《揭示柴胡皂苷 D 通过 FTO 介导的 TLR4 mRNA m6A 修饰抑制分泌性中耳炎炎症反应的新机制》

为解决分泌性中耳炎（SOM）现有治疗手段存在的耐药、依赖及并发症等问题，研究人员开展了柴胡皂苷 D（SSD）对 SOM 预防作用及机制的研究。结果发现 SSD 可减轻 SOM 进展，其机制与上调 FTO、促进 TLR4 mRNA 降解有关，为 SOM 治疗提供新方向。

　　** 在耳鼻喉科疾病的领域中，分泌性中耳炎（SOM）是一种常见的中耳非化脓性炎症疾病，如同隐藏在耳朵里的 “捣乱分子”，它会导致中耳持续积液、传导性听力损失 ，还会使患者的鼓膜保持完整却 “暗中作祟”。目前，针对 SOM 的治疗手段主要依赖抗生素和糖皮质激素，然而长期使用这些药物容易引发耐药性和潜在的依赖性问题。此外，鼓膜切开术虽然在短期治疗中显示出一定效果，但由于其可能带来的并发症，在长期治疗中的应用存在争议。正是在这样的背景下，为了寻找更有效的治疗方法，中国中医科学院广安门医院以及山东中医药大学第一临床学院的研究人员展开了一项意义重大的研究，相关成果发表在《BMC Pharmacology and Toxicology》上。

研究人员开展了关于柴胡皂苷 D（SSD）对 SOM 预防作用及机制的研究。实验中，他们通过建立大鼠 SOM 模型，收集中耳灌洗液（MELF）和组织样本进行全面分析，同时利用 HEK293T 细胞进行机制验证。研究主要采用了以下关键技术方法：一是构建动物模型，将 8 周龄的 SPF 级 SpragueDawley 大鼠分为多个实验组，包括对照组、SOM 模型组、SSD 治疗组和 FTO 抑制组等；二是样本处理与检测，收集 MELF 进行细菌定量、中性粒细胞计数和炎症因子检测，对中耳组织进行 HE 染色观察病理变化；三是分子生物学检测，运用 m⁶A Dot blot assay 检测 RNA m⁶A 修饰水平，通过逆转录定量 PCR（RT-qPCR）和 Western blot assay 检测基因和蛋白表达水平 ，还进行了甲基化 RNA 免疫沉淀（meRIP）和 mRNA 稳定性评估实验。

研究结果如下：

• SSD 促进 SOM 细菌清除：研究发现，SOM 模型大鼠 MELF 中的菌落形成单位（CFUs）明显高于对照组，而 SSD 治疗能显著降低 CFUs，且呈剂量依赖性。同时，SSD 还能减少中性粒细胞浸润，改善中耳组织病理变化，抑制促炎细胞因子（TNF-α、IL-6 和 IFN-γ）的表达。
• SSD 抑制 FTO 介导的 m⁶A 修饰：SOM 模型大鼠中耳组织中 m⁶A 水平显著升高，高剂量 SSD 治疗可有效抑制这一现象。进一步研究发现，SOM 建模使 METTL3 上调、FTO 表达下调，而高剂量 SSD 治疗则作用相反，后续研究聚焦于 FTO。
• SSD 抑制 FTO 敲低对细菌清除的影响：建立稳定 FTO 敲低的大鼠模型后发现，FTO 抑制会导致中耳黏膜增厚、炎症细胞浸润增加和促炎细胞因子水平升高，而 SSD 治疗能显著减轻这些变化，降低 CFUs 和中性粒细胞计数。
• SSD 降低 TLR4 mRNA 稳定性：在 HEK293T 细胞实验中，FTO 抑制会使 TLR4 mRNA 水平上调、m⁶A 修饰增加、mRNA 降解延迟。而 SSD 治疗可恢复 FTO 表达，降低 TLR4 mRNA 水平，增强 m⁶A 修饰，加速 mRNA 降解。

研究结论和讨论部分表明，SSD 可通过减少细菌负荷和中性粒细胞浸润来缓解 SOM 进展。其作用机制是 SSD 上调 FTO 表达，增强 TLR4 mRNA 的 m⁶A 修饰，进而促进 TLR4 mRNA 降解 。这一研究揭示了 SSD 预防 SOM 的潜在机制，为 SOM 的治疗提供了新的靶点和理论依据。然而，该研究也存在一定局限性，如研究是在动物模型上进行的，结果转化到人体还需进一步临床研究验证；SSD 对 FTO 介导的 m⁶A 修饰影响 TLR4 mRNA 稳定性的具体机制还需更深入研究；此外，SSD 存在肝毒性等副作用，在临床应用前需谨慎评估剂量和安全性 。但无论如何，这项研究为 SOM 的治疗开辟了新的方向，为后续研究奠定了重要基础，具有不可忽视的科学价值和临床意义。**