BGP - 15:优化山羊精子冷冻保存,开启畜牧繁育新篇

【字体: 时间:2025年04月07日 来源:Cryobiology 2.3

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  山羊精液冷冻保存面临诸多挑战,如精子对氧化损伤敏感。研究人员开展了 BGP - 15 对山羊精子冷冻保存影响的研究。结果显示,100 μM BGP - 15 可显著提升冻融精子质量、活力及抗氧化能力。这对山羊养殖和育种行业意义重大。

  在现代畜牧业发展进程中,精液冷冻保存技术是守护珍贵种质资源的关键防线。它就像一把神奇的 “时光钥匙”,能够跨越时间与空间的限制,让优秀的遗传物质得以长久保存,为人工授精(AI)、体外受精(IVF)和胞浆内单精子注射(ICSI)等辅助生殖技术的广泛应用奠定基础。在山羊养殖领域,这一技术的重要性更是不言而喻。山羊拥有丰富多样的遗传特性,这些特性不仅关乎经济收益,更是生态可持续发展的重要保障。借助精液冷冻保存技术,优良的基因得以精准传递,有效避免了因环境变化或疾病肆虐而导致的遗传资源流失。同时,冷冻精液还能将优质公羊的基因高效传播,极大地提升了繁殖效率与生产效益。
然而,山羊精子在冷冻保存的 “旅程” 中却面临着重重艰难险阻。与人类、兔子、犬类和猫科动物的精子相比,山羊精子对冷冻过程格外敏感。这主要是因为山羊精子细胞膜中富含大量的多不饱和脂肪酸,这些脂肪酸就像一群 “脆弱的士兵”,在冷冻时极易遭受氧化损伤的 “攻击”,进而破坏细胞膜的完整性,削弱精子的运动能力。在冷冻保存过程中,精子还要经受温度急剧变化、冰晶形成、化学刺激、渗透压失衡以及氧化应激等一系列 “磨难”,这些因素相互交织,严重威胁着精子的活力、细胞膜的正常功能、线粒体的运作,最终导致受精能力大打折扣。为了突破这些困境,科研人员一直在不懈探索,尝试在冷冻稀释液中添加各种冷冻保护剂和抗氧化剂,期望能为精子撑起一把 “保护伞”。

在众多研究中,一种名为 BGP - 15((Z)-N'-(2 - 羟基 - 3-(哌啶 - 1 - 基) 丙氧基) 烟酰胺)的物质进入了研究人员的视野。它是一种具有强大抗氧化能力的胰岛素增敏分子,就像细胞内的 “忠诚卫士”,能够精准地聚集在线粒体中,有效抵御活性氧(ROS)引发的线粒体去极化,减少线粒体 ROS 的产生,还能降低细胞凋亡和坏死的风险,在多种氧化损伤模型中展现出强大的保护能力。不过,尽管 BGP - 15 在人类精液保存方面已初露锋芒,但在山羊精液冷冻保存领域,它的潜力尚未得到挖掘。

来自中国的研究人员针对这一现状,勇敢地踏上了探索之旅。他们提出了大胆的假设:BGP - 15 或许能通过减轻氧化应激、减少精子凋亡以及降低形态损伤,提升解冻后山羊精液的质量。为了验证这一假设,研究人员以 2% 大豆卵磷脂(SL)作为基础稀释液,在冷冻过程中添加不同浓度(0、50、100、150 和 200 μM)的 BGP - 15,全方位评估新鲜和冷冻精子的超微结构,以及冻融精子的关键质量参数、运动能力、氧化应激指标、酶活性和相关基因的 mRNA 表达水平,还深入探究了冻融精子的凋亡率、线粒体膜电位(MMP)和受精能力。研究成果发表在《Cryobiology》杂志上。

研究人员在本次研究中主要运用了以下关键技术方法:首先,精心挑选了 6 只来自上海崇明白山羊养殖场的 36 - 48 月龄、体重 45.0 ± 2.0 kg 的性成熟健康山羊作为样本来源,每周采集两次精液,共获取 48 份样本。其次,运用计算机辅助精液分析技术,对精子的运动参数进行精确测定。同时,采用生化检测方法,检测精子的抗氧化酶活性、活性氧水平等氧化应激指标。此外,通过实时荧光定量 PCR 技术,分析相关基因的 mRNA 表达变化。

结果

  1. 精液样本基础数据:实验共收集 48 份崇明白山羊精液样本,其中 40 份符合实验要求。合格新鲜精液样本体积为 1.31 ± 0.16 mL,精子活力达 88.67% ± 2.55%,精液密度为 60.89 ± 5.60 × 108精子 /mL。
  2. 精子质量相关指标:与新鲜精子相比,冷冻精子的超微结构遭受破坏,双联微管数量减少且分布部分不对称,中央微管局部消失,亚微管结构模糊不清。在不同浓度 BGP - 15 处理组中,100 μM BGP - 15 处理组的冻融精子活力、质膜和顶体完整性、线粒体活性的百分比最高,与对照组相比差异显著(P < 0.05)。计算机辅助精液分析显示,除摆动性外,BGP - 15 处理组精子运动参数较对照组显著提升(P < 0.05)。
  3. 氧化应激相关指标:BGP - 15 处理组的总抗氧化能力(T - AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GHS - Px)水平较对照组显著升高(P < 0.05),ROS 水平显著降低(P < 0.05)。不过,仅 100 μM BGP - 15 处理组的丙二醛(MDA)水平高于对照组(P < 0.05)。
  4. 基因表达相关指标:所有 BGP - 15 处理组的 ROMO1 基因 mRNA 表达较对照组显著降低(P <0.05),而 SMCP、MnSOD 和 CuZnSOD 基因的 mRNA 表达显著增加(P < 0.05)。50 μM BGP - 15 处理组与对照组的 SMOX 基因 mRNA 表达差异不显著(P> 0.05)。
  5. 精子凋亡和线粒体膜电位相关指标:100 μM BGP - 15 处理组冻融精子的凋亡率较对照组显著降低(P < 0.05),线粒体膜电位显著增强(P < 0.05)。

结论与讨论:研究结果清晰地表明,冷冻过程会对山羊精子的质膜、颈部和微管结构造成损伤,进而影响冻融精子的活力和质量。而添加 100 μM BGP - 15 能够显著改善冷冻精子的质量和运动能力,增强其抗氧化性能,同时降低精子凋亡率,提升线粒体膜电位。这一研究成果为山羊精液冷冻保存技术带来了新的突破,为山羊养殖和育种行业提供了极具价值的理论依据和实践指导。它不仅有助于优化现有冷冻保存方案,提高人工授精的成功率,还能推动山羊遗传资源的保护和利用,对促进山羊养殖业的可持续发展具有重要意义。未来,研究人员可在此基础上进一步拓展研究,探索 BGP - 15 在其他物种精液冷冻保存中的应用潜力,以及其作用的具体分子机制,为生命科学和畜牧繁育领域开辟更广阔的发展空间。
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