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膀胱癌（BC）诊断和监测面临难题，现有方法存在不足。研究人员开展了尿液 microRNA（miRNA）谱研究，识别出可诊断和分层 BC 患者的 7-miRNA 尿液谱，开发了 BladdermiRaCan 工具。该研究为 BC 诊断和治疗提供新方向，意义重大。
膀胱癌（Bladder Cancer，BC）作为全球范围内常见的恶性肿瘤，在成人所有恶性肿瘤中占比 3%，同时也是泌尿系统中最致命的癌症。不仅如此，其监测和治疗成本高昂，肌肉浸润性膀胱癌（Muscle-invasive Bladder Cancer，MIBC）每位患者的治疗费用高达 15 万美元。目前，膀胱癌的诊断和监测主要依靠膀胱超声、细胞学检查和膀胱镜检查，但这些方法存在明显缺陷，比如膀胱镜检查虽然是金标准之一，却具有高侵入性，给患者带来痛苦，而且部分检测手段的敏感性较低。正因如此，寻找可靠的非侵入性生物标志物迫在眉睫。
西班牙瓦伦西亚拉费大学和理工医院等机构的研究人员开展了一项极具意义的研究。他们致力于识别尿液中具有诊断和分层潜力的 microRNA（miRNA，一类非编码小分子 RNA，可调控基因表达）谱，以此避免当前侵入性、有害且昂贵的检测程序。最终，研究人员成功创建、验证并获得专利了一种包含 7 种尿液 miRNA（miR-221-3p、miR-93-5p、miR-362-3p、miR-191-5p、miR-200c-3p、miR-192-5p 和 miR-21-5p）的模型，该模型能够有效区分膀胱癌患者和健康人。此外，他们还确定了一些与膀胱癌复发、转移相关的潜在 miRNA 标志物，并开发了免费的在线工具 BladdermiRaCan，相关研究成果发表在《Experimental Hematology & Oncology》上。
研究人员采用了多种关键技术方法。在样本采集方面，前瞻性招募了 207 名膀胱癌患者和 109 名年龄、性别匹配的对照者，收集其晨尿样本。在检测分析阶段，运用实时逆转录定量 PCR 技术分析尿液上清液中 179 种 miRNA 的表达水平；通过序贯回归和序贯弹性网络逻辑回归模型筛选出关键 miRNA；利用 miR-eCLIP 免疫沉淀和测序实验确定 miRNA 的实际靶标。
研究结果主要如下：
- 筛选差异表达的 miRNA：在筛选阶段，对 35 名膀胱癌患者和 15 名对照者的尿液上清液进行检测，成功定量 157 种 miRNA。经单变量序贯回归分析，发现 70 种差异表达的 miRNA（FDR 校正后 p<0.05），其中最显著差异表达的有 miR30a-5p、miR-425-5p 等。
- 构建预测模型：通过序贯弹性网络逻辑回归模型，筛选出 7 种 miRNA 作为预测膀胱癌诊断和分期的指标。该模型综合考虑这 7 种 miRNA 的水平进行预测，在验证队列中能准确诊断和分期膀胱癌，预测值与观察值一致性较高。
- 组织样本验证：对 13 种差异表达的 miRNA 在组织样本中进行定量检测，发现部分 miRNA（如 miR-93-5p、miR-21-5p 等）在组织中的表达趋势与尿液中一致。
- 寻找潜在标志物：观察到 miR21-5p、miR-425-5p 和 miR-99-5p 在复发前样本中表达失调，miR-21-5p 和 miR-221-3p 在有转移的患者中高表达，部分 miRNA 在原位癌患者和乳头状癌患者中的表达也存在差异，这些可作为潜在的复发、转移和亚型标志物。
- 分析 miRNA 靶标：通过计算机预测和实验验证两种方式分析差异表达 miRNA 的靶标。计算机预测显示所有研究的 miRNA 都有与膀胱癌相关的验证靶标；miR-eCLIP 分析确定了 270 种 miRNA 与 1071 个不同 mRNA 靶标的结合情况，其中 CCND1 是 miR-93-5p 等的主要靶标。
研究结论表明，研究人员成功验证并专利化了一种 7-miRNA 尿液谱，可用于诊断和分层膀胱癌患者，BladdermiRaCan 工具也为全球应用该模型提供了便利。同时，实验验证的 miRNA 靶标可能为膀胱癌的治疗开辟新的靶点。在讨论部分，研究人员指出，虽然研究取得了重要进展，但仍存在一些局限性。比如部分 miRNA 在尿液和组织中的表达差异可能与 miRNA 释放速率及组织样本数量有关；研究未纳入血尿样本，未来需进一步研究模型在血尿样本中的诊断和分层能力；对照组未包含疑似膀胱癌患者，后续研究也应加以完善 。总体而言，该研究为膀胱癌的诊断和治疗提供了新的思路和方法，有望在临床实践中发挥重要作用，降低医疗成本，提高膀胱癌的管理水平。
