间充质干细胞来源的小细胞外囊泡在胰腺癌治疗中的双重作用：机遇与挑战

《Medical Oncology》：Dual facets of MSC-derived small EVs: regulatory insights into antitumor mechanisms in pancreatic ductal adenocarcinoma

胰腺癌（PDAC）死亡率高，现有治疗手段效果不佳。研究人员开展了间充质干细胞（MSC）来源的小细胞外囊泡（EVs）对 PDAC 作用机制的研究。结果显示其有抑制细胞增殖、调节上皮 - 间质转化（EMT）等抗肿瘤作用，但也存在免疫抑制。该研究为 PDAC 治疗提供新思路。

　　在癌症的世界里，胰腺癌就像一个 “顽固的堡垒”，严重威胁着人类的健康。它是全球癌症相关死亡的第七大原因，预计到 2030 年将跃居第二。胰腺癌具有侵袭性强、转移率高的特点，传统治疗手段往往难以奏效，手术切除后复发率高达约 80%。这是因为胰腺癌有一个特殊的 “保护屏障”—— 致密、纤维化、免疫抑制和促结缔组织增生的细胞外基质，治疗药物很难穿透。所以，寻找新的治疗策略迫在眉睫。

间充质干细胞（MSC）来源的细胞外囊泡（EVs）近年来成为了研究热点，被视为一种有潜力的治疗策略。然而，它对肿瘤细胞可能存在双重影响，这就需要深入研究。

此次由土耳其洛曼?海基姆大学（Lokman Hekim University）医学院医学系和安卡拉大学干细胞研究所的研究人员开展了相关研究，论文发表在《Medical Oncology》。他们旨在探究人脐带华通胶（Wharton’s Jelly，WJ）来源的间充质干细胞（MSC）产生的小细胞外囊泡（EVs）对胰腺导管腺癌（PDAC）的作用机制，具体包括对细胞周期、凋亡、上皮 - 间质转化（EMT）以及免疫相关基因表达的影响。

研究人员为开展研究，运用了以下几种关键技术方法：首先是细胞培养技术，培养了胰腺癌细胞系 Panc-1 和人脐带华通胶来源的间充质干细胞（WJ-MSCs）；然后采用超速离心法分离 WJ-MSC 来源的小 EVs，并通过纳米颗粒跟踪分析（NTA）和流式细胞术对其进行表征；还用 MTT 法检测细胞活力，通过流式细胞术进行凋亡和细胞周期分析，利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）分析基因表达。

研究结果如下：

1. 间充质干细胞和小细胞外囊泡的表征：经鉴定，培养的细胞符合间充质干细胞特征，所分离的小 EVs 平均大小为 104.6±1.6nm，CD63 和 CD9 表面标记阳性率超 98.05% 。
2. 间充质干细胞来源的小细胞外囊泡影响 Panc-1 细胞的活力和细胞周期：WJ-MSC 来源的小 EVs 会降低 Panc-1 细胞活力，且呈剂量依赖性。同时，能诱导细胞周期停滞，增加 G₁期细胞比例，减少 S 期和 G₂期细胞比例，降低 Sub-G₁期细胞群体数量。
3. 间充质干细胞来源的小细胞外囊泡影响 Panc-1 细胞的凋亡：小 EVs 对 Panc-1 细胞的活力和坏死影响较小，但能诱导约 2% 的早期凋亡。
4. 间充质干细胞来源的小细胞外囊泡影响 Panc-1 细胞的上皮 - 间质转化相关机制：小 EVs 下调了 Panc-1 细胞中 CD44、VIM、ZEB1 等与 EMT 相关基因的表达，在低剂量（4000 EVs / 细胞）时上调 CDH1 和 CLDN1 基因表达，高剂量时则下调。这表明小 EVs 支持上皮表型。
5. 间充质干细胞来源的小细胞外囊泡影响 Panc-1 细胞的免疫调节相关基因表达：小 EVs 下调了 Panc-1 细胞中促炎细胞因子（IL-6、TNF-α、IFN-γ、IL-1α、IL-1β）的表达，上调了抗炎细胞因子 IL-10 的表达，呈现免疫抑制状态。

研究结论和讨论部分指出，WJ-MSC 来源的小 EVs 在 PDAC 细胞中发挥着肿瘤抑制和免疫调节的双重作用。一方面，它能抑制细胞增殖、调节 EMT 标记物，展现出抗肿瘤潜力；另一方面，其免疫抑制作用在某些临床情况下可能带来不良后果。这一研究揭示了 WJ-MSC 来源小 EVs 的复杂作用，为胰腺癌的治疗提供了新的思路和方向。但目前研究存在局限性，如采用的体外 2D 培养模型不能完全模拟体内复杂的肿瘤微环境。未来还需利用原位动物模型或患者来源的异种移植模型进一步研究，以评估其临床应用潜力。