明 PRP 可抑制促炎细胞因子的分泌，促进抗炎细胞因子的释放。
- PRP 抑制 RAW264.7 巨噬细胞向 M1 表型极化：Western blotting 检测结果显示，与对照组相比，脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）处理组的 iNOS 表达水平显著升高，CD163 表达水平显著降低，表明巨噬细胞向 M1 表型转化。而 PRP 处理组的 iNOS 表达水平明显低于 LPS 组，CD163 表达水平明显高于 LPS 组。此外，使用 NF-κB 抑制剂 BAY11 -7082 处理后，iNOS 表达水平进一步降低，CD163 表达水平进一步升高，且效果比 PRP 组更明显，证实 PRP 可抑制巨噬细胞向 M1 表型极化，且该过程与 NF-κB 信号通路有关。
- PRP 对巨噬细胞 NF-κB 信号通路的影响：Western blotting 检测发现，LPS 刺激可使 NF-κB 信号通路中 p-NF-κB p65 和 p-IκBα 的水平显著升高，而 PRP 处理后，这些蛋白的磷酸化水平显著降低。加入 NF-κB 抑制剂 BAY11 -7082 后，p-NF-κB p65 和 p-IκBα 的水平进一步降低，且效果比 PRP 组更显著，说明 PRP 能够抑制 NF-κB 信号通路的激活。
- PRP 对体外巨噬细胞分泌细胞因子的影响：ELISA 检测结果显示，与对照组相比，LPS 组培养的巨噬细胞上清液中 TNF-α、IL-1β 和神经生长因子（nerve growth factor，NGF）的表达水平显著升高，IL-10 表达水平显著降低。PRP 组则相反，这些促炎细胞因子和 NGF 的表达水平显著降低，IL-10 表达水平显著升高。BAY11 -7082 组的结果与 PRP 组一致，进一步表明 PRP 可调节巨噬细胞分泌细胞因子，抑制炎症反应。
综合研究结果与讨论，该研究表明 PRP 治疗 KOA 患者可长期缓解炎症和疼痛。其镇痛机制主要是通过抑制 NF-κB 信号通路，促使 M1 表型巨噬细胞向 M2 表型转化，从而降低促炎细胞因子 TNF-α 和 IL-1β 的表达，增加抗炎细胞因子 IL-10 的水平。同时，PRP 还能直接减少伤害感受器的刺激，降低其敏感性，并通过间接降低 NGF 含量减轻痛觉过敏，实现持久的镇痛效果。
这项研究意义重大，它揭示了 PRP 缓解 KOA 疼痛的新机制，将研究焦点从软骨细胞转移到巨噬细胞，为 PRP 在 KOA 疼痛治疗中的应用提供了坚实的理论基础，也为后续开发更有效的 KOA 治疗策略提供了新的思路和方向。不过，该研究也存在一些局限性，如未充分考虑滑膜巨噬细胞的复杂性、未检测体内滑膜巨噬细胞分泌 NGF 的变化以及未深入探究 PRP 对 NF-κB 信号通路的具体抑制作用等，这些都为未来的研究指明了方向。
