中国发现混合耳念珠菌菌株感染：遗传与生物学特性解析及临床意义

《Infection》：Emergence and characterization of mixed Candida auris strain infections in China

为探究中国耳念珠菌（Candida auris）混合菌株定植或感染情况，研究人员对 5 例相关病例进行研究。通过多种实验分析，发现混合菌株在遗传和生物学方面存在差异，这对该菌感染的诊断和治疗提出挑战，为防控提供重要依据。

　　近年来，一种名为耳念珠菌（Candida auris）的真菌在全球范围内引发了广泛关注，它就像隐藏在医院里的 “超级病菌”，给人类健康带来了巨大威胁。自 2009 年在日本首次被发现后，耳念珠菌迅速在超过 50 个国家蔓延 。它不仅具有高传播性，还能在医疗环境中长时间存活，更棘手的是，它对多种抗真菌药物耐药，这使得治疗相关感染变得极为困难。世界卫生组织（WHO）在 2022 年已将其列为关键真菌病原体。

在这种严峻的形势下，为了更好地了解耳念珠菌感染的复杂性，来自同济大学附属上海市肺科医院、复旦大学等机构的研究人员开展了一项重要研究。他们的研究成果发表在《Infection》杂志上，为我们深入认识耳念珠菌混合菌株感染提供了关键信息。

研究人员主要运用了以下几种关键技术方法：首先是全基因组测序（Whole genome sequencing，WGS），通过对菌株基因组进行测序，分析其遗传信息，探究不同菌株之间的遗传差异；其次是系统发育分析，构建系统发育树，研究菌株之间的亲缘关系；此外，还进行了多种生物学特性分析实验，如定量生物膜检测、最小抑菌浓度（Minimum inhibitory concentration，MIC）检测、分泌天冬氨酰蛋白酶（Secreted aspartyl proteinase，SAP）活性检测等，从多个角度研究菌株的生物学特性。

下面来看具体的研究结果：

• 混合耳念珠菌菌株定植或感染的鉴定：研究人员从中国广东的医院收集了耳念珠菌菌株样本，通过在含有玫瑰红 B 的 YPD 琼脂平板上培养，发现 5 例病例的菌株呈现出两种或更多不同的菌落形态。经过对 28S rDNA 的 D1/D2 和 18S 内部转录间隔区（ITS）区域测序鉴定，确定了不同菌株所属的基因分支。其中，病例 1、2 中的菌株属于分支 III，病例 5 中的菌株属于分支 I，病例 3、4 中的菌株分别来自分支 I 和 III，且病例 3 还存在近平滑念珠菌的共定植12。
• 混合定植或感染的耳念珠菌菌株的比较基因组分析：对菌株进行全基因组测序分析发现，同一病例中来自相同基因分支的菌株（如病例 1、2、5）单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphism，SNP）差异较小，可能是菌株在患者体内发生微进化或来源于不同外部源；而来自不同基因分支的菌株（如病例 3、4）SNP 差异超过 46,000 个，反映出较大的遗传差异。系统发育分析表明，同一基因分支的菌株在进化树上聚类较近，且中国分离的部分菌株可能存在本地传播现象345。
• 混合定植或感染的耳念珠菌菌株的比较生物学分析：在抗真菌药敏分析中，除病例 5 的菌株外，其他菌株对氟康唑的 MIC 均为 128mg/L ，部分分支 I 菌株对两性霉素 B 的 MIC 为 2mg/L，分支 III 菌株为 1mg/L，对其他 7 种抗真菌药物，所有菌株 MIC 相对较低，且根据美国疾病控制与预防中心（CDC）暂定的抗真菌临界值，所有菌株对氟康唑耐药，部分分支 I 菌株对两性霉素 B 耐药。生物膜形成实验显示，白色菌株比红色菌株生物膜形成能力更强，分支 III 菌株比分支 I 菌株生物膜形成能力更高。SAP 活性检测发现，不同菌株在不同温度下的 SAP 活性不同，多数菌株的 SAP 活性随温度升高而增强，表明菌株毒力存在差异。体外生存实验表明，白色菌株在体外的存活率普遍高于红色菌株，部分菌株对人类抗菌肽 LL - 37 的耐受性更强。在小鼠感染模型实验中，白色菌株在小鼠脑部的真菌负荷显著高于红色菌株678。

研究结论和讨论部分指出，此次研究发现了中国耳念珠菌混合菌株定植或感染的情况，这些混合感染菌株在遗传和生物学特性上存在显著差异。这种差异可能导致临床诊断和治疗面临新的挑战，因为不同遗传背景的菌株在宿主定植和环境生存能力上有所不同。例如，某些菌株增强的 SAP 分泌可能有助于皮肤定植，进而影响感染的发生和发展。此外，还不确定基因多样性菌株的共存是否会影响医院内的传播动态，这需要进一步研究。总体而言，该研究揭示了耳念珠菌混合感染的复杂性，为临床防控和治疗提供了重要参考，也为后续深入研究耳念珠菌感染机制和传播规律奠定了基础。