布比卡因（BUP）对 SH-SY5Y 细胞的毒性探秘：Akt 信号通路的关键作用

为评估布比卡因（BUP）对 SH-SY5Y 细胞的神经毒性及苏氨酸 - 丝氨酸蛋白激酶 B（Akt）信号在 BUP 诱导神经损伤中的作用，研究人员将细胞分组实验。结果显示 BUP 降低细胞活力、促进凋亡，或与抑制 Akt 蛋白活性有关，为神经毒性研究提供重要依据。

　　布比卡因（Bupivacaine，BUP）是一种常用的局部麻醉药，而 SH-SY5Y 细胞是一种人类神经母细胞瘤细胞系，常用于神经毒性和神经保护机制的研究。为了评估 BUP 对 SH-SY5Y 细胞的神经毒性作用，以及苏氨酸 - 丝氨酸蛋白激酶 B（Akt）信号在 BUP 诱导的神经损伤中的作用，研究人员将 SH-SY5Y 细胞分为三组：对照组（Control）、BUP 组和 BUP + SC79 组。采用 3 - (4,5 - 二甲基噻唑 - 2 - 基)-2,5 - 二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测细胞活力，利用二氢乙啶荧光探针法检测细胞内活性氧（ROS）水平，通过流式细胞术检测线粒体膜电位的变化，并用末端脱氧核苷酸转移酶 dUTP 缺口末端标记（TUNEL）染色评估 BUP 诱导的细胞凋亡情况。通过蛋白质免疫印迹法（Western blot，WB）分析 BUP 对 Bax、Bcl - 2、半胱天冬酶 - 3（Caspase - 3）、半胱天冬酶 - 9（Caspase - 9）、Akt 和磷酸化 Akt（p - Akt）的影响。与对照组相比，BUP 组和 BUP + SC79 组细胞活力显著降低，细胞凋亡显著增加，ROS 水平显著升高，JC - 1 聚合物 / 单体比值显著降低，Bax、Caspase - 3、Caspase - 9、Akt 和 p - Akt 的蛋白水平显著升高，Bcl - 2 蛋白水平显著降低（P ＜ 0.05）。然而，与 BUP 组相比，BUP + SC79 组细胞活力显著提高（P = 0.022），细胞凋亡率显著降低（P = 0.017），ROS 水平显著下降（P = 0.015），JC - 1 聚合物 / 单体比值显著升高（P = 0.024），Bax、Caspase - 3、Caspase - 9、Akt 和 p - Akt 的蛋白水平显著降低（P分别为 0.033、0.028、0.030、0.035 和 0.005），Bcl - 2 蛋白水平显著升高（P = 0.024）。这表明 BUP 可降低 SH-SY5Y 细胞的活力并促进细胞凋亡，这可能与其对 Akt 蛋白活性的抑制作用有关。