非病毒基因递送新突破：bZIP结构域增强TFAMoplex转染效率，媲美AAV病毒载体

本文创新性地将bZIP结构域整合入TFAMoplex非病毒基因递送系统，通过增强DNA结合与细胞膜相互作用，使转染效率提升2倍以上。研究首次在血清环境中实现与腺相关病毒（AAV）对比，发现TFAMoplex虽转染细胞比例略低，但单细胞转基因表达量显著超越AAV，为基因治疗提供了更安全高效的非病毒替代方案。

　　非病毒基因递送系统的优化突破
本研究聚焦于改进基于线粒体转录因子A（TFAM）的纳米颗粒基因递送系统——TFAMoplex。通过引入碱性亮氨酸拉链（bZIP）结构域，显著提升了该系统的转染效率。其中BACH1蛋白的bZIP结构域表现尤为突出，使半数有效浓度（EC₅₀）降低超过2倍。

bZIP结构域的增效机制
研究团队系统筛选了CREB、BACH1、ATF-3和BATF等多种bZIP结构域。意外发现，即使丧失二聚化能力的CREB-E319K突变体仍能显著增强转染，提示二聚化非必需。共聚焦显微镜观察显示，bZIP结构域可独立促进细胞膜结合，荧光标记实验证实bZIP-TFAMoplex的细胞结合量比标准版提高30%。

与病毒载体的正面较量
在100%血清条件下，优化后的bZIP_BACH1-TFAMoplex与AAV2进行直接对比：虽然AAV的转染细胞比例更高（72.7% vs 48.4%），但TFAMoplex的单细胞平均荧光强度（MFI）超出4.4倍。值得注意的是，AAV在纯血清中的EC₅₀值（25,469 GC/细胞）比10%血清时恶化3.6倍，而TFAMoplex在血清中保持稳定。

技术优势与应用前景
TFAMoplex展现出多项独特优势：仅需30分钟孵育时间（常规载体需4-48小时）、在200 ng/mL超低DNA浓度下有效转染。其核心组件TFAM可自然压缩DNA成100 nm颗粒，配合李斯特菌磷脂酶C（PLC）促进内体逃逸，人痘苗相关激酶1（VRK1）则可能通过调控自整合因子提升核递送效率。这些特性使其成为基因治疗领域极具潜力的非病毒替代方案。