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为解决传统眼内肿瘤治疗副作用大、复发率高的问题，研究人员开展了以鱼精蛋白纳米胶囊（NCs）作为基因递送载体治疗眼内肿瘤的研究。结果显示，NCs 能有效结合核酸、低毒且可透过角膜屏障。这为眼内肿瘤治疗提供了新的潜在方案。
眼内肿瘤严重威胁着人们的视力与生命健康，就像隐藏在眼睛里的 “定时炸弹”。其中，葡萄膜黑色素瘤（UM）是成年人中最常见的原发性眼内肿瘤，主要出现在脉络膜、睫状体或虹膜 。目前，标准的非手术治疗方法是放疗和玻璃体内注射药物化疗，但这些方法存在令人不适的副作用和较高的复发率，治疗效果不尽人意。在这样的困境下，研究人员迫切需要寻找一种更有效的治疗策略，基因治疗应运而生。
来自西班牙圣地亚哥德孔波斯特拉大学（University of Santiago de Compostela）、奥维耶多大学（University of Oviedo）等机构的研究人员，针对眼内肿瘤的治疗难题展开了深入研究。他们致力于开发鱼精蛋白纳米胶囊作为潜在的基因递送载体，期望为眼内肿瘤的治疗带来新的突破。这项研究成果发表在《Drug Delivery and Translational Research》上，为该领域的发展提供了重要的参考。
研究人员在开展研究时，运用了多种关键技术方法。在纳米胶囊的制备上，采用溶剂置换技术来制备鱼精蛋白纳米胶囊；通过光子相关光谱（PCS）、激光多普勒测速仪（LDA）和扫描透射电子显微镜（STEM）等手段对纳米胶囊进行形态和理化特性表征；利用琼脂糖凝胶电泳研究核酸的结合与释放；借助细胞培养技术，在二维的 UM 细胞系和三维的重建人角膜上皮（RhCE）模型上进行细胞毒性、细胞摄取、转染以及上皮屏障完整性和通透性等实验研究 。
下面来详细看看研究结果：
- 鱼精蛋白纳米胶囊的理化特性：研究人员通过溶剂置换法制备出鱼精蛋白纳米胶囊，该胶囊由均匀的空白颗粒组成，粒径小于 250nm，多分散指数（PDI）低，表面带正电 。加入核酸后，纳米胶囊粒径略有增加，表面电荷变为负电，且 STEM 图像显示其仍为球形颗粒，结构稳定。
- 核酸的结合与释放：通过琼脂糖凝胶电泳分析发现，鱼精蛋白纳米胶囊能有效结合核酸，在模拟泪液（SLF）中，较低的质粒 DNA（pDNA）负载量（1% （w/w））结合更有效且稳定，同时该纳米胶囊具有在生物介质中持续释放核酸的能力。此外，与其他核酸（如 miRNA）结合时效率更高。
- 纳米胶囊的稳定性：在 4°C 储存一个月后，空白和负载核酸的鱼精蛋白纳米胶囊均能保持其理化特性。在细胞培养基和模拟泪液中，虽然在稀释时会出现一些变化，但总体稳定性良好，在模拟泪液中至少 30min 内保持稳定，满足与角膜上皮相互作用的理论时间要求。
- 细胞毒性研究：在 UM 癌细胞中进行的代谢实验表明，鱼精蛋白纳米胶囊在 24h 和 48h 的孵育后不影响细胞活力，具有良好的生物相容性，其细胞毒性特征与其他用于眼部给药的聚合物纳米系统相似。
- 细胞摄取与转染研究：用 5 - 羧基四甲基罗丹明（5 - TAMRA）标记的纳米胶囊研究发现，其能有效内化进入 UM 细胞，通过共聚焦显微镜和流式细胞术检测发现，约 36% 的 UM 细胞呈阳性。在转染实验中，负载 pDNA 的纳米胶囊能使 UM 细胞表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP），证明其具有转染能力，但转染效率有待进一步优化。
- 3D 角膜模型的屏障完整性和通透性：在 3D 角膜模型上进行的实验显示，鱼精蛋白纳米胶囊处理后，角膜上皮的跨上皮电阻（TEER）值在 30min 处理后与阴性对照相当，4h 后虽有所下降但仍高于 750Ω?cm2，表明上皮完整性得以保留。同时，通过荧光测量发现纳米胶囊能透过角膜模型，且不会对上皮屏障造成永久性损伤。
综合上述研究结果，研究人员得出结论：优化后的鱼精蛋白纳米胶囊作为一种储库型聚合物纳米系统，在不同生物相关介质中具有令人满意的短期和长期稳定性，能够高效内化进入细胞，并且在不引起分层人角膜模型永久性改变的情况下实现透化作用 。该纳米胶囊与不同核酸的结合，为眼内肿瘤的基因治疗提供了一种有前景的替代方案，有望成为通过眼黏膜进行基因递送的潜在候选者。然而，虽然研究取得了重要进展，但仍需要进一步实验来优化纳米胶囊的转染能力，为其临床前开发奠定更坚实的基础。这项研究为眼内肿瘤的治疗开辟了新的方向，为未来攻克这一难题带来了新的希望，推动了眼部肿瘤治疗领域的发展，具有重要的科学意义和临床应用价值。
