亚洲牛结节性皮肤病病毒自然感染的临床与分子特征：印度尼西亚的首次疫情研究

《Scientific Reports》：Clinical and molecular description of natural infections with an Asian strain of lumpy skin disease virus in Bos indicus

为了解亚洲株牛结节性皮肤病病毒（LSDV）感染印度牛（Bos indicus）的临床特征，研究人员对印度尼西亚日惹首次疫情中的 11 头牛进行观察。结果发现不同临床症状的出现情况及相关性，病毒属 Clade 2。该研究为疫苗、临床治疗和预后研究提供依据。

　　牛结节性皮肤病（Lumpy skin disease，LSD）是严重影响养牛业的病毒性疾病，自 1929 年在赞比亚牛群中首次发现后，逐渐从非洲蔓延到中东、亚洲等地。LSD 病毒（LSDV）分为两个进化枝，不同进化枝病毒以及宿主品种、年龄等因素都会影响感染的临床结果。此前，关于亚洲株 LSDV 感染印度牛（Bos indicus）的临床感染进展情况缺乏研究，在印度尼西亚，2022 年牛群中出现 LSD 疫情，且检测到 Clade 2 毒株，为了填补相关知识空白，来自印度尼西亚布拉维贾亚大学（Universitas Brawijaya）、美国康奈尔大学（Cornell University）、澳大利亚阿德莱德大学（The University of Adelaide）等机构的研究人员开展了此项研究，相关成果发表在《Scientific Reports》上。
研究人员采用了多种关键技术方法。首先是样本采集，选取印度尼西亚日惹库隆普罗戈地区的 11 头印度牛，这些牛来自 5 个小农户农场，年龄在 7 个月至 6 岁之间。从农场主报告牛出现可疑皮肤肿块之日起，每隔 4 天采集血清样本，并记录直肠温度、跛行、厌食、肢体水肿和肿块病变等情况。其次，利用 ELISA 检测血清转化，当 S/P 比值≥30 时判定为血清转化。再者，通过 DNA 提取和实时 PCR（RT-PCR）检测循环血液中的病毒 DNA，以 CT 值≤40 为病毒 DNA 阳性检测阈值。最后，对 RT-PCR 检测阳性的样本进行常规 PCR 和测序，并构建系统发育树分析病毒的进化关系。
研究结果如下：

• 临床特征：所有牛在研究第 1 天和第 4 天皮肤均出现新肿块，到第 8 天肿块开始消退、坏死；11 头牛中有 9 头出现跛行，多在肿块出现后发生，且年轻牛跛行持续时间比老牛长；6 头牛出现肢体水肿，主要出现在膝关节、跗关节和球关节；6 头牛出现厌食症状；5 头牛出现发热，体温在第 4 天达到峰值 39.8°C。
• 循环血液中病毒 DNA 动态：8 头牛的血清中可检测到病毒 DNA，主要在第 1 天、第 4 天和第 16 天检测到，且年轻牛更容易检测到。
• 血清转化：所有牛在第 8 天均发生血清转化，抗体水平在第 12 天达到较高水平，第 16 天虽迅速下降，但多数牛仍高于阈值。
• 相关性分析：肯德尔 tau-b 相关性分析表明，肿块数量和大小的增加与跛行呈强正相关，与血清转化呈强负相关；厌食与肢体水肿呈中度相关；血清中的病毒 DNA 与肿块进展呈中度正相关。
• 测序和系统发育分析：对 2 个样本进行测序，序列与 LSDV 相符，系统发育树显示库隆普罗戈分离株与 Clade 2 密切相关。
  研究结论和讨论部分指出，该研究首次描述了亚洲株 LSDV 感染印度牛的临床结果时间序列进展。与感染经典株 LSDV 的欧洲牛（Bos taurus）相比，感染库隆普罗戈分离株的印度牛临床和血清学结果相对较轻，表现为低热持续时间短、跛行短暂、病毒血症间歇性出现以及高抗体水平持续时间短。然而，年轻印度牛的跛行、厌食和水肿持续时间比老牛更长。此次研究结果为印度尼西亚进一步开展 LSD 疫苗研发、临床治疗和疾病预后研究提供了重要的基础数据。但研究存在一定局限性，如感染病程第 1 天的定义依赖农场主报告，可能导致感染持续时间记录不准确。整体而言，该研究对防控牛结节性皮肤病在印度尼西亚的传播具有重要意义，为后续相关研究和防控措施的制定提供了关键参考。