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为解决光动力疗法（PDT）后肿瘤转移问题，安徽中医药大学研究人员开展了关于炎症靶向纳米药物预防 PDT 后肿瘤转移的研究。结果显示该纳米药物可抑制肿瘤转移且安全性良好，为提高 PDT 疗效提供新途径。
在肿瘤治疗的领域中，光动力疗法（Photodynamic Therapy，PDT）一直备受关注。它利用特定波长激发光敏剂，在肿瘤组织内产生大量活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS），进而杀死肿瘤细胞，听起来就像给肿瘤精准投放 “氧气炸弹” 。然而，随着研究的深入，人们发现延长 PDT 的照射时间虽然能增加 ROS 的产生，有助于更好地消灭肿瘤，但却带来了意想不到的副作用。过量的 ROS 就像一把双刃剑，不仅会诱导肿瘤细胞发生上皮间质转化（Epithelial-Mesenchymal Transition，EMT），让肿瘤细胞变得更具侵袭性，还会营造出一种免疫抑制微环境，帮助肿瘤细胞逃脱免疫系统的监视，最终导致肿瘤转移。这一现象就如同打开了 “潘多拉魔盒”，给肿瘤治疗带来了新的难题。为了解决这些问题，安徽中医药大学的研究人员开展了一项极具创新性的研究。他们致力于研发一种新型的炎症靶向纳米药物，希望能够抑制 PDT 后的肿瘤转移，为肿瘤患者带来新的希望。最终，他们成功制备出了一种名为 NLASF 的纳米药物，并证明其能够有效抑制肿瘤转移，且在体内应用时没有明显的血液毒性和器官毒性。这项研究成果发表在《Journal of Nanobiotechnology》上，为提高 PDT 的疗效提供了新的策略和方法，在肿瘤治疗领域具有重要的意义。
研究人员在研究过程中用到了多种关键技术方法。首先，构建了 4T1-Luc 小鼠肿瘤模型，用于模拟肿瘤的生长和转移过程。然后，通过细胞实验和动物实验，利用共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）、流式细胞术、Transwell 实验等技术，检测药物对细胞迁移、免疫细胞功能、肿瘤转移等方面的影响。
研究结果如下：
- 延长 PDT 产生高水平 ROS 并加剧肺转移：研究人员建立了肿瘤模型，对不同 PDT 处理时长的小鼠进行研究。结果发现，延长 PDT 持续时间，虽然能更有效地消融原发性肿瘤，但也会导致肿瘤组织中丙二醛（MDA）水平升高、超氧化物歧化酶（SOD）水平降低，增加氧化应激。同时，肺转移情况随着 PDT 时间延长而恶化，免疫检测发现肿瘤组织中 CD3+CD8+ T 细胞增多，但肺组织中髓源性抑制细胞（MDSCs）比例上升，免疫荧光图像显示肿瘤组织发生 EMT，即波形蛋白（Vimentin）上调、E - 钙黏蛋白（E-cadherin）下调。
- NLASF 的制备和表征：研究人员诱导 HL-60 细胞分化为中性粒细胞，提取中性粒细胞膜（NM），并合成纳米酶 FeGA。通过乙醇注射法制备脂质体（LIPs），将 FeGA、赖氨酸乙酰水杨酸（Lysine Acetylsalicylate，LAS）、LIPs 和 NM 共挤出，得到 NLASF。DLS 检测显示其粒径约为 181.5nm，zeta 电位为 - 22.0 ± 0.3mV，SDS-PAGE 分析表明 NLs 保留了完整的中性粒细胞蛋白，HPLC 和铁含量分析显示 LAS 和 FeGA 的包封率均超过 80%。
- NLs 在体内显示出良好的肿瘤靶向性：通过构建荷瘤小鼠模型，进行体内成像实验。结果显示，DiR 标记的 NLs（NLs@DiR）比 DiR 标记的 LIPs 具有更强的肿瘤靶向富集能力，且在光热治疗（PTT）后，NLs@DiR 的肿瘤靶向效果显著增强。
- NLASF 抑制血小板和 ROS 诱导的癌症转移：体外实验表明，血小板促进肿瘤细胞的迁移和 EMT，而 NLASF 能逆转这一过程。Transwell 实验显示，含有 LAS 的制剂可显著减少肿瘤细胞迁移和跨内皮迁移。血小板聚集实验和血小板 - 肿瘤细胞黏附实验表明，LAS 和 NLASF 能抑制血小板聚集和血小板与肿瘤细胞的黏附。此外，研究发现过量 ROS 促进肿瘤细胞迁移，而含有抗氧化纳米酶 FeGA 的制剂可抑制这一过程。
- NLASF 在体外和体内均能清除 ROS 并激活免疫功能：通过 TMB、DPPH 和 ABTS 等实验，证明 FeGA 和 NLASF 具有抗氧化能力。细胞实验表明，H2O2抑制 T 细胞增殖，而 FeGA 可恢复 T 细胞活力和增殖能力。体内实验显示，NLASF 能有效恢复肿瘤组织中 SOD 水平，降低 MDA 水平，减弱肿瘤周围的化学发光信号，增强 T 细胞功能。
- NLASF 在延长 PDT 后的体内抗肿瘤和免疫激活作用：建立荷瘤小鼠模型，在延长 PDT 后给予不同制剂处理。结果显示，NLASF 显著抑制肿瘤复发，减小平均肿瘤体积，同时增加肿瘤组织中 CD3+CD8+ T 细胞、IFN-γ 和颗粒酶 B（GZMB）阳性 CD8+ T 细胞的浸润，减少免疫抑制细胞的浸润。
- NLASF 抑制延长 PDT 治疗后的肺转移：对治疗后的小鼠肺组织进行分析，发现 NLASF 处理组的肺转移结节数量明显减少，几乎消除了肿瘤转移。免疫细胞分析表明，NLASF 降低了肺组织中免疫抑制细胞的比例，增加了 CD3+CD8+ T 细胞和 NK1.1+细胞的比例。
- NLASF 的体内安全性评估：通过尾出血实验、血液学分析和血浆生化检查，发现用游离 LAS/FeGA 处理会导致出血和血小板减少，而 NLs 包裹的纳米药物具有良好的生物相容性和安全性，主要器官无明显异常。
研究结论和讨论部分指出，本研究通过延长 PDT 时间增强其疗效，但发现这会导致 ROS 产生增加，促进肿瘤细胞 EMT 和转移。而 NLASF 纳米平台能有效逆转肿瘤细胞的 EMT 和肿瘤组织的免疫抑制微环境，抑制肿瘤肺转移，且降低了游离 LAS 的体内毒性。这一研究证实了通过 NLASF 进行氧化还原调节和抗血小板治疗是预防 PDT 诱导的肿瘤转移的有前景的治疗策略，为肿瘤治疗领域开辟了新的方向，有望为临床肿瘤治疗提供更有效的手段。
