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为探究曲马多（TRM）滥用导致的神经毒性问题，研究人员开展了迷迭香酸（RA）对 TRM 诱导神经毒性改善作用的研究。结果表明，RA 可降低 TRM 诱导的氧化应激、炎症等损伤，改善认知功能。该研究为防治 TRM 神经毒性提供了新方向。
在医学的广阔领域中，疼痛的缓解一直是重要课题，曲马多（Tramadol，TRM）作为一种合成阿片类镇痛药，自 1995 年被美国食品药品监督管理局（FDA）批准后，广泛应用于缓解创伤、慢性疼痛等，在众多医疗指南中都有它的身影。然而，它却像一把双刃剑，在发挥治疗作用的同时，滥用问题日益严重。国际麻醉品管制局 2013 年的报告显示，近半数被审查国家存在 TRM 使用问题，其滥用不仅表现为故意过量服用或中毒，还可能引发癫痫等严重后果，其中神经毒性是其最突出的副作用之一。长期使用 TRM 会导致神经元结构改变、细胞凋亡，增加活性氧（ROS）生成和氧化应激，进而激活炎症和凋亡机制，给医疗系统带来沉重负担。
面对 TRM 带来的种种问题，寻找一种安全有效的应对方法迫在眉睫。此时，天然植物中的活性成分进入了研究人员的视野。迷迭香酸（Rosmarinic acid，RA）作为一种存在于多种植物中的多酚类次生代谢物，具有抗氧化、抗炎、神经保护等多种药理特性，引起了研究人员的关注。但此前，关于 RA 对 TRM 诱导的神经毒性的影响尚无相关报道。
为了解开这个谜团，来自土耳其多所大学的研究人员（Onur Karaca、Hasan ?im?ek 等）开展了一项深入研究，相关成果发表在《Molecular Neurobiology》上。
研究人员采用了多种关键技术方法。首先，选取 35 只雄性 Wistar 白化大鼠，将其随机分为 5 组（每组 7 只），分别为对照组、RA 组、TRM 组、TRM + RA25 组和 TRM + RA50 组。通过腹腔注射和灌胃的方式，对不同组别的大鼠给予相应处理。随后，运用 Morris 水迷宫测试（MWT）评估大鼠的认知功能。实验结束后，采集大鼠的脑和海马组织，利用脂质过氧化分析、抗氧化剂分析、qRT-PCR 分析、Western blot 分析、苏木精 - 伊红（HE）染色、免疫组织化学分析等技术，检测组织中的氧化应激、炎症、内质网应激、凋亡损伤等相关指标，以及相关蛋白和基因的表达水平。
在行为学测试结果方面，MWT 实验显示，在获取阶段的前三天，除 TRM 组外，其他组大鼠到达平台的时间逐渐缩短，而 TRM 组变化不明显。在第 4 天，TRM 组到达平台的时间比对照组长，但差异不显著。在探测阶段（第 5 天），TRM 组到达平台所在象限的时间比对照组更长（p < 0.001），当与 RA 联合应用时，这一现象得到改善（两个剂量组均 p < 0.001）。不过，在该象限停留的时间方面，虽然 RA 联合应用组较 TRM 组有所增加，但差异未达显著水平。
氧化应激相关结果表明，TRM 处理使脑和海马组织中的氧化标记物丙二醛（MDA）水平显著升高（p < 0.001），同时降低了谷胱甘肽（GSH）水平以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）的活性（p < 0.001）。而 RA 与 TRM 联合应用时，MDA 水平显著降低，且较高剂量的 RA 效果更明显（p < 0.001），同时，RA 还能提高上述抗氧化剂的水平和活性。
内质网应激结果显示，TRM 处理增加了脑和海马组织中真核翻译起始因子 2α 亚基（eIF2-α）、激活转录因子 4（ATF4）、蛋白激酶 R（PKR）样内质网激酶（PERK）、激活转录因子 6（ATF-6）和肌醇需求酶 1（IRE1）的 mRNA 转录水平（p < 0.001）。RA 的应用则逆转了这一效应，降低了这些指标的水平（在海马组织中，25mg/kg 剂量的 RA 对 ATF-6 的影响 p < 0.01，其他参数在两个组织和两个剂量下均 p < 0.001）。
炎症相关结果表明，TRM 处理使脑和海马组织中核因子 κB（NF-κB）、Toll 样受体 4（TLR-4）、肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）、白细胞介素 - 1β（IL-1β）和神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的 mRNA 转录水平升高（p < 0.001）。与 TRM 组相比，TRM + RA 组在两个剂量下这些指标的水平均降低（p < 0.001），且较高剂量的 RA 效果更显著。
关于 RAGE 信号通路的研究发现，TRM 组脑和海马组织中晚期糖基化终末产物受体（RAGE）和 NLR 家族 pyrin 结构域包含 3（NLRP3）的 mRNA 转录水平较对照组升高（p < 0.001）。RA 处理后，这一效应被逆转，两个组织中的 RAGE 和 NLRP3 mRNA 转录水平均降低（两个剂量组均 p < 0.001），50mg/kg 剂量的 RA 效果更明显。
凋亡相关结果显示，TRM 处理增加了脑和海马组织中促凋亡的 Bax 和半胱天冬酶 - 3（Casp-3）的 mRNA 转录水平，同时降低了抗凋亡的 Bcl-2 的 mRNA 转录水平（p < 0.001）。当 RA 与 TRM 联合应用时，Bax 和 Casp-3 水平降低，Bcl-2 水平升高（p < 0.001），50mg/kg 剂量的 RA 效果更显著。
BDNF mRNA 转录水平方面，TRM 组脑和海马组织中的 BDNF 水平低于对照组（p < 0.001）。RA 处理后，TRM + RA 组的 BDNF 水平升高（两个剂量组均 p < 0.001），50mg/kg 剂量的 RA 在脑（p < 0.05）和海马（p < 0.001）中的效果更明显。
组织学和免疫组化结果也进一步验证了上述结论。HE 染色显示，对照组和 RA 组的脑和海马组织形态正常，而 TRM 组出现血管充血、神经元萎缩和变性等现象，TRM + RA 组的组织损伤程度则有所减轻。免疫组化分析发现，TRM 组脑和海马组织中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和 Casp-3 的表达显著增加，RA 处理后表达降低。
综合上述研究结果，该研究表明 TRM 可能通过触发氧化应激、炎症、内质网应激和细胞凋亡，破坏脑和海马组织的结构和功能，从而导致大鼠学习和记忆能力下降。而 RA，尤其是 50mg/kg 的 RA，具有显著的保护作用，可有效减轻 TRM 诱导的神经毒性。这一研究为预防和减少 TRM 诱导的神经毒性提供了新的方向，也为开发基于 RA 的神经保护药物奠定了基础，对解决临床中 TRM 滥用导致的神经毒性问题具有重要的意义。
