一种新型抗 OX40 人源单克隆抗体：阻断 OX40/OX40L 信号通路并清除 OX40+T 细胞的潜在疗法

为解决现有 OX40 靶向抗体治疗自身免疫性疾病的不足，如部分患者无响应、有副作用及耐药性问题，研究人员开展抗 OX40 抗体研究。筛选出的 JY007 能有效抑制 OX40/OX40L 相互作用、清除 OX40+T 细胞，为治疗特应性皮炎等疾病提供新选择。

　　在皮肤的世界里，有一种常见且令人困扰的疾病 —— 特应性皮炎（AD），它就像一个顽固的 “小怪兽”，频繁地引发皮肤红斑、瘙痒、湿疹样病变，还会让皮肤变厚、发炎，严重影响着人们的生活质量。据统计，近几十年来，特应性皮炎的发病率和患病率不断上升，全球 15%-30% 的儿童和 2%-10% 的成人都深受其害。

这种疾病的发生、发展和慢性化与遗传、环境因素密切相关，同时，表皮屏障受损、瘙痒、皮肤炎症以及免疫调节异常等也在其中 “推波助澜”。从免疫角度来看，它是一种由 T 细胞介导的双向疾病，Th2 细胞在急性和慢性阶段 “兴风作浪”，Th1 细胞则加剧了炎症反应，让病情更加顽固。

在免疫调节的 “舞台” 上，OX40（肿瘤坏死因子受体超家族成员 4，TNFRSF4）和它的配体 OX40L（TNFSF4）扮演着重要角色。OX40 在激活的 T 细胞上高度表达，而 OX40L 主要存在于激活的抗原呈递细胞（APCs）上。当它们相互结合，就会触发 T 细胞内一系列反应，激活核因子 κB（NF-κB）和活化 T 细胞核因子（NF-AT），进而影响 T 细胞的活化和免疫反应。然而，当 OX40-OX40L 过度表达时，就会像失控的火车，导致 Tregs 的抑制功能受损，引发免疫功能紊乱，许多自身免疫性疾病，如肠道疾病、哮喘、实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）等都与之相关，特应性皮炎患者体内 OX40 的过度表达更是引起了广泛关注。

为了攻克特应性皮炎这个难题，中国海洋大学医药学院等机构的研究人员踏上了探索之旅。他们的研究成果发表在《Marine Life Science 》上。

研究人员主要运用了噬菌体展示技术、ELISA 技术、分子对接和定点突变技术。噬菌体展示技术用于从人源单链抗体噬菌体文库中筛选抗 OX40 抗体；ELISA 技术可检测抗体与抗原的结合活性等；分子对接和定点突变技术则用于确定抗体与 OX40 结合的抗原表位。

研究结果如下：

1. 筛选抗 OX40 抗体：通过对人源单链抗体噬菌体文库进行三轮固相筛选，研究人员利用多克隆噬菌体 ELISA 和单克隆噬菌体 ELISA，成功筛选出 6 种具有不同序列的 scFv 抗体，其中 A8 表现突出，与 OX40 结合能力强，抑制 OX40-OX40L 相互作用的活性也高。
2. 抗体 JY007 的特性：基于 A8 构建的 IgG1 抗体 JY007，与人和食蟹猴的 OX40 都有高亲和力，亲和力常数（K_D）为 7.71 nM 。JY007 抑制 OX40 与 OX40L 相互作用的能力比临床阶段的 KHK4083 更强，其 IC₅₀值为 1.088 nmol/L。
3. 对 T 细胞的影响：JY007 能有效抑制激活的 T 细胞上 OX40 与 OX40L 的相互作用，IC₅₀值为 2.665 nmol/L ，还可通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性（ADCC）清除 OX40⁺T 细胞，EC₅₀值为 5.592 pmol/L ，功能活性强于 KHK4083。
4. 结合抗原表位：经研究发现，JY007 和 KHK4083 在 OX40 上的结合抗原表位不同。JY007 结合 OX40 的 Pro³⁷、Ser³⁸和 Asp⁴⁰残基，而 KHK4083 结合 Asp⁷⁴、Lys⁸²、Asp¹¹⁷、Ser¹¹⁸、Tyr¹¹⁹和 Lys¹²⁰残基。

研究结论和讨论部分指出，OX40-OX40L 轴在免疫调节中意义重大，刺激 OX40 可促进抗肿瘤免疫反应，而阻断 OX40 信号则能抑制自身免疫性疾病中的免疫活动。目前基于 OX40 的抗体疗法在治疗特应性皮炎方面虽有成效，但存在患者出现不良反应和耐药性等问题。JY007 与 KHK4083 活性相当，且结合抗原表位不同，为解决 KHK4083 在 AD 治疗中的耐药问题提供了新方案，给 AD 患者带来了新希望。不过，后续还需通过动物实验进一步评估 JY007 对特应性皮炎的治疗效果，期待它能在未来的临床治疗中发挥更大作用，为患者带来真正的福音。