CLDN9 与 hsa-miR-4496：胃癌无创诊断的新希望 —— 开启早期精准诊疗新时代

《Discover Oncology》：CLDN9 and hsa-miR-4496 as non-invasive biomarkers for gastric cancer detection

胃癌死亡率高，早期诊断困难，现有诊断方法具有侵入性。研究人员开展了以 CLDN9 和 hsa-miR-4496 为非侵入性生物标志物检测胃癌的研究。结果显示二者有诊断潜力，或可纳入临床方案，助力胃癌早期干预和个性化治疗。

　　胃癌，这个全球范围内令人闻风丧胆的健康杀手，一直以来都严重威胁着人类的生命健康。它是全球第五大常见癌症，也是癌症相关死亡的第三大主因 。在东亚国家如中国、日本、韩国，以及东欧、南美部分地区，胃癌的发病率居高不下。由于胃癌早期通常没有明显症状，等到患者出现不适就医时，病情往往已经发展到晚期，发生了转移，此时治疗手段有限，5 年生存率骤降至 30% 以下。而如果能在早期发现胃癌，5 年生存率可超 90%。因此，寻找可靠的无创生物标志物用于胃癌早期检测迫在眉睫。

为了攻克这一难题，四川大学华西医院精准医学中心、贵州医科大学附属医院综合病房、贵州省人民医院消化内科和重症医学科以及长春中医药大学临床医学院的研究人员联合开展了一项研究，致力于探寻新的胃癌无创生物标志物。该研究成果发表在《Discover Oncology》杂志上。

研究人员主要运用了以下关键技术方法：从贵州省人民医院收集了 50 例胃癌患者的癌组织和癌旁正常组织样本；数据来源于癌症基因组图谱（TCGA）数据库和基因表达综合数据库（GEO）；利用免疫组化技术分析 CLDN9 表达；通过机器学习算法如最小绝对收缩和选择算子（LASSO）回归、随机森林算法等筛选关键 miRNA；采用受试者工作特征（ROC）曲线评估诊断价值。

研究结果如下：

1. CLDN9 在肿瘤组织中高表达：与正常组织相比，胃癌肿瘤组织中 CLDN9 表达显著上调，且高表达 CLDN9 的患者总生存期较差，其表达与癌症分期相关，免疫组化染色显示随着癌症进展 CLDN9 蛋白水平增加。
2. CLDN9 表达与肿瘤进展相关：CLDN9 表达随病理 T、N、M 分期升高而增加，在有远处转移（M1）的患者中表达更高。ROC 曲线分析显示，CLDN9 区分癌组织和正常组织的曲线下面积（AUC）为 0.823，诊断性能良好。
3. 筛选关键 miRNA：通过生物信息学预测和分析，发现多个潜在调节 CLDN9 的 miRNA，经 LASSO 回归等模型筛选出 hsa-miR-4417、hsa-miR-4792、hsa-miR-4496 等关键 miRNA，它们在多个模型中均显示出重要性。
4. 富集分析揭示调控通路：对核心 miRNA 的靶 mRNA 进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析，发现这些 mRNA 参与运输、生物合成、蛋白质修饰等生物过程，以及癌症相关通路，其中线粒体功能相关过程显著富集。
5. 血浆 hsa-miR-4496 和唾液 CLDN9 可作为诊断标志物：分析 GEO 数据集发现，癌症患者血浆中 hsa-miR-4496 下调，唾液中 CLDN9 mRNA 表达升高。唾液 CLDN9 诊断胃癌的 AUC 为 0.657，虽准确性中等，但结合血浆检测有望提升早期无创筛查效果。

研究结论和讨论部分指出，CLDN9 在肿瘤组织中高表达，与癌症分期和预后相关，可作为潜在的预后指标和早期检测生物标志物。hsa-miR-4496 等关键 miRNA 对 CLDN9 的调控作用显著，它们参与的线粒体功能等相关通路在癌症发展中具有重要意义。血浆 hsa-miR-4496 和唾液 CLDN9 有望成为无创诊断胃癌的新标志物。不过，该研究也存在局限性，主要依赖生物信息学分析，缺乏湿实验验证，且关键 miRNA 在临床实践中的应用还需大量临床样本进一步验证。未来研究可通过细胞和动物模型实验进一步明确 CLDN9 和相关 miRNA 的作用机制，扩大临床样本验证其诊断和预后价值，从而推动胃癌个性化治疗和 miRNA 靶向治疗的发展。