LINC00704 通过结合 miR-203a-3p 上调 TLR4 促进结直肠癌免疫逃逸的新发现

《European Journal of Medical Research》：LINC00704 boosts the immunologic escape of colorectal cancer cells by upregulating TLR4 by binding with miR- 203a- 3p

为探究结直肠癌（CRC）免疫逃逸机制，研究人员开展了 LINC00704 与 miR-203a-3p、TLR4 关系的研究。结果发现 LINC00704 通过结合 miR-203a-3p 上调 TLR4，促进 CRC 细胞增殖、抑制凋亡和免疫逃逸，为 CRC 治疗提供新理论依据。

　　在全球范围内，结直肠癌（Colorectal Cancer，CRC）是一种极为常见的恶性肿瘤，它就像隐藏在身体里的 “定时炸弹”，悄无声息地威胁着人们的生命健康，是导致癌症相关死亡的第二大 “元凶”。随着时间推移，其发病率和死亡率呈上升趋势，尤其是在一些发展中国家以及年轻人群体中更为明显。当前，肿瘤免疫逃逸现象是癌症治疗的一大难题，肿瘤细胞通过免疫逃逸躲避免疫系统的 “追捕”，持续增殖，严重阻碍了癌症治疗的进程。Toll 样受体 4（Toll-like receptor 4，TLR4）在肿瘤免疫逃逸中扮演着关键角色，它能促进肿瘤细胞分泌免疫抑制因子，让免疫系统 “失灵”。同时，MicroRNAs（miRNAs）和长链非编码 RNAs（lncRNAs）也参与肿瘤的发生发展，但它们在 CRC 免疫逃逸中的具体作用和机制仍不明确。

为了攻克这些难题，武汉大学中南医院全科医学科和武汉大学人民医院骨科的研究人员开展了一项关于 LINC00704 在 CRC 免疫逃逸中作用的研究。他们发现，LINC00704 通过结合 miR-203a-3p 上调 TLR4，进而促进 CRC 细胞的免疫逃逸。这一发现为 CRC 的治疗和预后改善提供了新的理论基础，就像是为黑暗中的人们点亮了一盏明灯，让我们在对抗 CRC 的道路上看到了新的希望。该研究成果发表在《European Journal of Medical Research》上。

研究人员在开展研究时，主要运用了以下几种关键技术方法：一是收集 CRC 患者的肿瘤组织和癌旁组织样本；二是采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测组织和细胞中基因的表达水平；三是利用蛋白质免疫印迹（Western blot）技术检测蛋白质表达；四是进行双荧光素酶报告实验验证分子间的相互作用。

研究结果如下：

1. LINC00704 和 miR-203a-3p 在 CRC 组织中的表达差异：通过收集 CRC 患者的肿瘤组织和癌旁组织，利用 RT-PCR 检测发现，LINC00704 mRNA 在 CRC 组织中表达升高，而 miR-203a-3p 表达降低，这表明它们可能与 CRC 的进展密切相关。
2. LINC00704 对细胞增殖和凋亡的影响：构建 LINC00704 的过表达载体和小干扰 RNA（siRNA）并转染到 SW480 细胞中，用 EdU 检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡。结果显示，LINC00704 促进细胞增殖，抑制细胞凋亡，这对 CRC 的发展至关重要。
3. LINC00704 通过 miR-203a-3p 调节 TLR4 表达：构建 miR-203a-3p 模拟物、抑制剂和 TLR4 siRNA 进行转染实验，通过 RT-PCR 和 Western blot 检测 TLR4 表达。结果表明，LINC00704 促进 TLR4 表达，miR-203a-3p 抑制 TLR4 表达，LINC00704 通过 miR-203a-3p 调节 TLR4 表达。
4. LINC00704 通过 miR-203a-3p 调节细胞增殖和凋亡：转染不同载体和 siRNA 后，用 EdU 检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡。结果显示，LINC00704 促进细胞增殖、抑制凋亡，miR-203a-3p 介导了 LINC00704 对细胞增殖和凋亡的影响。
5. LINC00704 促进 CRC 细胞免疫逃逸：将 SW480 细胞与单核细胞共培养，转染 si-LINC00704 后用 CCK8 检测细胞活力，ELISA 检测细胞因子，流式细胞术检测 CD4⁺/CD8⁺ T 细胞比例，双荧光素酶报告实验验证分子间相互作用。结果表明，LINC00704 通过调节 TLR4 表达促进 CRC 细胞免疫逃逸。

研究结论和讨论部分指出，LINC00704 在 CRC 组织中表达升高，通过结合 miR-203a-3p 上调 TLR4，促进细胞增殖、抑制凋亡，进而促进 CRC 细胞免疫逃逸。这一发现揭示了 CRC 免疫逃逸的新机制，为开发针对 CRC 的新型治疗策略提供了重要的理论依据。同时，也为后续研究指明了方向，未来可以进一步探索 LINC00704 作为治疗靶点的可行性，以及开发靶向 miR-203a-3p 的小分子药物，为 CRC 患者带来更多的希望和曙光。