KRASG12V型结直肠癌新发现：AQP9 与 ZHX2 的关键作用及潜在治疗靶点探索

为解决 KRASG12V突变的结直肠癌（CRC）缺乏有效靶向治疗的问题，研究人员开展了关于 KRASG12V CRC 相关分子机制的研究。结果发现 AQP9 在其中表达下调，且与 ZHX2 存在关联，影响细胞增殖和凋亡。这为开发新疗法提供了理论依据。

　　在癌症的庞大版图中，结直肠癌（Colorectal Cancer，CRC）无疑是一个 “狠角色”，它在全球范围内的发病率和死亡率都居高不下，并且每年都呈上升趋势。KRAS 基因的突变，更是给结直肠癌的治疗带来了巨大挑战。目前，除了少数携带 KRAS^G12C突变的患者能从特定的小分子靶向药物中获益外，其他 KRAS 突变类型的患者仍缺乏有效的靶向治疗手段。而 KRAS^G12V突变在结直肠癌中较为常见，却一直没有针对性的药物，这让无数患者在抗癌之路上艰难前行。为了给这些患者带来新的希望，江南大学附属医院等机构的研究人员勇敢地踏上了探索之旅，他们深入研究 KRAS^G12V CRC 的奥秘，相关成果发表在《Scientific Reports》上。

研究人员为了揭开 KRAS^G12V CRC 的神秘面纱，采用了多种关键技术方法。他们收集了 377 例石蜡包埋的结直肠癌组织标本，这些标本就像是一个个 “密码箱”，蕴含着疾病的秘密。同时，借助生物信息学分析，从海量的数据中筛选关键信息；运用免疫组化、Western blot 等技术，检测蛋白表达水平；利用 CRISPR-U^m介导的基因工程构建细胞模型，一步步深入探索疾病机制。

研究结果如下：

• KRAS^G12V结直肠癌患者的临床病理特征：在 377 例 CRC 患者中，KRAS^G12V组有 37 例。研究发现，KRAS^G12V组与肿瘤最大直径、淋巴结转移、EGFR 表达和肿瘤位置显著相关。这意味着携带 KRAS^G12V突变的患者，肿瘤往往更大，更容易发生淋巴结转移，且多位于右侧结肠，EGFR 表达水平较低。
• 生物信息学分析确定水通道蛋白 9（AQP9）是与 KRAS^G12V CRC 相关的关键蛋白：通过对两个数据集的基因表达谱分析，发现 KRAS^G12V组多个基因显著下调。进一步分析确定 AQP9 为关键蛋白，它与许多下调蛋白相互作用，且在 KRAS^G12V CRC 中的表达明显低于其他组。
• AQP9 表达与 CRC 功能相关，在 KRAS^G12V CRC 组织和细胞中表达较低：免疫组化和 Western blot 实验表明，KRAS^G12V CRC 组织中 AQP9 表达显著降低。构建的 KRAS^G12V CRC 细胞系显示，其细胞增殖增加、凋亡减少，AQP9 表达也降低。同时，KRAS^G12V CRC 细胞在添加外源甘油后，甘油浓度低于 KRAS^WT细胞，这可能与 AQP9 表达差异有关。
• AQP9 过表达减少增殖并促进凋亡，而其敲低增加增殖并减少凋亡：构建 AQP9 过表达载体转染到 KRAS^G12V CRC 细胞后，细胞增殖减少、凋亡增加。利用 shRNA 敲低 AQP9 后，细胞增殖增加、凋亡减少，这充分说明了 AQP9 对 KRAS^G12V CRC 细胞功能有着重要影响。
• KRAS^G12V CRC 细胞通过 ZHX2 调节 AQP9，影响 CRC 细胞功能：通过 GeneMANIA 数据库预测，发现锌指和同源盒蛋白 ZHX2 可能与 AQP9 相关。实验证实，ZHX2 表达与 AQP9 正相关，过表达 ZHX2 可上调 AQP9 表达，抑制肿瘤细胞增殖，促进凋亡。进一步实验表明，敲低 AQP9 可抵消 ZHX2 过表达的作用，且 ZHX2 与 AQP9 存在相互作用。

研究结论和讨论部分指出，该研究揭示了 AQP9 在 KRAS^G12V CRC 组织和细胞中表达降低，与细胞增殖和凋亡异常相关，且 ZHX2 与 AQP9 存在正相关和相互作用。这一发现为理解 KRAS^G12V CRC 的分子机制提供了新视角，为开发新的治疗策略奠定了基础。虽然研究还存在一些局限性，如 KRAS^G12V通过 AQP9 影响细胞生长和死亡的具体分子过程、ZHX2 与 AQP9 的精确相互作用机制尚不清楚，且结果需在动物模型中进一步验证，但这依然是结直肠癌研究领域的重要突破，为后续研究指明了方向，有望为患者带来新的曙光。