当归六黄汤改良方治疗中枢性性早熟的多靶点机制：基于网络药理学与实验验证的探索

本研究针对GnRHa治疗中枢性性早熟(CPP)存在的局限性，广州中医药大学团队通过整合GEO数据库挖掘、网络药理学预测和GT1-7细胞实验，首次揭示当归六黄汤改良方(MDGLHD)通过槲皮素等活性成分调控STAT3/p53和PI3K/Akt/mTOR通路，抑制GnRH分泌关键基因KISS1/GPR54表达。该研究为中药复方治疗CPP提供了分子机制证据，发表于《Hereditas》。

　　

在当代儿童健康领域，中枢性性早熟(CPP)正成为日益突出的公共卫生问题。这种表现为女孩8岁前、男孩9岁前出现第二性征的疾病，不仅影响患儿心理健康，更会导致骨骺提前闭合造成终身矮小。尽管促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)是当前标准疗法，但其高昂费用和潜在副作用促使研究者将目光转向传统中药。广州中医药大学徐华团队发表在《Hereditas》的研究，首次系统揭示了经典方剂当归六黄汤改良方(MDGLHD)治疗CPP的科学内涵。

研究采用多学科交叉策略：首先通过GEO数据库GSE208722数据集筛选MKRN3基因缺陷相关差异表达基因，联合MalaCard等数据库获取2268个CPP相关基因；继而利用TCMSP数据库筛选MDGLHD中99种活性成分（OB≥30%，DL≥0.18）及其1021个靶点，构建"药物-成分-靶点"网络；采用STRING数据库建立蛋白互作网络，通过CytoNCA插件筛选核心靶点；运用AutoDock Vina进行分子对接验证；最后通过E2诱导GT1-7细胞建立CPP模型，采用CCK-8、ELISA和qRT-PCR验证MDGLHD对GnRH分泌的抑制作用。

"药物-成分-靶点网络"分析显示，槲皮素(quercetin)、山奈酚(kaempferol)和(S)-坎那丁((S)-Canadine)是MDGLHD的关键活性成分，其作用靶点与"激素应答""癌症通路"等生物过程显著相关。PPI网络拓扑分析鉴定出STAT3、TP53、ESR1、JUN、MYC和AKT1六个核心靶点，KEGG富集提示这些靶点主要富集于JAK-STAT和HIF-1信号通路。分子对接证实槲皮素与AKT1结合能达-8.5 kcal/mol，与STAT3形成5个氢键；山奈酚与AKT1结合能更达-9.8 kcal/mol，揭示其强效结合特性。

体外实验证实，100μg/mL MDGLHD提取物可显著抑制E2诱导的GT1-7细胞GnRH分泌（ELISA检测P<0.05），并使GnRH、GnRHR、ERβ、KISS1和GPR54 mRNA表达水平分别降低47.3%、51.8%、42.6%、39.7%和45.2%（qRT-PCR验证）。这些结果验证了网络预测结果，表明MDGLHD可能通过抑制KISS1/GPR54系统调控GnRH神经元活动。

该研究创新性地构建了"成分-靶点-通路"多维网络，阐明MDGLHD通过多成分协同作用于STAT3/p53和PI3K/Akt/mTOR等信号轴，调控下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴功能。特别值得注意的是，(S)-坎那丁作为新型PI3K/Akt调节剂的发现，为开发植物源性CPP治疗药物提供了新思路。研究不仅为中药复方现代化研究提供了范式，其发现的生物标志物群更为临床疗效评价体系的建立奠定了基础。未来需开展动物实验验证MDGLHD对骨龄进展的影响，并探索不同配伍成分的协同效应机制。