生物制药中蛋白质聚集体和不溶性颗粒分析技术应用要点探究：日本生物制药联盟的经验与启示

《The AAPS Journal》：Survey and Establishment of Points to Consider for Application of Analytical Techniques to Evaluate Protein Aggregates and Insoluble Particles in Biopharmaceuticals: Experiences in Japan Biopharmaceutical Consortium

为解决生物制药中蛋白质聚集体和不溶性颗粒评估与控制的问题，日本生物制药联盟研究人员开展了关于应用分析技术评估此类颗粒的研究。通过问卷调研，发现 SEC、LO 和视觉检查常用，FI 在亚可见颗粒表征中使用较多。该研究为建立控制策略提供了参考114。

　　在生物制药领域，蛋白质聚集体和不溶性颗粒如同隐藏在药品中的 “暗礁”，时刻威胁着药品的质量与安全性。这些杂质可能引发免疫原性反应，影响药物疗效，严重时甚至危害患者健康。长期以来，如何精准评估和有效控制它们，一直是困扰科研人员的难题。不同分析技术各有优劣，且在如何联合使用多种技术建立控制策略方面，业界缺乏共识。在此背景下，为突破这一困境，日本生物制药联盟的研究人员挺身而出，开展了一项极具意义的研究123。

研究人员通过精心设计问卷，对日本多家生物制药公司进行调研，旨在了解不同开发阶段评估蛋白质聚集体和不溶性颗粒所采用的分析技术，进而探讨如何建立更有效的控制策略。问卷参考了先前研究以及药典和指南的相关建议，全面涵盖了各类分析技术的使用情况、控制策略的制定依据等关键问题45。

研究中用到的主要关键技术方法包括问卷调查法，收集 17 家参与公司的反馈并分析 16 家公司数据；还涉及多种分析技术，如尺寸排阻色谱（SEC）用于分析高分子量物质，光阻法（LO）用于颗粒物质测试，流成像（FI）用于亚可见颗粒表征等16。

下面来看具体的研究结果：

• 分析技术使用情况：研究发现，从早期开发到商业化生产，尺寸排阻色谱（SEC）、光阻法（LO）和视觉检查，常被用于药物物质和产品的放行或稳定性测试。在众多用于亚可见颗粒的分析技术中，除了用于药典测试的光阻法（LO），流成像（FI）的使用频率最高，但各公司在如何更好地利用 FI 方面尚未达成一致167。
• 控制策略相关调查：在关于建立控制策略的调查中，多数公司表示有将聚集体和不溶性颗粒评估结果反馈到控制策略开发中的经验。然而，在设定颗粒相关标准方面，除了药典等参考资料外，很少有公司使用其他标准。当颗粒数量超出标准时，多数公司会去确定颗粒来源89。
• 可见颗粒评估：对于可见颗粒，超过 60% 的参与公司会设定 100% 检查的拒收率限制，并使用可接受质量限（AQL）确定样本量和缺陷瓶数。对于生物制药中可能出现的固有颗粒，如蛋白质颗粒和硅油滴，部分公司在满足一定标准的情况下会允许其存在1011。
• 安全性评估：约 35% 的参与公司在开发和上市后遇到过因蛋白质聚集体和不溶性颗粒引发的安全问题。多数公司认为在评估和控制这些颗粒的安全风险方面存在挑战，尤其在开发早期。此外，多数公司未进行过使用含大量聚集体和不溶性颗粒批次的非临床安全测试或体外评估1213。

研究结论和讨论部分强调了多方面的重要意义：一方面，明确了常用分析技术在生物制药不同阶段的应用情况，为行业提供了实践参考；另一方面，指出当前分析技术在定量评估亚微米颗粒方面存在不足，为后续技术研发指明了方向。同时，基于研究结果总结出的控制策略要点，有助于制药企业更科学地制定质量控制方案，保障生物制药的质量和安全性，推动整个生物制药行业的发展。该研究成果发表在《The AAPS Journal》，为全球生物制药领域在蛋白质聚集体和不溶性颗粒的研究和控制上贡献了宝贵经验 。