重组H1N1/H3N2双价灭活猪流感疫苗的免疫原性及长效保护效应研究

《Cellular and Molecular Life Sciences》：Immunogenicity and protective efficacy of an inactivated bivalent vaccine containing two recombinant H1N1 and H3N2 swine influenza virus strains

本期推荐：中国科研团队通过反向遗传学技术构建H1N1-Re1和H3N2-Re1重组毒株，制备的双价灭活疫苗在猪体实验中显示HI抗体滴度达2048，保护期长达29周，攻毒实验显示100%保护率，显著优于市售疫苗。该研究为应对快速变异的猪流感病毒（SIV）提供了高效疫苗开发策略。

　　

猪流感（Swine influenza, SI）是由猪流感病毒（SIV）引起的急性呼吸道传染病，不仅造成养猪业重大经济损失，更因"禽-猪-人"传播链成为公共卫生隐患。中国流行的H1N1和H3N2亚型SIV存在野毒株鸡胚适应性差、繁殖效价低等问题，导致传统疫苗保护效果有限。针对这一难题，西北农林科技大学联合中国农业科学院哈尔滨兽医研究所等团队在《Cellular and Molecular Life Sciences》发表研究，通过八质粒反向遗传学系统（reverse genetics）构建重组疫苗株，开发出具有长效保护的双价灭活疫苗。

研究采用三项关键技术：1）基于A/PR/8/34骨架的八质粒系统重组H1N1-Re1和H3N2-Re1毒株（HA/NA来自流行株SW/GX/755/17和SW/GX/1659/17）；2）通过鸡胚生长曲线测定病毒效价（EID₅₀）；3）采用30头4-6周龄SPF猪进行29周免疫持久性评估，以血凝抑制试验（HI）和攻毒实验验证保护效果。

研究结果首先在"Characterization of the recombinant H1N1-Re1 and H3N2-Re1 SIV strains"部分证实：重组病毒在MDCK细胞中产生典型细胞病变（CPE），电镜观察到80-120nm病毒颗粒，交叉HI试验显示重组株与野毒株抗原性一致（HI滴度1280）。"Determination of the growth curves"部分显示：重组株在鸡胚中72-96小时达到峰值效价10^8.31和10^8.17 EID₅₀/100μL，较野毒株提高10倍。

"Immune duration of the bivalent inactivated vaccine"部分揭示：二免后5周HI抗体几何均值达2368（H1N1）和2304（H3N2），29周仍维持144-152，显著高于市售疫苗（68-152）。关键的"Protection of the bivalent inactivated vaccine"部分通过攻毒实验证明：双价疫苗组对H1N1 SW/JL/723/17和H3N2 SW/GX/1659/17的病毒分离率为0/5（100%保护），而市售疫苗组为1/5（80%），PBS组全部感染（5/5）。病理学显示疫苗组肺部结构正常，市售疫苗组1/5出现肺泡壁增厚。

该研究创新性地将流行株表面蛋白与PR8骨架结合，解决了野毒株鸡胚适应性差的产业难题。双价疫苗产生的HI抗体水平是市售疫苗的2-3倍，保护期覆盖生猪出栏周期，且对异源毒株具有交叉保护。讨论部分指出，该八质粒系统可快速响应新发变异株，研究团队特别强调TRIM29（tripartite motif-containing protein 29）和PARP9（poly-ADP-ribose polymerase 9）等宿主因子可能参与疫苗诱导的免疫保护，为后续机制研究指明方向。这项成果不仅为SIV防控提供新工具，其技术路线对其他人畜共患流感疫苗开发也具有重要参考价值。