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为解决如何准确识别患者是否能从维奈托克（Venetoclax）或其他靶向促生存 BCL2 蛋白的 BH3 模拟剂治疗中获益的问题，研究人员开展了对通透化血癌细胞检测方法的研究。结果发现 BH3 分析方法不可靠，还明确了辅助生存因子的作用。这为优化治疗策略提供了依据。
在癌症治疗领域，靶向促生存 BCL2 蛋白的 BH3 模拟药物为癌症治疗带来了新希望，尤其是在血癌治疗方面。维奈托克（Venetoclax）作为一种能抑制 BCL2 的药物，已获批用于治疗慢性淋巴细胞白血病（CLL）和急性髓系白血病（AML） 。然而，目前面临一个关键问题：如何精准地确定哪些患者最有可能从这类药物治疗中获益？为了解决这一问题，Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research 等机构的研究人员开展了相关研究，其成果发表在《Cell Death & Differentiation》上。
研究人员用到的主要关键技术方法包括：使用多种血癌细胞系模型和患者样本进行实验；运用 CRISPR/Cas9 基因编辑技术构建基因敲除细胞系；通过细胞活力测定、线粒体去极化分析、免疫印迹、共免疫沉淀等实验技术，研究药物对细胞的作用。
研究结果如下：
- BH3 分析在通透化 CLL 细胞中的局限性：研究人员发现，在 BH3 分析中，通透化的 CLL 细胞对维奈托克（Venetoclax）、抑制 MCL1 或 BCLXL 的药物反应相似，难以区分。但在完整的 CLL 细胞中，维奈托克（Venetoclax）的活性明显高于其他药物。在多种通透化癌细胞系中也观察到类似现象，高浓度的 BH3 模拟剂才能诱导线粒体膜电位（MOMP）变化，且这种变化在多数情况下并非由 BAX/BAK 特异性介导。
- BH3 肽的作用：来自促凋亡 BIM 的 BH3 结构域的肽（BH3BIM）在通透化细胞中能有效且特异性地诱导线粒体膜电位（MOMP） 。其他选择性结合促生存 BCL2 蛋白亚群的试剂活性均显著低于 BH3BIM。
- BCL2 对 MCL1 抑制剂作用的影响：在 AMO1 细胞中，BCL2 限制了 MCL1 抑制剂诱导线粒体膜电位（MOMP）的能力。敲除 BCL2 或同时抑制 BCL2 和 MCL1，能显著增强 AMO1 细胞对 MCL1 抑制剂的敏感性。在体内实验中，同时靶向 BCL2 和 MCL1 也能提高 AMO1 细胞异种移植模型对 MCL1 抑制剂的治疗反应。
- 辅助生存因子在多种血癌细胞系中的作用：在不同血癌细胞系中，辅助生存因子会限制 BH3 模拟药物的作用。通过基因和药物共靶向方法，研究人员确定了不同细胞系中促生存因子的层级关系，且该结论与对完整细胞的研究结果基本一致。
- 辅助生存因子在原发性血液癌症中的作用：在原发性多发性骨髓瘤、AML 和 CLL 患者样本中，研究人员发现辅助生存因子同样会影响 BH3 模拟剂的疗效。例如，在多发性骨髓瘤中，BCLxL 和 BCL2 对限制 MCL1i 的作用同等重要；在 CLL 中，MCL1 会限制维奈托克（Venetoclax）的作用。
- 靶向促生存 BCL2 蛋白的后果：以 KMS-12-PE 细胞为模型，研究发现抑制 BCL2 会导致与之结合的促凋亡蛋白减少，同时增加与 MCL1 结合的促凋亡蛋白；抑制 MCL1 则有相反效果；同时靶向 BCL2 和 MCL1 会使促凋亡蛋白从这两种蛋白上脱离。
研究结论和讨论部分指出，通透化细胞实验结果不能可靠反映 BH3 模拟剂在完整细胞中的活性，主要原因是多数细胞表达多种促生存 BCL2 蛋白，且通透化细胞的实验条件与完整细胞不同。因此，BH3 分析结果需谨慎解读，并通过其他方法验证。此外，研究还明确了辅助生存因子在多种血液恶性肿瘤中会限制 BH3 模拟剂的作用，同时靶向主要和辅助生存因子有望提高治疗效果，减少或消除耐药疾病，改善患者的治疗预后。这一研究为优化血癌治疗策略提供了重要的理论依据和实践指导，推动了癌症治疗领域的发展。
