印度首次报道：犬钩虫 β- 微管蛋白基因 F200Y 多态性与苯并咪唑耐药性的分子检测及其意义

为检测印度喀拉拉邦特里苏尔地区犬钩虫（Ancylostoma caninum）对苯并咪唑（BZ）的耐药性，研究人员利用扩增阻滞突变系统聚合酶链反应（ARMS-PCR）开展研究。结果发现犬钩虫幼虫 BZ 耐药等位基因频率较低，这是印度首次相关报道，对防控耐药性传播意义重大。

　　本研究旨在利用扩增阻滞突变系统聚合酶链反应（ARMS-PCR）检测印度喀拉拉邦特里苏尔地区犬钩虫（Ancylostoma caninum）对苯并咪唑（BZ）的耐药性。主要目的是确定与 BZ 耐药相关的 1 型 β- 微管蛋白（β-tubulin）基因第 200 密码子的突变情况及频率，研究对象为成虫和感染性幼虫（L3）。研究人员从不同地点收集了 75 条犬钩虫成虫（在尸检时采集），并从 35 份粪便样本（样本中含圆线虫卵呈阳性）中获得 280 条感染性幼虫。通过 ARMS-PCR 扩增 1 型 β- 微管蛋白基因的第 200 密码子，之后采用桑格测序（Sanger sequencing）确认单核苷酸多态性（SNPs），利用 EMBOSS 和美国国立生物技术信息中心基本局部比对搜索工具（NCBI BLAST）分析基因型。结果显示，75 条成虫在第 200 密码子处均表现为纯合敏感基因型。在 280 条进行基因分型的幼虫中，2 条为纯合耐药型，1 条为杂合型，277 条为纯合敏感型。耐药（TAC）和敏感（TTC）等位基因的总体频率分别为 0.01 和 0.99。纯合和杂合耐药幼虫均出现在一户反复出现钩虫病的家庭中，第 198 密码子未观察到突变。本研究发现喀拉拉邦特里苏尔地区犬钩虫幼虫中 BZ 耐药等位基因频率较低，这是印度首次相关报道。虽然耐药仍处于早期阶段，但持续监测对于减缓其在犬类群体中的传播至关重要。