新型 LMAN2L 复合杂合突变致儿童早期难治性癫痫：开拓癫痫研究新视野

《Italian Journal of Pediatrics》：Novel compound heterozygous mutations in LMAN2L cause early childhood refractory epilepsy

为探究 LMAN2L 基因突变与癫痫的关系，山东大学齐鲁医院研究人员开展对携带 LMAN2L 基因突变家庭的研究。结果发现 2 个新的 LMAN2L 复合杂合变异，导致难治性癫痫。该研究首次将 LMAN2L 与癫痫性脑病及难治性癫痫表型关联，丰富了 LMAN2L 基因致病变异谱。

　　在医学研究的广阔领域中，癫痫一直是困扰着无数患者及其家庭的难题。癫痫发作不仅严重影响患者的生活质量，还可能对其大脑发育和认知功能造成长期损害。其中，儿童癫痫因其特殊的发病年龄和生理特点，更是备受关注。

在众多癫痫病例中，部分患者对抗癫痫药物反应不佳，形成难治性癫痫（DRE），这使得治疗变得极为棘手。而在寻找癫痫病因的过程中，基因变异成为了研究的重点方向之一。

此前研究发现，常染色体隐性智力障碍 - 52（MRT52）与 LMAN2L 基因变异有关，但关于 LMAN2L 基因变异与癫痫性脑病及难治性癫痫之间的联系，仍存在诸多未知。为了填补这些空白，山东大学齐鲁医院的研究人员开展了一项具有重要意义的研究。

研究人员对一个携带 LMAN2L 基因突变的家庭进行了深入研究。通过全外显子测序（WES）技术检测 LMAN2L 基因变异，并回顾性分析家庭成员的临床表现、脑电图（EEG）、神经影像学特征以及癫痫治疗情况。

研究结果显示：

• 患者基本情况：该家庭中两名儿童（病例 1 和病例 2）均在 2 个月大时出现严重智力障碍和药物难治性癫痫。病例 1 在运动、认知和语言等多方面发育迟缓，1 岁 3 个月时不能抬头，4 岁 11 个月时仍不能坐、爬、走，也不会叫 “爸爸、妈妈”，还存在肢体发育畸形、免疫力低等问题；病例 2 出生后因喂养困难住院，新生儿行为神经评估得分低，听力筛查未通过，1 岁 3 个月时同样不能抬头、追视和被逗笑，且存在脐疝 ，肌张力异常。
• 癫痫发作及脑电图特征：病例 1 癫痫发作形式多样，包括全身强直 - 阵挛发作、全身阵挛发作、肌阵挛发作等多种类型，脑电图显示多种异常放电；病例 2 主要表现为强直 - 阵挛发作，脑电图也呈现出异常婴儿脑电图特征，如间歇性爆发抑制、多灶性棘波等。
• 癫痫治疗效果：两名儿童的癫痫均难以控制。病例 1 先后使用多种抗癫痫药物，如左乙拉西坦、托吡酯、奥卡西平、丙戊酸等，但癫痫仍频繁发作，高热还会诱发癫痫持续状态，最终因多种并发症去世；病例 2 使用 “德巴金、开浦兰、托吡酯” 等药物后，癫痫控制效果不佳，5 个月时采用促肾上腺皮质激素（ACTH）治疗，虽短期内发作减少，但长期随访发现癫痫再次频繁发作。
• 基因检测及分析：在病例 1 和病例 2 中，LMAN2L 基因（NM_001142292.2）存在两个杂合的潜在致病变异，即 c.476A>G（p.D159G）和 c.1060_1061del（p.S354Pfs29）。c.476A>G（p.D159G）突变使氨基酸 159 由天冬氨酸变为甘氨酸，影响了蛋白质的氢键形成和糖结合亲和力；c.1060_1061del（p.S354Pfs29）突变则导致氨基酸 354 由丝氨酸变为脯氨酸，使蛋白质提前终止合成，形成截短蛋白，影响蛋白质正常功能。

研究结论和讨论部分指出，该研究首次将 LMAN2L 基因与癫痫性脑病和难治性癫痫的表型联系起来，表明 LMAN2L 基因的杂合 p.D159G、p.S354Pfs*29 变异很可能具有致病性。这两个新发现的致病变异丰富了 LMAN2L 基因的致病变异谱。同时，研究发现这两名儿童的癫痫表现比以往报道的病例更严重、更频繁且更难控制，提示 LMAN2L 基因的复合杂合突变可能导致更严重的癫痫。

此外，研究还探讨了潜在的替代治疗方法，如生酮饮食和类固醇治疗。虽然这两种方法存在一定风险，但对于本研究中的两名儿童可能具有潜在治疗效果，值得进一步研究和临床实践，以探索其在与 LMAN2L 基因相关的难治性癫痫治疗中的有效性和安全性。

该研究的重要意义在于，为癫痫的病因学研究提供了新的方向，加深了对 LMAN2L 基因在神经系统发育和癫痫发病机制中作用的理解，有望为癫痫的诊断和治疗带来新的突破，为患者及其家庭带来新的希望。

研究人员开展研究用到的主要关键技术方法：

1. 全外显子测序（WES）：对患者及其父母外周血提取 DNA 后，利用 Illumina Next Seq 500 测序仪进行测序，通过二代测序分析平台评估目标区域覆盖度和测序质量，确定可能的变异位点。
2. Sanger 测序：使用 ABI3730xl 测序仪对目标基因进行测序，验证全外显子测序结果。
3. 脑电图（EEG）检查：记录患者癫痫发作时的脑电活动，辅助判断癫痫发作类型和脑电异常情况。
4. 磁共振成像（MRI）：观察患者脑部结构，排除癫痫由结构性病因引起的可能性。