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为解决冷冻精液精子受损、受精能力下降的问题，研究人员开展了鞣花酸（EA）对山羊冻融后精子质量影响的研究。结果发现 5 μM EA 可提升精子活力、膜完整性等，降低 ROS 水平。这表明 EA 能维护精子质量，为精液保存提供新方法。
在动物繁殖领域，人工授精（AI）是大型养殖场的关键技术，而精子保存的效果直接决定了人工授精的成效。然而，精液在保存过程中状况百出。常温保存时，精子活力迅速下降，无法满足远距离运输需求；冷冻保存又会给精子带来严重损伤，导致其受精能力大打折扣。这背后的 “罪魁祸首” 之一就是氧化应激（OS），在精子冷冻过程中，会产生大量活性氧（ROS），ROS 会引发脂质过氧化（LPO），破坏精子细胞膜，影响精子活力和受精能力 。而且，精子自身缺乏内源性抗氧化物质，更是 “雪上加霜”。在此背景下，研究如何利用抗氧化剂改善精液保存效果迫在眉睫。
为了解决这些问题，青岛农业大学的研究人员开展了一项关于鞣花酸（Ellagic acid，EA）对山羊冻融后精子质量影响的研究。该研究成果发表在《Cryobiology》杂志上。
研究人员用到的主要关键技术方法包括：从青岛奥特种羊场选取 10 只约 2 岁的健壮且有生育能力的崂山山羊，用人工阴道采集精液；利用计算机辅助精子分析（CASA）技术检测精子活力参数；对精子的顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性、ATP 含量、NADH/NAD+水平、NADH-CoQ 活性，以及精子线粒体 ROS 水平、丙二醛（MDA）水平、氧化 DNA 损伤、细胞凋亡、NADH 脱氢酶 1（MT-ND1）和 NADH 脱氢酶 6（MT-ND6）蛋白水平、4 - 羟基壬烯醛（4-HNE）水平等进行检测分析 。
研究结果如下：
- 鞣花酸增强冻融后精子活力参数：通过 CASA 分析发现，与对照组相比，添加 2.5 μM - 10 μM 的 EA 可提高（P < 0.05）精子活力参数，包括总活力（TM）、前向运动活力（PM）、曲线速度（VCL）、平均路径速度（VAP）、直线速度（VSL）、直线度（STR）和线性度（LIN）。其中，在冷冻培养基中添加 5 μM EA 时，精子活力参数达到最高（P < 0.05）。这表明适宜浓度的 EA 能有效提升冻融后精子的运动能力。
- 鞣花酸对精子其他指标的影响：5 μM EA 处理组在精子顶体完整性、质膜完整性方面表现更优，线粒体活性和 ATP 含量显著高于其他处理组，同时 ROS 和 MDA 水平显著降低。这说明 EA 不仅能保护精子细胞膜和顶体结构，还能维持线粒体的正常功能，促进 ATP 生成，减少氧化损伤。
- 鞣花酸降低精子氧化损伤和细胞凋亡：EA 能降低精子中的 4-HNE 水平和氧化 DNA 损伤，且 5 μM EA 显著（P < 0.05）降低精子凋亡水平。这表明 EA 可以减轻精子受到的氧化应激损伤，抑制细胞凋亡，从而提高精子的存活率和质量。
- 鞣花酸维持线粒体蛋白水平：添加 5 μM EA 可维持冻融后精子 MT-ND1 和 MT-ND6 水平，减少 ROS 对 MT-ND1 和 MT-ND6 的负面影响，进而维持线粒体产生 ATP 的功能。这揭示了 EA 保护精子线粒体功能的潜在机制，即通过维持线粒体相关蛋白的稳定来保障能量供应。
研究结论和讨论部分指出，在山羊精子冷冻保存过程中，精子会受到氧化应激和过量 ROS 的影响，对 MT-ND1 和 MT-ND6 蛋白造成负面影响，导致线粒体功能下降。而将鞣花酸添加到冷冻培养基中，可以保护线粒体蛋白免受 ROS 损伤，改善精子活力、顶体和膜完整性、ATP 水平以及线粒体功能，同时降低 MDA 水平。这一研究成果意义重大，为山羊精液冷冻保存提供了新的策略和方法。抗氧化剂鞣花酸的应用有望提高人工授精的成功率，促进山羊养殖业的发展。此外，该研究也为其他动物精液保存研究提供了参考，推动了动物繁殖领域的技术进步。
