METTL3缺失通过建立内源性抗病毒状态抑制胰腺癌细胞中水疱性口炎病毒的复制

本研究揭示了METTL3（甲基转移酶样蛋白3）在胰腺导管腺癌（PDAC）细胞中对水疱性口炎病毒（VSV）复制的调控机制。作者发现METTL3缺失通过RIG-I依赖性途径诱导细胞建立内源性抗病毒状态，VSV-ΔM51的复制，这一过程涉及III型干扰素（IFN-λ）分泌及STAT1/IRF7/IRF9信号通路的激活。该研究为优化溶瘤病毒（OV）疗法提供了新靶点，同时揭示了m6A修饰与抗病毒免疫的复杂互作关系。

　　

METTL3缺失通过建立内源性抗病毒状态抑制胰腺癌细胞中水疱性口炎病毒的复制

研究背景
胰腺导管腺癌（PDAC）作为最具侵袭性的恶性肿瘤之一，治疗选择极为有限。溶瘤病毒（OV）疗法因其特异性靶向肿瘤细胞的特性备受关注，其中水疱性口炎病毒（VSV）因其天然溶瘤特性成为研究热点。N⁶-甲基腺苷（m⁶A）RNA修饰酶METTL3在PDAC中高表达并促进肿瘤进展，但其在VSV复制中的作用尚不明确。

实验设计与主要发现
研究团队通过siRNA敲降和抑制剂STM2457处理10种PDAC细胞系，发现METTL3缺失对VSV-ΔM51复制的影响呈现双模式：在具有功能性先天免疫信号（如SUIT-2）的细胞中显著抑制病毒复制，而在信号缺陷型细胞（如MIA PaCa-2）中无影响。Western blot显示敲降METTL3可上调STAT1磷酸化（Y701）及抗病毒效应蛋白MX1，且该过程不依赖病毒感染。

机制解析
RNA-seq分析揭示METTL3缺失触发RIG-I（DDX58）依赖性抗病毒状态，伴随III型干扰素（IFN-λ1/2）分泌和ISGs（MX1/OAS1/IFIT1等）的组成型高表达。值得注意的是，该过程独立于cGAS通路，且JAK1/2抑制剂鲁索替尼可部分逆转抗病毒表型。条件培养基实验证实分泌因子（特别是IFN-λ）在抑制病毒复制中的关键作用。

临床意义与创新性
该研究首次揭示METTL3通过调控内源性抗病毒状态影响OV疗效的双重机制：在免疫正常微环境中，METTL3抑制可能削弱OV疗效；而在免疫缺陷型肿瘤中则保持OV活性。这为PDAC的精准OV治疗提供了分子分型依据，并为METTL3抑制剂（如STC-15）与OV的联合用药策略提出重要警示。

技术亮点
研究采用多组学方法：

1. 病毒学（VSV-ΔM51/VSV-Mwt-P1比较）
2. 信号通路（STAT1/JAK-RIG-I轴）
3. 表观转录组（m⁶A修饰与ISGs表达谱）
4. 细胞模型（10种PDAC细胞系的异质性分析）

讨论与展望
研究提出了"METTL3-RIG-I-IFN-λ"轴作为PDAC微环境免疫调控的新范式，但METTL3缺失导致RNA:DNA杂交体（R-loops）积累的潜在贡献仍需深入探讨。未来研究可聚焦：

1. 患者来源类器官模型验证
2. METTL3空间表达与OV疗效的临床相关性
3. 开发针对免疫缺陷型PDAC的m⁶A调控OV

该工作为理解肿瘤表观遗传调控与抗病毒免疫的交叉对话提供了重要范例，其发现可能拓展至其他RNA病毒疗法领域。