肿瘤特异性 CXCR6 阳性前体 CD8+T 细胞：转移性黑色素瘤免疫治疗的新希望

为解决肿瘤转移治疗难题及过继细胞疗法（ACT）疗效受限问题，研究人员开展了肿瘤特异性 T 淋巴细胞亚群研究。结果发现肿瘤特异性 CXCR6+前体耗竭 T（Texp）细胞可控制肿瘤转移，该研究为增强免疫治疗效果提供新见解。

　　在肿瘤治疗的领域中，肿瘤转移一直是 “顽固的堡垒”，是癌症患者死亡的主要原因。传统的手术、放疗等手段，面对肿瘤转移常常 “束手无策”。过继细胞疗法（ACT）虽给癌症治疗带来新希望，能让部分癌症出现持久且完全的消退，但在肿瘤微环境中，细胞毒性 T 淋巴细胞容易 “疲惫不堪”，难以长期发挥作用，大大限制了 ACT 的疗效。免疫检查点阻断（ICB）疗法虽已获批用于多种癌症治疗，可仍有超半数患者对此无明显反应。在这样的困境下，探索更有效的肿瘤治疗策略迫在眉睫。

复旦大学附属华山医院的研究人员开展了相关研究，致力于找出能有效用于 ACT 的细胞亚群，为肿瘤免疫治疗开辟新道路。他们的研究成果发表在《Cellular Oncology》上，为肿瘤治疗带来了新的曙光。

研究人员采用了多种关键技术方法。首先是建立动物模型，通过将表达 OVA 的黑色素瘤 B16 细胞接种到小鼠体内，构建转移性肺黑色素瘤小鼠模型，模拟肿瘤在体内的转移过程；同时建立皮下肿瘤和病毒感染模型，以便从不同角度研究肿瘤免疫反应。其次，运用流式细胞术，对肿瘤组织中特异性 CD8⁺T 细胞的表面标记、转录因子和分泌的细胞因子等进行分析，并对浸润细胞进行分选，用于后续实验。此外，还进行了体内抗体治疗、体外细胞培养与刺激、体外杀伤实验、活体成像检测等一系列实验技术，从多方面深入探究肿瘤特异性 T 细胞的特性与功能。

研究结果如下：

1. Tex 细胞的异质性及作用：肿瘤浸润的细胞毒性 T 淋巴细胞（CTLs）在面对转移性肿瘤时，其反应十分复杂。研究发现，耗竭的 CD8⁺T（Tex）细胞在转移性组织中具有高度异质性。其中，前体耗竭 T（T_exp）细胞在控制肿瘤转移中发挥着重要作用，将其过继转移到小鼠体内，能显著提高小鼠的生存率，延缓肿瘤转移。
2. CXCR6⁺亚群的存在：在 T_exp细胞中存在 CXCR6⁺亚群，该亚群细胞在肿瘤引流的纵隔淋巴结（MLNs）中产生，其生成与肿瘤抗原负担有关，肿瘤细胞在肺组织中的高接种量会增加 CXCR6⁺T_exp细胞的比例。
3. CXCR6⁺T_exp细胞的记忆属性：CXCR6⁺T_exp细胞具有有限的细胞记忆属性，与 CXCR6^-细胞相比，其记忆相关标记 CD62L、IL2Rβ、IL7Rα 的表达水平较低，在体内的长期维持能力较弱，且转录因子表达模式也有所不同。
4. 效应样 Tex 细胞的产生：在肿瘤转移过程中，效应样 Tex 细胞的产生主要依赖于 CXCR6⁺T_exp细胞。CXCR6⁺T_exp细胞在体外受到刺激后能迅速增殖，并在体内分化为效应样 Tex 细胞，补充其在肿瘤组织中的数量。
5. CXCR6⁺T_exp细胞对肺转移的控制：将 CXCR6⁺T_exp细胞过继转移到已建立转移模型的小鼠体内，可显著减少肺转移灶的数量，延长小鼠的生存期。联合环磷酰胺（CTX）治疗，能进一步增强治疗效果。而缺乏 CXCR6⁺亚群的小鼠，对肿瘤转移的抵抗力明显下降。
6. CXCR6⁺T_exp细胞的作用机制：CXCR6⁺T_exp细胞可通过多种机制发挥对肿瘤转移的控制作用。它能直接对肿瘤细胞产生细胞毒性，通过上调 IFN-γ、TNFα、CD107a/b、GzmB 等细胞因子的分泌，杀伤肿瘤细胞；还能增加肿瘤组织中树突状细胞（DC）的数量，激活肿瘤反应性 CD8⁺T 细胞，增强抗肿瘤免疫反应。
7. CXCR6⁺T_exp细胞对 ICB 的反应：部分肿瘤特异性 CXCR6⁺T_exp细胞表达 PD1 蛋白，对 ICB 有反应。体外实验中，用抗 PD1 抗体处理 CXCR6⁺T_exp细胞，可使其数量增加；体内实验也证实，抗 PD1 治疗能促进 CXCR6⁺T_exp细胞的增殖。联合 CXCR6⁺T_exp细胞过继转移和 ICB 治疗，比单一治疗的效果更好。

研究结论与讨论部分指出，该研究明确了 CXCR6⁺T_exp细胞在抗肿瘤转移中的关键作用，其机制包括直接分化为效应样 CD8⁺T 细胞、分泌细胞毒性细胞因子、招募肿瘤反应性 CD8⁺T 细胞等。这一发现丰富了人们对 Tex 细胞异质性的认识，为临床肿瘤免疫治疗提供了新的潜在策略。不过，该研究主要集中在肺组织转移，其结果在其他组织中的适用性还需进一步探索。未来，进一步研究 CXCR6⁺T_exp细胞的抗转移机制，以及与传统治疗方法联合应用，有望实现转移性肿瘤患者的长期缓解，为肿瘤患者带来更多的生存希望。