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为解决甜瓜受黄瓜花叶病毒(CMV)影响产量的问题,研究人员开展了对 CMV 感染甜瓜的蛋白质组研究。结果发现不同阶段 CMV 感染引发甜瓜蛋白质组变化,明确了抗性和感病基因型的差异。这为理解 CMV 感染机制及制定防治策略提供了依据。
在植物的世界里,甜瓜作为葫芦科的重要作物,却时常遭受病毒的侵袭,其中黄瓜花叶病毒(Cucumber Mosaic Virus,CMV)尤为棘手。CMV 宿主范围极广,能感染超 1000 种植物,严重威胁甜瓜的产量。甜瓜对 CMV 的抗性多由少数基因控制,如 Songwhan Charmi(SC)品种中的 cmv1 基因,编码液泡蛋白分选 41(Vacuolar Protein Sorting 41,CmVPS41),参与囊泡运输,但对于 CMV 感染甜瓜后引发的更广泛细胞变化,以及在感病和抗病品种中病毒进入韧皮部的具体生物学反应,人们知之甚少。为了揭开这些谜团,Centre for Research in Agricultural Genomics(CRAG)等机构的研究人员开展了相关研究,其成果发表在《BMC Plant Biology》上。这一研究有助于深入理解 CMV 与甜瓜的相互作用机制,为防治 CMV 提供新的思路和潜在靶点,在农业生产上具有重要意义。
研究人员运用了多种关键技术方法。首先,选用西班牙易感品种 Piel de Sapo(PS)、韩国抗病品种 Songwhan Charmi(SC)及携带 cmv1 基因的近等基因系(Near Isogenic Line,NIL)SC12 - 1 - 99 进行实验。通过用 CMV 的 LS 和 FNY 株系接种甜瓜幼苗,在感染后不同时间采集子叶(4 天)和新叶(15 天)样本。接着采用液质联用技术(Liquid Chromatography - tandem Mass Spectrometry,LC - MS/MS)分析蛋白质组,利用 MaxQuant 软件处理数据,通过构建共丰度网络探究蛋白质间的关系,还运用统计学方法筛选差异表达蛋白。
- 抗性对信号传导的影响:研究发现,NIL 植物感染 CMV - LS 后,在系统感染阶段,新叶中无差异表达蛋白(Differentially Abundant Proteins,DAPs),这表明抗性对 CMV - LS 的抵抗并未触发从接种子叶到新叶的信号传导事件,且 NIL 对 CMV - LS 的抗性在系统组织中未产生负面影响。
- 共丰度网络反映的生物过程变化:构建的共丰度蛋白质网络显示,局部和系统感染网络在拓扑结构上有相似之处,但也存在差异。功能注释表明,局部网络在与压力相关的过程以及病毒感染和传播相关过程中富集,而系统网络则在次生代谢、RNA 结合和蛋白质降解等方面富集,这体现了不同组织在应对 CMV 感染时的功能特化。
- 抗病品种的蛋白质变化:在局部感染时,抗病甜瓜基因型重新配置蛋白质组,增加了与防御和系统信号传导相关的韧皮部蛋白和脂氧合酶(Lipoxygenase,LOX)的丰度,同时减少了与翻译、色素和次生代谢物合成相关的蛋白质,这可能是植物抵御病毒的一种策略。
- 感病品种的蛋白质变化:在系统感染时,感病组合中与蛋白质折叠、降解、输出和苯丙烷类生物合成相关的蛋白质增加,而与翻译、能量和光合作用相关的蛋白质减少,这表明植物在应对病毒感染时,能量产生途径被消耗,防御相关途径增强。同时,研究还发现了一些关键的中心蛋白,它们在病毒感染过程中发挥着重要作用。
- 不同品种蛋白质差异:不同品种在子叶阶段存在一些 DAPs,主要参与次生代谢物合成、光合作用和韧皮部发育等过程,但在新叶阶段无 DAPs 差异,这说明不同品种在局部组织的蛋白质丰度存在差异,而在系统组织中差异不明显。
研究结论和讨论部分指出,该研究首次全面高通量地分析了 CMV 感染甜瓜的蛋白质组,揭示了抗病和感病甜瓜植株的蛋白质组差异。在局部感染时,抗病植株展现出明显的韧皮部相关防御机制和增强的脂质修饰;感病植株则出现更广泛的紊乱。在系统感染阶段,只有感病植株的系统组织发生显著蛋白质组变化。这些发现为深入理解 CMV 感染机制提供了新视角,识别出的关键蛋白可作为未来研究和防治 CMV 的潜在靶点,对农业生产中防控 CMV 具有重要的理论和实践指导意义。