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为解决缺乏芋兰(Anthurium amnicola)参考基因组限制研究和育种的问题,研究人员开展其染色体水平基因组测序与分析研究。成功组装基因组,明确基因数量、重复序列等,构建进化树。为花卉育种和进化研究提供重要基础。
在繁花似锦的植物世界里,芋兰(Anthurium amnicola)作为天南星科(Araceae)家族的一员,绽放着独特的魅力。它不仅是夏威夷花卉产业杂交品种的重要贡献者,其美丽的佛焰苞和肉穗花序更是吸引着无数人的目光,在花卉市场中占据着一席之地。然而,长期以来,芋兰的基因组信息一直处于未知状态,这就像一座横亘在科研人员面前的大山,严重阻碍了对其深入研究以及遗传改良工作的开展。
此前,虽然针对芋兰已经开展了诸多方面的研究,从遗传学到生理学,从花色到抗病性等,但由于缺乏参考基因组,这些研究大多浮于表面,无法深入到基因组层面去挖掘其奥秘。就好比在黑暗中摸索,没有一盏明灯指引方向,研究进展十分缓慢。例如,在研究芋兰与其他物种的进化关系时,由于基因组信息的缺失,难以准确判断其在进化长河中的位置;在花卉育种工作中,也无法精准地利用基因信息来培育更具商业价值的品种。
为了打破这一困境,来自美国农业部农业研究服务局丹尼尔?K?井上(USDA ARS Daniel K. Inouye)美国太平洋盆地农业研究中心、夏威夷农业研究中心、夏威夷大学马诺阿分校热带植物与土壤科学系等机构的研究人员,踏上了探索芋兰基因组奥秘的征程。他们深知,解析芋兰的基因组,就如同打开了一扇通往其遗传信息宝库的大门,对于花卉产业的发展和植物进化研究都具有至关重要的意义。
研究人员通过 PacBio HiFi 测序和 Hi-C 测序技术,成功构建了芋兰染色体水平的基因组。这一成果意义非凡,相关论文发表在《Scientific Data》上。
在研究过程中,研究人员采用了多种关键技术方法。首先,采集芋兰佛焰苞样本提取 DNA,构建 PacBio HiFi 文库和 Hi-C 文库进行测序。然后,利用 Hifiasm 软件对 PacBio HiFi reads 进行组装,通过 Purge_Dup 去除重复序列,使用 BWA - mem 将 Hi-C reads 比对到组装基因组,YAHS 进行脚手架搭建,Juicebox 手动调整错误。此外,运用多种方法预测基因结构和功能,通过收集多个物种基因组构建系统发育树。
研究结果如下:
- 基因组组装与质量评估:芋兰基因组大小约为 4.79 Gb,98.51% 的基因组被锚定到 15 条染色体上,contig N50 达到 26.98 Mb 。通过 BUSCO 评估,基因组完整性高达 99.2%,LAI 评分为 21.73,表明该基因组组装质量高。这意味着研究人员成功绘制出了一幅高精度的芋兰基因组地图,为后续研究奠定了坚实基础。
- 重复序列与基因注释:研究发现芋兰基因组中 78.52% 为重复序列,主要是长末端重复反转录转座子(LTR - RT) 。同时,预测出 20,380 个蛋白质编码基因,其中 7,490 个基因被注释到基因本体论(GO) ,7,122 个基因被注释到京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路。这就像在基因组这座宝藏中,找到了许多珍贵的 “基因宝藏”,并为它们贴上了功能标签。
- 系统发育分析:研究人员收集 19 个物种基因组构建系统发育树,发现芋兰所在的天南星科水芋亚科(Pothoideae)约在 5000 万年前(MYA)发生分化。这为探究芋兰在植物进化历程中的位置提供了关键线索,让我们对植物进化的理解又向前迈进了一步。
研究结论表明,芋兰染色体水平基因组的成功组装和注释,为深入研究芋兰的遗传特性、进化历史以及花卉育种提供了重要的基因组资源。在花卉育种方面,研究人员可以根据这些基因组信息,精准地选择优良基因,培育出更具观赏价值和商业价值的花卉品种。在进化研究领域,这一成果有助于揭示天南星科植物的进化机制,为理解植物界的演化历程提供了新的视角。这一研究成果不仅推动了芋兰相关研究的发展,也为整个植物基因组学研究领域做出了重要贡献,让我们对植物生命的奥秘有了更深入的认识。