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为解决中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)养殖面临的性早熟、生长缓慢等问题,研究人员开展了中华绒螯蟹 TGF-β 超家族基因的研究。他们鉴定出 9 个该家族基因,发现其在胚胎发育、肢体再生等过程中表达各异。该研究为探究蟹类生长、发育及环境适应机制提供了依据。
在水产养殖的广阔天地里,中华绒螯蟹凭借独特风味和高营养价值,成为备受追捧的 “明星”,其 2022 年养殖产量高达 815,318 吨。然而,如同前行路上布满荆棘,中华绒螯蟹养殖面临着诸多棘手难题。性早熟现象打乱了它们正常的生长节奏,致使生长速度放缓、存活率降低,疾病也趁虚而入,严重阻碍了产业发展。为破解这些困境,探寻其生长、性别分化及环境适应的遗传调控机制迫在眉睫。
在此背景下,闽江大学的研究人员挺身而出,开启了对中华绒螯蟹 TGF-β(Transforming growth factor-β,转化生长因子 -β)超家族基因的深入研究。TGF-β 超家族作为一类多功能细胞因子,广泛参与细胞增殖、分化、凋亡等重要生命活动,在众多生物进程中扮演关键角色。但此前,针对蟹类 TGF-β 超家族的研究仅局限于个别基因,缺乏系统性。此次研究成果发表于《Scientific Reports》,为揭开蟹类生命奥秘带来新曙光。
研究人员运用了多种关键技术方法。首先,从 NCBI 数据库下载中华绒螯蟹基因组及注释文件,借助 BLAST 和 HMM 程序,搜索 TGF-β 超家族候选基因,再利用 TBtools 软件确认保守结构域,预测蛋白质理化性质。其次,构建系统发育树,分析基因进化关系。此外,通过提取 NCBI SRA 数据库的转录组数据,研究基因在不同发育阶段、组织及应激条件下的表达情况,还用 RT-qPCR(逆转录 - 定量聚合酶链式反应)对部分基因表达结果进行验证。
研究结果如下:
- TGF-β 超家族基因的鉴定与特征:成功鉴定出 9 个 TGF-β 超家族基因,包括 EsBMP2、EsBMP3 等。这些基因编码的蛋白质氨基酸数量在 338 - 510 之间,理化性质各有差异,多数蛋白质不稳定指数超 40,均为亲水性。
- 系统发育分析:构建的系统发育树显示,中华绒螯蟹与其他蟹类、虾类基因聚类,且氨基酸序列高度保守。
- 保守基序和基因结构:共鉴定出 20 个保守基序,不同基因基序数量差异大,同一亚家族基因基序相似。基因编码序列(CDS)数量也不同,EsBMP10 和 EsBMP15 有 6 个 CDS,部分基因有 5 个,其他则含 2 - 4 个。
- 时空表达谱:在胚胎发育阶段,EsBMP2 在卵裂期(4 d)高表达,EsBMP7 从囊胚期(12 d)到心跳期(34 d)持续表达。在不同组织中,EsBMP2、EsBMP7 和 EsBMP10 在鳃中高表达,在肝胰腺中低表达。
- 肢体再生和蜕皮阶段的表达谱:肢体再生时,肌肉中 EsBMP2 在 15 d 表达最高,EsBMP7 在对照组表达高于再生期;眼柄中 EsBMP7 在对照组和再生组(15 d)表达无差异。蜕皮过程中,鳃中 EsBMP2、EsBMP7 和 EsBMP10 在不同蜕皮阶段高表达且有波动。
- 不同非生物胁迫下的表达谱:在纳米塑料(Np)、镉(Cd)暴露等胁迫下,鳃中 EsBMP2、EsBMP7 和 EsBMP10 表达变化显著;空气暴露和高盐胁迫时,这些基因在鳃或血细胞中的表达也有明显改变。
研究结论和讨论部分指出,中华绒螯蟹 TGF-β 超家族基因数量与其他无脊椎动物相近,低于脊椎动物。EsBMP2 和 EsBMP7 可能是控制胚胎早期发育的关键基因,它们在肢体再生、蜕皮和环境应激响应中发挥重要作用。这一研究成果为深入理解中华绒螯蟹生长、发育和环境适应机制提供了重要依据,有助于推动蟹类养殖产业的可持续发展,为解决实际生产问题带来新的思路和方向。